Bactéroïdes
Des méthodes de culture sont disponibles pour détecter la contamination des bâtiments par les eaux usées (M117 et M013), ainsi que de nouvelles méthodes. Bactéroïdes Méthodes basées sur la PCR. Bactéroïdes Ce test présente de nombreux avantages par rapport aux tests de culture traditionnels pour les coliformes totaux, les coliformes fécaux, les streptocoques fécaux, les entérocoques et E. coli tests, notamment :
- Bactéroïdes est spécifique à la contamination fécale de toutes origines – animales, aviaires et humaines.
- Coliformes, E. coli, Les streptocoques et entérocoques fécaux peuvent se développer dans l'eau, le sol, les sédiments et sur la végétation dans des environnements non contaminés. (Remarque : E. coli peut être trouvé dans des environnements tropicaux vierges).
- Parce qu'ils sont anaérobies, Bactéroïdes ne se multiplieront pas dans l'environnement.
- Bactéroïdes les coliformes sont 1,000 fois plus nombreux et sont plus nombreux que les bactéries. E. coli par 10 000:1 ; par conséquent, la probabilité de trouver Bactéroïdes est considérablement augmentée.
- Les tests de culture traditionnels reposent sur la présence de bactéries vivantes. Malheureusement, ces bactéries ne sont souvent pas viables en milieu intérieur. CELA SIGNIFIE QU'UN RÉSULTAT NÉGATIF POUR LES COLIFORMES OU E. coli SUR UN ÉCHANTILLON INTÉRIEUR NE PROUVE PAS L'ABSENCE DE CONTAMINATION FÉCALE. Bactéroïdes Ce test permet de surmonter cette limitation. Grâce à la PCR, le laboratoire peut détecter les bactéries vivantes, non viables ou viables mais non cultivables.
- Utilisation du total Bactéroïdes (M095), il est désormais possible de déterminer la quantité de contamination fécale provenant de sources non humaines et humaines.
- Utilisation de l'humain Bactéroïdes (M199) détermine la quantité de contamination fécale provenant uniquement de sources humaines.
Procédure d'échantillonnage
Pour l'échantillonnage Bactéroïdes Il est important de porter des gants stériles en nitrile. Changez fréquemment de gants entre chaque prélèvement si vous en effectuez plusieurs afin d'éviter toute contamination croisée accidentelle.
Échantillons de sol
Utilisez un flacon stérile de 120 ml. (L'utilisation de flacons de conservation n'est pas obligatoire pour ce test, mais si vous en possédez un, cela convient). N'utilisez pas d'outils pour creuser le sol, car ils pourraient avoir été contaminés accidentellement par des bactéries fécales. Utilisez plutôt le goulot du flacon ouvert pour ameublir la terre. Faites glisser le flacon sur le sol à prélever pour recueillir la terre. Répétez l'opération si nécessaire afin d'obtenir au moins la moitié d'un flacon d'échantillon. Utilisez un flacon différent pour chaque échantillon.
Eaux pluviales, eaux souterraines ou eaux de surface :
Utilisez un flacon stérile de 1000 mL minimum. Un échantillon plus important est préférable en cas de contamination. Bactéroïdes La concentration dans ces échantillons est très faible. EMSL fournit également des conteneurs stériles de 10 L (en supplément). Utilisez un flacon différent pour chaque échantillon et chaque test bactériologique.
Eau de puits
Utilisez un récipient stérile de 1000 mL ou de 10 L.
N'OUBLIEZ PAS que Bactéroïdes Les tests ne doivent pas être effectués dans le cadre d'un permis NPDES. L'EPA évalue actuellement ces tests à cette fin. Utilisez plutôt les tests de culture bactérienne fécale spécifiés dans le permis.
Échantillonnage de surface (par essuyage)
- Obtenez un écouvillon stérile de 1 mL de solution de Butterfield (référence produit EMSL 8708935) ou un écouvillon de transport stérile pré-humidifié (référence produit EMSL 878301 ou 878301B) pour prélever et transporter les échantillons (fournis sur demande par EMSL).
- Enfilez des gants en nitrile stériles et préparez des grilles de prélèvement de 10 x 10 cm distinctes pour chaque échantillon. Ne réutilisez pas les grilles afin d'éviter toute contamination croisée. Vous pouvez également utiliser du ruban adhésif électrique, de masquage ou de peinture préemballé pour délimiter les zones de prélèvement de 10 x 10 cm, puis effectuer le prélèvement à l'intérieur de ces zones. Ne réutilisez pas le ruban adhésif afin d'éviter toute contamination croisée.
- Changez de gants en nitrile. Avec des gants en nitrile stériles, retirez l'écouvillon de son emballage stérile.
- Retirez délicatement l'écouvillon de son récipient en veillant à ne pas le mettre accidentellement en contact avec autre chose que la zone à prélever.
- Tenez l’écouvillon à un angle d’environ 30° par rapport à la surface de prélèvement, en veillant à ne contaminer aucune partie de l’écouvillon.
- En exerçant une pression ferme et uniforme, passez lentement et soigneusement l'écouvillon sur toute la surface de prélèvement de 10 x 10 cm (4 x 4 pouces) en vous aidant de l'image ci-dessous. Faites pivoter l'écouvillon de 180 degrés entre les passages transversaux et longitudinaux.
- Pour minimiser la variabilité entre les prélèvements, prenez l'habitude d'effectuer seulement 6 passages en latitude et 6 en longitude. Reportez-vous à l'image ci-dessous. Si vous n'êtes pas familiarisé avec cette méthode de prélèvement, il est conseillé de vous entraîner avant de vous rendre sur le terrain.
- Une fois le prélèvement terminé, replacez soigneusement l'écouvillon dans son récipient de transport et scellez-le.
- Étiquetez les échantillons à l'aide d'un marqueur permanent.
- Il est IMPÉRATIF de TOUJOURS prélever des échantillons de fond dans des zones non contaminées par des matières fécales afin de déterminer s'il existe une contamination de fond provenant d'un événement non identifié qui pourrait fausser vos résultats.
Échantillonnage en masse
Prélevez des échantillons de 5 x 5 cm (2 po x 2 po) de moquette, de panneaux muraux, de revêtements de sol ou de vêtements. Utilisez de l'alcool à friction ou de l'alcool isopropanol stérile. Utilisez uniquement des ciseaux ou des couteaux désinfectés. Ne les réutilisez pas sans les désinfecter entre chaque échantillon afin d'éviter toute contamination croisée.
- Enfilez des gants stériles en nitrile. Versez de l'alcool sur la lame de coupe et laissez sécher à l'air libre avant chaque prélèvement.
- Utilisez un sac à fermeture zip propre et neuf pour chaque échantillon prélevé. Étiquetez chaque sac avec un marqueur permanent. Utilisez un identifiant différent pour chaque échantillon prélevé.
Expédition d'échantillons
- Veillez à étiqueter chaque échantillon avec un identifiant unique à l'aide d'un marqueur permanent.
- Aucune exigence particulière n'est requise pour l'expédition, car les Bacteroides ne se multiplient pas en dehors de l'intestin.
- Il n'y a pas de délai de conservation, mais veuillez renvoyer les échantillons au laboratoire le plus rapidement possible (idéalement par transport express). Utilisez un contenant isotherme pour l'expédition. Les accumulateurs de froid ne sont pas nécessaires.
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