Guía para el muestreo de aire cultivable (hongos o bacterias)
Impactadores de partículas (muestreadores tipo Andersen)
Este método de muestreo de aire consiste en aspirar un volumen medido de aire sobre medios de cultivo en placas de Petri. Las placas se incuban en el laboratorio para que los microorganismos afectados crezcan. Los hongos o bacterias se cuentan e identifican. Este método suele utilizar un impactador tipo Andersen N-6 (por ejemplo, el muestreador microbiano EMSL VP-400, ID de producto 8709001). EMSL Analytical, Inc. ofrece diferentes placas de agar, según el tipo de hongos o bacterias que se deseen identificar.
Beneficios
- Los cultivos de hongos pueden determinar si el hongo es viable (está vivo) y permiten la identificación del género y la especie.
- Los cultivos bacterianos permiten la enumeración e identificación de las bacterias cultivables presentes en el aire.
Desventajas
- Los cultivos tardan entre 6 y 10 días en que los microorganismos crezcan y puedan ser identificados.
- Dado que la mayoría de las muestras ambientales contienen una gran cantidad de organismos, cada uno debe competir con los demás para crecer en el medio de cultivo. Como resultado, los hongos y las bacterias presentes en el aire pueden no estar tan bien representados en el cultivo.
- Algunos microbios no crecen bien, o no crecen en absoluto, en los medios de cultivo.
- Algunos microorganismos no pueden identificarse, ya que no producen características clave como las esporas o no están descritos en la literatura científica.
Recomendaciones generales sobre medios de cultivo: Hongos y bacterias
- Para el muestreo de hongos, en general, recomendamos el agar de extracto de malta (MEA).
- Si realiza muestreos en zonas secas, el uso de DG18 ayudará a seleccionar el crecimiento de hongos que prefieren la sequedad y que podrían no crecer en agar MEA.
- El muestreo para Stachybotrys sp. se puede realizar con agar de celulosa (CA) o agar de harina de maíz (CMA).
- Para el muestreo bacteriano, en general, recomendamos agar tripticasa de soja (TSA) o TSA con sangre 5%. • Para el muestreo de bacterias Gram negativas, recomendamos agar MacConkey (MAC).
- Para cualquier otra situación, el Departamento de Microbiología estará encantado de hacerle recomendaciones basadas en su situación particular de muestreo.
- Los materiales para el muestreo pueden solicitarse en www.emsl.com o llamando al Servicio de Atención al Cliente: 800-220-3675.
Cómo manipular medios de cultivo microbiológicos (placas de agar)
- Las placas de agar deben mantenerse refrigeradas o en bolsas de congelación hasta que estén listas para usarse.
- Las placas deben dejarse atemperar a temperatura ambiente antes de tomar una muestra (aproximadamente 15 minutos).
- No retire la tapa de la placa en ningún momento, excepto durante la toma de muestras.
- Tras recoger la muestra, selle la tapa de la placa con Parafilm o cinta adhesiva.
- Las placas deben enviarse de vuelta a EMSL con acumuladores de frío mediante envío urgente prioritario. Vuelva a congelar y reutilice el acumulador de frío original (este tipo de acumulador de frío se mantiene estable durante 24 horas).
- Se debe enviar material de embalaje adecuado para proteger las placas.
- Las placas no deben entrar en contacto directo con la bolsa de congelación, ya que el material de cultivo podría congelarse e invalidar las pruebas.
- Si se produce algún retraso en el envío de las placas de agar a EMSL, deberán mantenerse refrigeradas hasta que estén listas para su entrega urgente.
Recomendaciones
- Utilice guantes de látex o nitrilo durante la toma de muestras.
- Utilice alcohol isopropílico 70% para desinfectar el dispositivo de muestreo entre cada muestra.
- Coloque la tapa de la placa de Petri en una bolsa limpia durante el muestreo para reducir la contaminación cruzada.
- Incluya muestras externas y una muestra de control en blanco.
Procedimiento de muestreo
- Deje que las placas de agar alcancen la temperatura ambiente antes de usarlas.
- Conecte un extremo del tubo a la entrada de la bomba de vacío y el otro extremo a la entrada del muestreador.
- Calibrar el caudal de la bomba de vacío:
- Coloque una placa de Petri sin tapar en el muestreador (no envíe esta placa como muestra, deséchela después de la calibración).
- Encienda la bomba y ajuste el caudal hasta que el rotámetro marque 28,3 LPM (el caudal se lee en el centro del cojinete del rotámetro).
- Retire el tapón y el rotámetro antes de tomar la muestra.
- Limpie todas las superficies expuestas del muestreador con una toallita con alcohol isopropílico 70% y deje que se seque al aire.
- Coloque la placa de agar sobre la base del muestreador de manera que la placa de Petri descanse sobre los tres pasadores metálicos elevados.
- Retire la tapa de la placa de Petri y colóquela en una bolsa de muestra limpia para minimizar la contaminación (disponible bajo petición).
- Monte la etapa de clasificación por chorro en el muestreador y fije el cono de entrada con los tres clips adjuntos.
- Ajuste el temporizador al tiempo adecuado según las condiciones ambientales (el tiempo de muestreo suele ser de entre 2 y 5 minutos).
- Encienda la bomba y ponga en marcha el temporizador simultáneamente.
- Cuando se acabe el tiempo, apague la bomba, desmonte el muestreador y vuelva a colocar la tapa sobre la placa de agar.
- Fije la tapa a la placa de Petri con cinta adhesiva o Parafilm (evite usar cinta aislante, de embalaje, transparente o cinta americana).
- Escriba el número de muestra en la parte inferior de la placa de Petri.
- Registre toda la información pertinente en la Cadena de Custodia.
- Devuelva las muestras con una bolsa de hielo a EMSL Analytical para su análisis.
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