Bacteroides
Existem métodos de cultura disponíveis para testar a contaminação por esgoto em edifícios (M117 e M013), bem como em novos locais. Bacteroides Métodos baseados em PCR. O Bacteroides O teste apresenta muitas vantagens em relação aos testes de cultura tradicionais para coliformes totais, coliformes fecais, estreptococos fecais, enterococos e E. coli testes, incluindo:
- Bacteroides É específico para contaminação fecal de todas as fontes – animais, aves e humanos.
- Coliformes, E. coli, Estreptococos e enterococos fecais podem se desenvolver na água, no solo, em sedimentos e na vegetação em ambientes não contaminados. (Nota: E. coli podem ser encontrados em ambientes tropicais intocados).
- Porque são anaeróbicos, Bacteroides Não se multiplicará no ambiente.
- Bacteroides superam os coliformes em 1,000:1 e superam em número E. coli por 10.000:1; portanto, a chance de encontrar Bacteroides aumentou consideravelmente.
- Os testes tradicionais baseados em cultura dependem da presença de bactérias vivas. Infelizmente, essas bactérias muitas vezes não são viáveis em ambientes internos. ISSO SIGNIFICA QUE UM RESULTADO NEGATIVO PARA COLIFORMES ou E. coli EM UMA AMOSTRA DE AMBIENTE INTERNO PODE NÃO COMPROVAR A AUSÊNCIA DE CONTAMINAÇÃO FECAL. Bacteroides O teste supera essa limitação. Como utiliza a PCR, o laboratório pode detectar bactérias vivas, não viáveis ou viáveis, mas não cultiváveis.
- Usando o total Bacteroides (M095), agora é possível determinar a quantidade de contaminação fecal de fontes não humanas e humanas.
- Usando Humanos Bacteroides (M199) determina a quantidade de contaminação fecal proveniente apenas de fontes humanas.
Procedimento de amostragem
Para amostragem Bacteroides É importante usar luvas de nitrilo estéreis. Troque as luvas frequentemente entre as amostras, caso esteja coletando muitas, para evitar contaminação cruzada acidental.
Amostras de solo
Utilize um frasco estéril de 120 mL. (Frascos esterilizados não são obrigatórios para este teste, mas, caso possuam, não há problema). Não utilize ferramentas para cavar o solo, pois podem ter sido contaminadas acidentalmente com bactérias fecais. Em vez disso, utilize a borda do frasco aberto para soltar o solo. Arraste o frasco sobre o solo a ser amostrado para coletar a amostra. Repita o processo, se necessário, para obter pelo menos metade do conteúdo do frasco. Utilize um frasco diferente para cada amostra.
Águas pluviais, subterrâneas ou superficiais:
Utilize um frasco estéril de 1000 mL como mínimo. Uma amostra maior é preferível caso haja algum problema. Bacteroides A concentração nessas amostras é muito diluída. A EMSL também fornece recipientes estéreis de 10 L mediante pagamento. Utilize um frasco separado para cada amostra e para cada teste bacteriano diferente.
Água de poço
Utilize um recipiente estéril de 1000 mL ou 10 L.
Lembre-se disso. Bacteroides Não se deve realizar testes para obter uma licença NPDES. A EPA ainda está avaliando o teste para essa finalidade. Em vez disso, utilize os testes de cultura bacteriana fecal especificados na licença.
Amostragem de superfície (limpeza)
- Obtenha um cotonete estéril de 1 mL com solução de Butterfield (ID do produto EMSL 8708935) ou um cotonete de transporte estéril pré-umedecido (ID do produto EMSL 878301 ou 878301B) para coletar e transportar amostras (fornecidos pela EMSL mediante sua solicitação).
- Usando luvas de nitrilo estéreis, prepare grades de amostragem separadas de 10 x 10 cm para cada amostra a ser coletada. Não reutilize as grades de amostragem, pois isso causará contaminação cruzada das amostras. Como alternativa, adquira fita isolante, fita crepe ou fita de pintura pré-embalada para delimitar as áreas de 10 x 10 cm a serem amostradas e, em seguida, passe o cotonete dentro dessa área. Não reutilize a fita, pois isso causará contaminação cruzada das amostras.
- Troque as luvas de nitrilo. Com as luvas de nitrilo estéreis calçadas, retire o cotonete da embalagem estéril.
- Retire cuidadosamente o cotonete do recipiente, certificando-se de não tocar acidentalmente com o cotonete em nada além do local a ser amostrado.
- Segure o cotonete em um ângulo aproximado de 30° em relação à superfície de amostragem, tomando cuidado para não contaminar nenhuma parte do cotonete.
- Aplicando pressão firme e uniforme, mova o cotonete lenta e cuidadosamente sobre toda a área de amostragem de 10 x 10 cm (4” x 4”), utilizando a imagem abaixo como guia. Gire o cotonete 180 graus entre as passagens longitudinais e transversais.
- Para minimizar a variabilidade entre as amostras, habitue-se a realizar apenas 6 passagens latitudinais e 6 longitudinais. Utilize a imagem abaixo como guia. Caso não esteja familiarizado com a coleta de amostras desta forma, é recomendável praticar a técnica antes de ir ao local.
- Após a coleta da amostra, coloque o cotonete de volta no recipiente de transporte com cuidado e feche-o.
- Identifique as amostras usando um marcador permanente.
- SEMPRE colete amostras de fundo em áreas não contaminadas com fezes para determinar se há contaminação de fundo proveniente de um evento não identificado que possa enviesar seus resultados.
Amostragem em massa
Amostras de carpete, placa de parede, piso ou tecido com 5 cm x 5 cm (2” x 2”). Utilize álcool isopropílico ou álcool de fricção estéril. Use apenas tesouras ou facas de corte desinfetadas. Não reutilize esses materiais sem desinfetá-los entre as amostras, pois isso pode causar contaminação cruzada.
- Coloque um par de luvas de nitrilo estéreis. Despeje o álcool sobre a lâmina de corte e deixe secar ao ar antes de cada coleta de amostra.
- Utilize um saco plástico tipo ziplock limpo e novo para cada amostra coletada. Identifique cada saco com uma caneta permanente. Utilize um identificador de amostra diferente para cada amostra coletada.
Envio de amostras
- Certifique-se de etiquetar cada amostra com um identificador único usando um marcador permanente.
- Não há requisitos especiais de envio, uma vez que a Bacteroides não se multiplica fora do intestino.
- Não há tempo de espera, porém, envie as amostras de volta ao laboratório o mais rápido possível (o ideal é o envio expresso). Para o envio, utilize um recipiente térmico. Não é necessário o uso de gelo seco.
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