Diretrizes de Interpretação do ERMI

Análise ERMI – Código de teste EMSL: M180

Os resultados do seu exame ERMI não representam um diagnóstico ou conclusão médica ou clínica. A interpretação dos dados é de responsabilidade do cliente.

Laboratório Analítico

A EMSL Analytical, Inc. (EMSL) é uma rede nacional de laboratórios de análises que oferece serviços completos, incluindo análises de amianto, mofo, qualidade do ar interior, microbiologia, meio ambiente, química, forense, materiais, higiene industrial e mecânica desde 1981. Considerada o principal laboratório independente de análises ambientais do país, a EMSL prioriza a qualidade analítica. Essa qualidade é reconhecida por diversas agências de acreditação federais, estaduais e privadas de grande prestígio, como os programas EMLAP e EMPAT da AIHA, e assegurada por nossa equipe altamente qualificada, incluindo muitos microbiologistas e micologistas com doutorado.

O EMSL é um laboratório independente que realizou a análise dessas amostras. O EMSL não realizou a coleta de amostras nem a investigação do local para este relatório. As amostras aqui mencionadas foram analisadas sob rigorosos procedimentos de controle de qualidade, utilizando métodos moleculares de última geração.

Método Analítico

A reação em cadeia da polimerase quantitativa específica para mofo (MSQPCR) foi desenvolvida por uma equipe de pesquisadores da EPA. A MSQPCR utiliza métodos de diagnóstico molecular patenteados pela EPA para detectar e quantificar espécies de mofo. Os benefícios dessa tecnologia incluem:

  • Um método analítico baseado em DNA, rápido, preciso e sensível, para identificar e quantificar fungos filamentosos até o nível de espécie.
  • Procura a presença de sequências de DNA que sejam exclusivas de uma determinada espécie de bolor.
  • Utiliza um sistema de detecção de sequência de DNA para monitorar a presença e a concentração de um fungo específico em "TEMPO REAL". À medida que uma sequência exclusiva do fungo é detectada e amplificada, moléculas de sinal fluorescente são liberadas e medidas simultaneamente. A ausência de fluorescência significa que o fungo alvo não está presente.
  • O DNA é um ácido nucleico que carrega a informação genética exclusiva de cada organismo. As sequências de DNA determinam as características hereditárias individuais.
  • O DNA pode ser encontrado em todas as células de todos os organismos vivos (ou que já viveram). Por exemplo, os seres humanos têm DNA em suas células da pele e células sanguíneas, e os fungos têm DNA em seus esporos e hifas.

Desenvolvimento ERMI

Pesquisadores da EPA desenvolveram o Índice Relativo de Mofo Ambiental (ERMI, na sigla em inglês) para padronizar os métodos de amostragem e análise disponíveis para consultores de qualidade do ar interno, pesquisadores e proprietários de imóveis. O objetivo a longo prazo é ajudar a compreender melhor os riscos da exposição ao mofo para a saúde dos ocupantes. O ERMI mede especificamente a carga de mofo em uma residência. O ERMI consiste em valores de 36 tipos de mofo, divididos em dois grupos: 26 no grupo 1, que representam as espécies associadas a ambientes com danos causados pela água, e 10 espécies no grupo 2, que são consideradas micoflora comum em residências.

O Departamento de Habitação e Desenvolvimento Urbano dos EUA realizou o American Health Homes Survey em 2006. Como parte do estudo, amostras de poeira foram coletadas dos quartos e salas de estar de 1096 residências nos EUA. Cada amostra composta foi testada por MSQPCR para o ERMI. A partir deste estudo, os pesquisadores puderam desenvolver a seguinte escala de ERMI:

Compreendendo os resultados

A EMSL Analytical, Inc. é um laboratório independente que fornece resultados imparciais e cientificamente válidos. Estes dados representam apenas uma parte de uma investigação geral da Qualidade do Ar Interior (QAI). Informações visuais e condições ambientais medidas durante a avaliação do local (umidade, leituras de umidade, etc.) são cruciais para qualquer interpretação final dos resultados. Muitos fatores impactam os resultados finais; portanto, a interpretação dos dados do relatório deve ser feita com cautela.

