{"id":3703,"date":"2026-01-15T12:17:11","date_gmt":"2026-01-15T17:17:11","guid":{"rendered":"https:\/\/laboratorytesting.com\/?page_id=3703"},"modified":"2026-01-15T12:47:58","modified_gmt":"2026-01-15T17:47:58","slug":"using-qpcr-to-detect-sewage-contamination","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/resources\/dna-pcr\/using-qpcr-to-detect-sewage-contamination\/","title":{"rendered":"Utilizando qPCR para detectar contamina\u00e7\u00e3o por esgoto"},"content":{"rendered":"
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Utilizando qPCR para detectar contamina\u00e7\u00e3o por esgoto<\/h2>\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t
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Higienistas industriais e profissionais de sa\u00fade ambiental s\u00e3o frequentemente solicitados a determinar a presen\u00e7a de contamina\u00e7\u00e3o fecal ap\u00f3s transbordamentos de esgoto e inunda\u00e7\u00f5es causadas por tempestades. Muitos utilizam os testes tradicionais de bact\u00e9rias indicadoras fecais (FIBs), que cultivam coliformes totais, coliformes fecais, E. coli<\/em>, ou Enterococos<\/em> para essas aplica\u00e7\u00f5es. Embora seja amplamente reconhecido que esses testes n\u00e3o s\u00e3o espec\u00edficos nem sens\u00edveis o suficiente para serem considerados bons indicadores de contamina\u00e7\u00e3o fecal, eles eram os \u00fanicos testes dispon\u00edveis at\u00e9 recentemente. Com a comercializa\u00e7\u00e3o da Rea\u00e7\u00e3o em Cadeia da Polimerase (especificamente a Rea\u00e7\u00e3o em Cadeia da Polimerase quantitativa ou qPCR), testes gen\u00f4micos e pesquisas adicionais sobre o uso de outros organismos indicadores de contamina\u00e7\u00e3o fecal, agora temos testes mais sens\u00edveis e espec\u00edficos para determinar a presen\u00e7a de contamina\u00e7\u00e3o fecal ou de esgoto.<\/p>

As fezes cont\u00eam uma quantidade extraordin\u00e1ria de microrganismos: bact\u00e9rias, v\u00edrus, protozo\u00e1rios e helmintos \u2014 alguns dos quais s\u00e3o patog\u00eanicos. No entanto, n\u00e3o \u00e9 tecnicamente poss\u00edvel cultivar todos os tipos de organismos patog\u00eanicos presentes nas fezes, e faz\u00ea-lo seria proibitivamente caro. Como os testes tradicionais de cultura para indicadores de contamina\u00e7\u00e3o fecal (ICF) s\u00e3o f\u00e1ceis e baratos, eles t\u00eam sido usados h\u00e1 mais de 60 anos como indicadores da poss\u00edvel presen\u00e7a de pat\u00f3genos nas fezes. Contudo, a comunidade cient\u00edfica reconhece h\u00e1 bastante tempo que existem s\u00e9rias limita\u00e7\u00f5es quando esses testes s\u00e3o usados como indicadores rigorosos de contamina\u00e7\u00e3o fecal em amostras de \u00e1gua. Essas limita\u00e7\u00f5es se agravam quando os ICF cultivados s\u00e3o usados para an\u00e1lise de amostras superficiais ou em massa em ambientes internos.<\/p>

A Ag\u00eancia de Prote\u00e7\u00e3o Ambiental (EPA), o Servi\u00e7o Geol\u00f3gico dos Estados Unidos (USGS) e in\u00fameros pesquisadores em todo o mundo est\u00e3o conduzindo pesquisas sobre novos m\u00e9todos indicadores que utilizam m\u00e9todos r\u00e1pidos em vez de testes de cultura. O mais promissor at\u00e9 o momento tem sido o uso da tecnologia qPCR para testar a presen\u00e7a total de bact\u00e9rias. Bacteroides<\/em>, humano Bacteroides<\/em>, e poliomav\u00edrus humanos (HPyVs), que demonstraram ser altamente espec\u00edficos e sens\u00edveis para essa aplica\u00e7\u00e3o. De acordo com estudos, n\u00e3o existe associa\u00e7\u00e3o, ou no m\u00e1ximo uma fraca, entre a presen\u00e7a ou aus\u00eancia desses novos indicadores e a contagem dos testes de cultura FIB. Em outras palavras, os testes de cultura FIB apresentam uma alta porcentagem de resultados falso-positivos e falso-negativos, enquanto Bacteroides<\/em> As esp\u00e9cies s\u00e3o altamente espec\u00edficas para contamina\u00e7\u00e3o fecal, e os HPyVs s\u00e3o altamente espec\u00edficos para contamina\u00e7\u00e3o fecal humana.<\/p>

