Bacteroides
Existen métodos de cultivo disponibles para analizar la contaminación por aguas residuales en edificios (M117 y M013), así como nuevos métodos. Bacteroides Métodos basados en PCR. El Bacteroides La prueba tiene muchas ventajas sobre las pruebas de cultivo tradicionales para coliformes totales, coliformes fecales, estreptococos fecales, enterococos y E. coli pruebas, que incluyen:
- Bacteroides Es específico para la contaminación fecal de todas las fuentes: animales, aves y humanos.
- Coliformes, E. coli, los estreptococos y enterococos fecales pueden crecer en el agua, el suelo, los sedimentos y la vegetación en ambientes no contaminados. (Nota: E. coli se pueden encontrar en entornos tropicales prístinos).
- Debido a que son anaeróbicos, Bacteroides no se multiplicará en el medio ambiente.
- Bacteroides superan en número a los coliformes en una proporción de 1.000:1 y superan en número a los coliformes en una proporción de 1.000:1. E. coli por 10.000:1; por lo tanto, la probabilidad de encontrar Bacteroides aumenta considerablemente.
- Las pruebas tradicionales basadas en cultivos dependen de la presencia de bacterias vivas. Desafortunadamente, estas bacterias a menudo no son viables en ambientes interiores. ESTO SIGNIFICA QUE UN RESULTADO NEGATIVO DE COLIFORMES o E. coli EN UNA MUESTRA DE INTERIOR PUEDE NO PROBAR LA AUSENCIA DE CONTAMINACIÓN FECAL. Bacteroides Esta prueba supera esta limitación. Dado que se utiliza la PCR, el laboratorio puede detectar bacterias vivas, no viables o viables pero no cultivables.
- Usando Total Bacteroides (M095), ahora es posible determinar la cantidad de contaminación fecal de fuentes no humanas y humanas.
- Utilizando humanos Bacteroides (M199) determina la cantidad de contaminación fecal proveniente únicamente de fuentes humanas.
Procedimiento de muestreo
Para el muestreo Bacteroides Es importante usar guantes de nitrilo estériles. Si va a recolectar muchas muestras, cámbiese los guantes con frecuencia para evitar la contaminación cruzada accidental.
Muestras de suelo
Utilice un frasco estéril de 120 ml. (No se requieren frascos conservados para esta prueba, pero si dispone de uno, no hay problema). No utilice herramientas para remover la tierra, ya que podrían estar contaminadas con bacterias fecales. En su lugar, utilice el borde del frasco abierto para aflojar la tierra. Deslice el frasco sobre la tierra que se va a muestrear para recogerla. Repita el proceso si es necesario para obtener al menos la mitad de la muestra. Utilice un frasco diferente para cada muestra.
Aguas pluviales, aguas subterráneas o aguas superficiales:
Utilice un frasco estéril de 1000 ml como mínimo. Un tamaño de muestra mayor es mejor en caso de que Bacteroides La concentración en estas muestras es muy baja. EMSL también suministra contenedores estériles de 10 L por un costo adicional. Utilice un frasco diferente para cada muestra y para cada prueba bacteriana.
Agua de pozo
Utilice un recipiente estéril de 1000 ml o 10 L.
RECUERDA que Bacteroides Las pruebas no deben realizarse para obtener un permiso NPDES. La EPA aún está evaluando la prueba para este fin. En su lugar, utilice las pruebas de cultivo de bacterias fecales indicadas en el permiso.
Muestreo de superficie (por frotamiento)
- Obtenga un hisopo estéril de 1 ml de solución de Butterfield (ID de producto EMSL 8708935) o un hisopo de transporte estéril prehumedecido (ID de producto EMSL 878301 o 878301B) para recolectar y transportar muestras (proporcionado por EMSL a su solicitud).
- Con guantes de nitrilo estériles, prepare rejillas de muestreo de 10 x 10 cm (4" x 4") para cada muestra. No reutilice las rejillas, ya que contaminará las muestras. Como alternativa, puede adquirir cinta aislante, de enmascarar o de pintura preempaquetada para delimitar las áreas de 10 x 10 cm (4" x 4") que se van a muestrear y luego tomar muestras dentro de cada área. No reutilice la cinta, ya que contaminará las muestras.
- Cámbiate los guantes de nitrilo. Con los guantes de nitrilo estériles puestos, retira el hisopo del envase estéril.
- Retire con cuidado el hisopo del recipiente, asegurándose de no tocar accidentalmente nada que no sea la zona que se va a muestrear.
- Sostenga el hisopo en un ángulo aproximado de 30° con respecto a la superficie de muestreo, teniendo cuidado de no contaminar ninguna parte del hisopo.
- Con una presión firme y uniforme, deslice el hisopo lenta y minuciosamente sobre un área de muestreo completa de 10 x 10 cm (4" x 4"), siguiendo la imagen a continuación como guía. Gire el hisopo 180 grados entre las pasadas longitudinales y transversales.
- Para minimizar la variabilidad entre muestras, acostúmbrese a realizar solo 6 pasadas latitudinales y 6 longitudinales. Utilice la imagen a continuación como guía. Si no está familiarizado con esta técnica de muestreo, es recomendable practicarla antes de ir al sitio.
- Una vez finalizada la toma de muestras, vuelva a colocar con cuidado el hisopo en su recipiente de transporte y ciérrelo herméticamente.
- Etiquete las muestras con un rotulador de tinta permanente.
- SIEMPRE tome muestras de fondo en áreas no contaminadas con materia fecal para determinar si existe contaminación de fondo debida a un evento no identificado que pueda sesgar sus resultados.
Muestreo a granel
Muestra de 5 x 5 cm (2" x 2") de alfombra, panel de yeso, piso o ropa. Adquiera alcohol isopropílico o desinfectante para frotar. Use únicamente tijeras o cuchillos desinfectados. No los reutilice sin desinfectarlos entre muestras, ya que podría contaminarlas.
- Colóquese un par de guantes de nitrilo estériles. Vierta el alcohol sobre la cuchilla y deje que se seque al aire antes de tomar cada muestra.
- Utilice una bolsa ziplock limpia y sin usar para cada muestra. Etiquete cada bolsa con un marcador permanente. Utilice un identificador de muestra diferente para cada muestra.
Envío de muestras
- Asegúrese de etiquetar cada muestra con un identificador único utilizando un marcador permanente.
- No existen requisitos especiales de envío, ya que Bacteroides no se multiplica fuera del intestino.
- No hay tiempo de espera, pero envíe las muestras al laboratorio lo antes posible (lo ideal es envío urgente). Para el envío, utilice un contenedor isotérmico. No se requieren acumuladores de frío.
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