Interpretação ERMI

A carga de mofo em uma residência pode ser definida por dois fatores: a quantidade de cada espécie de mofo e a diversidade de espécies presentes. O ERMI leva em consideração ambos os fatores e mede a carga de mofo a longo prazo. Um evento recente de infiltração de água com consequente crescimento de mofo pode não ser detectado pelo ERMI, pois os esporos precisam passar por um período de equilíbrio ao se incorporarem à poeira depositada na residência. Outras alterações na residência, como a instalação de carpetes novos, devem ser interpretadas em conjunto com os resultados do ERMI.

Além disso, o ERMI utiliza uma combinação de 36 tipos de mofo para determinar a carga de mofo em uma residência, e não se baseia apenas em uma ou duas espécies. Residências com ERMI Nível 3 têm maior probabilidade de apresentar problemas com mofo. Residências com ERMI Nível 4 têm a maior probabilidade de apresentar problemas com mofo. Residências com ERMI Nível 2 têm menor probabilidade de apresentar problemas com mofo, e residências com ERMI Nível 1 têm a menor probabilidade possível de apresentar problemas com mofo.

A figura acima, à direita, mostra a distribuição da soma dos logaritmos das espécies do Grupo 2, provenientes da Pesquisa Americana de Saúde Domiciliar (American Health Homes Survey), conduzida pelo Departamento de Habitação e Desenvolvimento Urbano dos EUA (HUD). Se o valor relatado para o Grupo 2 estiver próximo a qualquer uma das extremidades dessa escala, é necessário investigar a causa. Por exemplo, se o seu valor para o Grupo 2 for 1, isso significa que há menos fungos comuns do que o esperado em uma residência normal. Talvez seja uma construção nova ou um ambiente recentemente remediado. Se você tiver um valor muito alto para o Grupo 2 (>20), é possível que a residência esteja contaminada com espécies encontradas no Grupo 2 e que esse valor não seja representativo dos níveis normais de fundo.

É geralmente aceito no setor que o crescimento de fungos em ambientes internos é indesejável e inadequado, exigindo remoção ou outras medidas corretivas apropriadas. As diretrizes da cidade de Nova York e da EPA (Agência de Proteção Ambiental dos Estados Unidos) para remediação de mofo em escolas e edifícios comerciais definem as condições que justificam a remediação. Lembre-se sempre de que a água é fundamental. Prevenir danos causados pela água ou condensação impedirá o crescimento de mofo.

Este relatório não se destina a fornecer aconselhamento médico ou sobre a segurança relativa de um espaço ocupado. Em caso de dúvidas, consulte sempre um médico do trabalho ou da área da saúde ambiental com experiência em lidar com contaminantes do ar interior.

Cálculo do ERMI

A presença de cada espécie de bolor é determinada por MSQPCR e sua quantidade é expressa em equivalentes de células por mg de poeira. A soma do logaritmo de cada grupo é calculada e o grupo 2 é subtraído do grupo 1, resultando no valor final de ERMI em seu relatório.

Grupo 1Grupo 2
Aspergillus flavus
Aspergillus fumigatus
Aspergillus niger
Aspergillus ochraceus
Aspergillus penicillioides
Aspergillus restrictus
Aspergillus sclerotiorum
Aspergillus sydowii
Aspergillus unguis
Aspergillus versicolor
Eurotium (A.) amstelodami
Aurobasidium pllulans
Chaetomium globosum
Cladosporium sphaerospermum
Paecilomyces variotii
Penicillium brevicompactum
Penicillium corylophilum
Penicillium crustosum (grupo 2)
Penicillium purpurogenum
Penicillium spinulosum
Penicillium variabile
Scopulariopsis brevicaulis
Scopulariopsis chartarum
Stachybotrys chartarum
Trichoderma viride
Wallemia sebi
Acremonium strictum
Alternaria alternativa
Aspergillus ustus
Cladosporium cladosporioides I
Cladosporium cladosporioides II
Cladosporium herbarum
Epicoccum nigrum
Grupo Mucor e Rhizopus
Penicillium chrysogenum
Rhizopus stolonifera

Detecção de múltiplos organismos em ensaios de qPCR em tempo real

Certas espécies de fungos são geneticamente muito semelhantes para serem distinguidas por MSQPCR. Portanto, a detecção positiva ou negativa de qualquer um desses fungos também sugere a detecção positiva ou negativa de suas contrapartes geneticamente semelhantes.