Bacteroides<\/em> S\u00e3o bact\u00e9rias anaer\u00f3bicas que predominam nas fezes de mam\u00edferos e de algumas aves. Estimativas indicam que Bacteroides<\/em> est\u00e3o presentes em concentra\u00e7\u00f5es enormes nas fezes (100.000.000.000 c\u00e9lulas por grama de fezes secas!) \u2013 superando em muito o n\u00famero de coliformes., E. coli<\/em>, ou Enterococcus<\/em> concentra\u00e7\u00f5es. Desde Bacteroides<\/em> N\u00e3o conseguem sobreviver na presen\u00e7a de oxig\u00eanio, n\u00e3o persistem nem se multiplicam fora do intestino como os FIBs. Bacteroides<\/em> est\u00e3o presentes apenas na contamina\u00e7\u00e3o fecal \u2013 ao contr\u00e1rio de alguns coliformes, que s\u00e3o bact\u00e9rias presentes no solo e E. coli<\/em> e alguns Enterococcus<\/em> esp\u00e9cies que podem n\u00e3o ser espec\u00edficas para contamina\u00e7\u00e3o fecal (ou seja, E. coli<\/em> Podem ser encontrados em \u00e1guas limpas e sedimentos em latitudes tropicais, e alguns Enterococos<\/em> s\u00e3o transmitidas pelo solo). Bacteroides<\/em>\u2019A natureza anaer\u00f3bica do teste \u00e9 uma grande vantagem na detec\u00e7\u00e3o de contamina\u00e7\u00e3o fecal ou de esgoto. Como a PCR detecta o material gen\u00e9tico (neste caso, o DNA) e n\u00e3o depende do cultivo de organismos vivos, esses testes n\u00e3o exigem transporte especial nem t\u00eam prazos de entrega particularmente curtos. Al\u00e9m disso, o teste \u00e9 muito mais sens\u00edvel do que o FIBS. Portanto, a natureza anaer\u00f3bica do teste \u00e9 uma grande vantagem. Bacteroides<\/em>, suas enormes concentra\u00e7\u00f5es nas fezes, e a sensibilidade e especificidade do qPCR tornam o teste para essas bact\u00e9rias mais f\u00e1cil e eficaz do que o uso de culturas de FIB. (Existem testes de qPCR para E. coli<\/em> e Enterococos<\/em> Mas, devido \u00e0s concentra\u00e7\u00f5es relativamente baixas dessas bact\u00e9rias nas fezes, elas podem n\u00e3o ser detectadas se o material fecal for dilu\u00eddo.<\/p>

Diferentes tipos de Bacteroides<\/em> Existem bact\u00e9rias que permitem aos analistas testar tipos espec\u00edficos de contamina\u00e7\u00e3o. Um desses tipos \u00e9 chamado de contamina\u00e7\u00e3o total. Bacteroides<\/em>, abrange fontes mam\u00edferas, algumas avi\u00e1rias e humanas. Devido \u00e0 sensibilidade do total Bacteroides<\/em> Para realizar o teste qPCR, \u00e9 crucial incluir amostras de fundo de \u00e1reas que n\u00e3o estejam contaminadas ou afetadas por esgoto ou fezes. (Este teste pode detectar at\u00e9 mesmo contamina\u00e7\u00e3o cruzada fecal proveniente de sapatos sujos e esfreg\u00f5es.)<\/p>

Outro tipo de teste qPCR, Humano Bacteroides<\/em>, O teste \u00e9 amplamente espec\u00edfico para amostras de origem humana, uma vez que se concentra em marcadores gen\u00e9ticos humanos. Na pr\u00e1tica, isso significa que os resultados podem ser interpretados com um alto grau de confian\u00e7a, j\u00e1 que o teste \u00e9 espec\u00edfico para material fecal humano.<\/p>

As evid\u00eancias sugerem que os HPyVs s\u00e3o ainda mais espec\u00edficos do que os Bacteroides humanos. Bacteroides<\/em> Os HPyVs diferem entre si pelo fato de os primeiros serem encontrados nas fezes, enquanto os HPyVs s\u00e3o encontrados apenas na urina humana. Como urina e fezes s\u00e3o excretadas juntas, esse v\u00edrus \u00e9 encontrado em altas concentra\u00e7\u00f5es em \u00e1guas residuais e esgoto urbano. Al\u00e9m disso, os HPyVs s\u00e3o bons indicadores de contamina\u00e7\u00e3o fecal humana e \u00fateis no rastreamento da origem microbiana, uma vez que n\u00e3o est\u00e3o presentes no escoamento de atividades agropecu\u00e1rias ou confinamento de gado. (Observa\u00e7\u00e3o: os HPyVs estar\u00e3o presentes no escoamento de atividades agr\u00edcolas em pa\u00edses em desenvolvimento onde excrementos humanos ou "\u00e1gua negra" s\u00e3o usados como fertilizante ou onde as pr\u00e1ticas de saneamento s\u00e3o prec\u00e1rias.)<\/p>

Os HPyVs n\u00e3o s\u00e3o encontrados em \u00e1guas superficiais onde n\u00e3o h\u00e1 impacto humano conhecido, nem em amostras de dejetos de latic\u00ednios, aves ou su\u00ednos (todos os quais cont\u00eam Bacteroides<\/em>De acordo com estudos, esses v\u00edrus s\u00e3o exclusivos dos humanos e onipresentes em humanos no mundo todo. Um ser humano saud\u00e1vel pode excretar um milh\u00e3o dessas part\u00edculas virais em um mililitro de urina, facilitando a detec\u00e7\u00e3o. Tudo isso indica a possibilidade de um teste extremamente espec\u00edfico e sens\u00edvel para contamina\u00e7\u00e3o fecal humana \u2014 ainda mais espec\u00edfico do que o teste para detec\u00e7\u00e3o de contamina\u00e7\u00e3o fecal humana. Bacteroides<\/em> an\u00e1lise.<\/p>

Apesar da diferen\u00e7a nas fontes, Bacteroides<\/em> Os HPyVs e os HPyVs compartilham uma importante semelhan\u00e7a: os laborat\u00f3rios de an\u00e1lise podem detect\u00e1-los muito rapidamente. Como a qPCR \u00e9 usada para testar ambos os indicadores, os analistas podem examinar as amostras e fornecer os resultados ao cliente em at\u00e9 24 horas. Esse r\u00e1pido tempo de resposta \u00e9 imposs\u00edvel com os testes de FIBs baseados em cultura, pois as bact\u00e9rias precisam ser cultivadas antes mesmo da an\u00e1lise.<\/p>

Como os HPyVs s\u00e3o v\u00edrus e n\u00e3o bact\u00e9rias, eles tamb\u00e9m podem se revelar excelentes indicadores da presen\u00e7a de enterov\u00edrus (v\u00edrus encontrados nas fezes). Se isso se confirmar, representaria um enorme avan\u00e7o na avalia\u00e7\u00e3o da transmiss\u00e3o e preval\u00eancia de enterov\u00edrus. Os procedimentos atuais dos M\u00e9todos Padr\u00e3o da Associa\u00e7\u00e3o Americana de Sa\u00fade P\u00fablica (APHA) para enterov\u00edrus s\u00e3o muito trabalhosos e exigem a coleta de amostras de grande volume (100 a 1500 litros). Esse fato complica o processo de teste, pois as regulamenta\u00e7\u00f5es atuais do Departamento de Transportes dos EUA (DOT) pro\u00edbem o transporte interestadual de material bio-perigoso em volumes superiores a 4 litros. Em resposta a essas regulamenta\u00e7\u00f5es, as amostras s\u00e3o frequentemente filtradas em campo e os filtros s\u00e3o enviados ao laborat\u00f3rio. Essas etapas criam consider\u00e1veis oportunidades de contamina\u00e7\u00e3o das amostras, o que poderia ser evitado se os HPyVs fossem utilizados como indicadores.<\/p>

Como atualmente existem diversos testes dispon\u00edveis para detectar contamina\u00e7\u00e3o fecal, a quest\u00e3o que surge \u00e9: "Como escolher entre os testes?"\u201c<\/p>

Se sua preocupa\u00e7\u00e3o for a contamina\u00e7\u00e3o por \u00e1gua superficial, \u00e1gua de rio ou \u00e1gua pluvial ap\u00f3s uma inunda\u00e7\u00e3o, total Bacteroides<\/em> \u00e9 a melhor op\u00e7\u00e3o, visto que o escoamento de ruas (fezes de cachorro), o escoamento contaminado com esterco proveniente de atividades agr\u00edcolas e os transbordamentos combinados (tanto de esgoto sanit\u00e1rio quanto de \u00e1guas pluviais) s\u00e3o preocupantes. Nessa situa\u00e7\u00e3o, existe o potencial de doen\u00e7as em humanos causadas por fontes de contamina\u00e7\u00e3o tanto de origem animal quanto humana. Total Bacteroides<\/em> indicar\u00e1 a presen\u00e7a de todos esses potenciais contaminantes.<\/p>