Eurotium (Aspergillus) amstelodami/ chevalieri/ herbariorum/ rubrum/ repens
Aspergillus flavus/ oryzae
Aspergillus niger/ fetidus/ fênico
Aspergillus restrictus/ caesillus/ cônico
Grupo Mucor e Rhizopus/ Mucor/ amphibiorum/ circinelloides/ heimalis/ indicus/ mucedo/ racemous/ ramosissimus e Rhizopus azygosporus/ homothalicus/ microspores/ oligosporus/ oryzae
Penicillium chrysogenum/ griseofulvum/ glandicola/ coprophilum/ expansum e Eupenicillium crustaceum/ egyptiacum
Penicillium crustoso/ camembertii/ comuna/ echinulatum/ solitum
Penicillium spinulosum/ glabrum/ lividum/ thomii/ purpurescens
Scopulariopsis brevicaulis/ fusca
Trichoderma viride/ atroviride/ koningii

Controles positivos e negativos

Um controle positivo é realizado com cada amostra para evitar resultados falso-negativos e garantir o sucesso da amplificação por PCR. Um controle interno da amostra é realizado com cada amostra para testar o sucesso da extração de DNA e a presença de inibidores. Ele também é usado para fins quantitativos. Controles negativos são realizados para cada espécie testada em cada projeto do cliente, a fim de descartar a contaminação laboratorial como fonte de qualquer fungo detectado e evitar resultados falso-positivos. Esses controles são necessários para garantir a qualidade dos resultados.

Referências e links informativos

Artigos

Quantificação de conídios de Stachybotrys chartarum em poeira doméstica usando detecção em tempo real, baseada em sonda fluorescente, de produtos de PCR. 2001. Jennie D Roe, Richard A Haugland, Stephen J Vesper e Larry J Wymer. JEAEE Vol. 11.

Monitoramento rápido por reação em cadeia da polimerase quantitativa para Aspergillus patogênico durante a remoção de carpetes de um hospital. 2004. Alice N. Neely, PhD, Vince Gallardo, MS, Ed Barth, MS, Richard A. Haugland, PhD, Glenn D. Warden, MD e Stephen J. Vesper, PhD. Controle de Infecção e Epidemiologia Hospitalar, Vol. 23.

Análise quantitativa por reação em cadeia da polimerase de fungos em poeira de residências de bebês que desenvolveram hemorragia pulmonar idiopática. 2004. Vesper, Stephen J. PhD; Varma, Manju PhD; Wymer, Larry J. MS; Dearborn, Dorr G. MD, PhD; Sobolewski, John MS; Haugland, Richard A. PhD. Journal of Occupational & Environmental Medicine. 46(6):596-601.

A análise de PCR em tempo real de fungos é realizada na EMSL Analytical, Inc. em conformidade com o Contrato de Licença de Patente entre a EMSL Analytical, Inc. e o Laboratório Nacional de Exposição e Pesquisa (National Exposure and Research Laboratory-CI) da Agência de Proteção Ambiental dos Estados Unidos, bem como com o Contrato de Licença de Patente entre a EMSL Analytical, Inc. e a Applied Biosystems.

Para obter mais informações técnicas sobre o desenvolvimento do Índice de Mofo Relativo Ambiental, consulte a edição de abril de 2006 da revista “The Synergist”, páginas 39 a 43. www.epa.gov/iaq

Livros

Bioaerossóis: Avaliação e Controle. Janet Macher, Ed., Conferência Americana de Higienistas Industriais Governamentais, Cincinnati, OH 1999.

Diretrizes de exposição para a qualidade do ar interior em residências. Diretoria de Saúde Ambiental, Divisão de Proteção à Saúde, Ministério da Saúde do Canadá, Ottawa, Ontário, 1989.

Contaminação fúngica em edifícios públicos: efeitos na saúde e métodos de investigação. Health Canada, Ottawa, Ontário, 2004.