O ser humano Bacteroides<\/em> O teste \u00e9 a melhor op\u00e7\u00e3o se sua preocupa\u00e7\u00e3o for um vaso sanit\u00e1rio entupido ou um refluxo\/transbordamento da rede de esgoto (que lida apenas com dejetos humanos). O uso de Bacteroides humanos elimina praticamente qualquer contamina\u00e7\u00e3o de fundo proveniente de animais de estima\u00e7\u00e3o.<\/p>

Bacteroides<\/em> Pode ser utilizado para amostragem ambiental interna de superf\u00edcie ou em massa, amostras de \u00e1gua, \u00e1guas residuais e solo n\u00e3o autorizadas, investigativas ou voltadas para pesquisa, uma vez que n\u00e3o h\u00e1 licen\u00e7as estipuladas ou requisitos legais.<\/p>

No entanto, se voc\u00ea estiver coletando amostras de \u00e1gua pot\u00e1vel, \u00e1gua recreativa ou efluentes de esgoto como parte de uma avalia\u00e7\u00e3o de conformidade para uma condi\u00e7\u00e3o regulamentada pelo Sistema Nacional de Preven\u00e7\u00e3o e Elimina\u00e7\u00e3o de Descargas (NPDES), ainda ser\u00e1 necess\u00e1rio usar m\u00e9todos de cultura dependentes de indicadores de contamina\u00e7\u00e3o fecal (FIB) para coliformes, E. coli ou enterococos.<\/p>

At\u00e9 o momento, as pesquisas com testes de PCR para HPyVs foram realizadas apenas para determinar a contamina\u00e7\u00e3o fecal humana em \u00e1gua e esgoto. Como seu uso n\u00e3o foi validado para amostras de superf\u00edcie, solo ou sedimentos, a amostragem para esses fins deve ser restrita a amostras de superf\u00edcie e esgoto. A vantagem de usar HPyVs nesse caso \u00e9 a elimina\u00e7\u00e3o completa da contamina\u00e7\u00e3o de fundo por material fecal animal.<\/p>

Em resumo, as vantagens de usar testes de PCR em vez de culturas de FIBs s\u00e3o:<\/p>

  1. Os testes atuais de cultura FIB apresentam uma alta porcentagem de resultados falso-positivos e falso-negativos, enquanto o total Bacteroides<\/em> s\u00e3o espec\u00edficas para contamina\u00e7\u00e3o fecal.<\/li>
  2. Ao contr\u00e1rio dos testes de enriquecimento qualitativos para detec\u00e7\u00e3o de FIBS em baixas concentra\u00e7\u00f5es, esses testes de PCR s\u00e3o quantitativos mesmo em baixos n\u00edveis de contamina\u00e7\u00e3o fecal.<\/li>
  3. Humano Bacteroides<\/em> Os HpyVs s\u00e3o espec\u00edficos apenas para contamina\u00e7\u00e3o fecal humana. Os FIBs de cultura atuais n\u00e3o conseguem distinguir entre fontes humanas ou animais de contamina\u00e7\u00e3o fecal.<\/li>
  4. Os resultados podem ser obtidos horas ap\u00f3s o recebimento das amostras, permitindo o fechamento do edif\u00edcio e o in\u00edcio dos trabalhos de remedia\u00e7\u00e3o sem atrasos significativos.<\/li>
  5. Os resultados podem ser interpretados com um alto grau de confian\u00e7a, uma vez que os testes de PCR, quando realizados corretamente, eliminam os resultados falso-positivos e falso-negativos que s\u00e3o comuns nos testes de cultura FIB.<\/li><\/ol>\t\t\t\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/section>\n\t\t\t\t<\/div>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Using qPCR to Detect Sewage Contamination Industrial Hygienists and environmental health professionals are frequently asked to determine if fecal contamination exists after sewage overflows, and after flooding from storm events. Many have used the traditional fecal indicator bacteria tests (FIBs) […]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"parent":3346,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"content-type":"","footnotes":""},"class_list":["post-3703","page","type-page","status-publish","hentry","slug-using-qpcr-to-detect-sewage-contamination","odd_post_id"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/3703","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=3703"}],"version-history":[{"count":17,"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/3703\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3725,"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/3703\/revisions\/3725"}],"up":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/3346"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/laboratorytesting.com\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3703"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}