IICRC: S500 Norma e Guia de Referência para Restauração Profissional de Danos por Água. 3ª Edição, Instituto de Certificação de Inspeção, Limpeza e Restauração, Vancouver, WA, 2006

IICRC: Norma S520 e Guia de Referência para Remediação Profissional de Mofo. 1ª Edição, Instituto de Certificação de Inspeção, Limpeza e Restauração, Vancouver, WA 2004

Guia de Campo para a Determinação de Contaminantes Biológicos em Amostras Ambientais. 2ª Edição, Associação Americana de Higiene Industrial, 2005.

Links para o consumidor

Leia o texto completo da brochura para consumidores da AIHA intitulada "Os Fatos Sobre o Mofo".
http://www.aiha.org/content/accessinfo/consumer/factsaboutmold.htm
A Administração de Segurança e Saúde Ocupacional (OSHA)
http://www.osha.gov/SLTC/molds/index.html
Informações do CDC sobre mofo
http://www.cdc.gov/mold/faqs.html
CDC Stachybotrys – Perguntas e respostas sobre Stachybotrys chartarum e outros fungos.
http://www.cdc.gov/nceh/airpollution/mold/stachy.htm
IOM, NAS: Limpando o ar: Asma e exposição à poluição do ar em ambientes fechados
http://fermat.nap.edu/books/0309064961/html/index.html
Site da Biblioteca Nacional de Medicina sobre Mofo
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/molds.html
Departamento de Serviços de Saúde da Califórnia (CADOHS)
http://www.cal-iaq.org/mold0107.html
Departamento de Saúde de Minnesota
http://www.health.state.mn.us/divs/eh/indoorair/mold/indes.html
Departamento de Saúde e Higiene Mental da Cidade de Nova Iorque
http://www.nyc.gov/html/doh/html/epi/moldrpt1.shtml
RH: Lei de Segurança e Proteção contra Mofo Tóxico dos Estados Unidos
http://www.house.gov/conyers/mold/htm

EPA

“Você deveria mandar limpar os dutos de ar da sua casa?”
http://www.epa.gov/iaq/pubs/airduct.html
“Ficha informativa: Limpeza após inundações – Evitando problemas de qualidade do ar interior”
http://www.epa.gov/iaq/pubs/flood.html
Informações gerais sobre mofo e medidas que podem ser tomadas para limpar ou prevenir um problema de mofo.
http://www.epa.gov/iaq/asthma/triggers/molds.html
“Um Guia Rápido sobre Mofo, Umidade e Sua Casa” Inclui informações básicas sobre mofo, orientações de limpeza e prevenção de umidade e mofo.
http://www.epa.gov/iaq/molds/moldguide.html
“Remediação de Mofo em Escolas e Prédios Comerciais” – Informações sobre remediação em escolas e propriedades comerciais, referências de potenciais empresas de remediação de mofo e umidade.
http://www.epa.gov/iaq/molds/mold-remediation.html

FEMA

“Casas que foram inundadas podem apresentar problemas de mofo” – Informações e dicas para a limpeza de mofo.
http://www.fema.gov/diz01/d1364n18.shtm
“O mofo pode danificar sua casa e prejudicar sua saúde” – Como identificar a presença de mofo, os potenciais efeitos do mofo na saúde e como tratar o mofo em casa.
http://www.fema.gov/diz01/d1379n41.shtm
“"A limpeza imediata após uma inundação pode ajudar a prevenir problemas de saúde: – Como limpar problemas de mofo em casa (exposições não extensas ou graves).".
http://www.fema.gov/diz99/d1279n09.shtm

Termos, Condições e Limitações Importantes

Retenção de amostra
As amostras analisadas pela EMSL serão armazenadas por 60 dias após a data da análise. O armazenamento além desse período está disponível mediante pagamento de uma taxa e solicitação por escrito antes do período inicial de 30 dias. Amostras contendo substâncias perigosas/tóxicas que exigem manuseio especial serão devolvidas ao cliente imediatamente. A EMSL reserva-se o direito de cobrar uma taxa de descarte de amostra ou devolvê-las ao cliente.

Alterações e cancelamentos de pedidos
Todas as alterações no escopo do trabalho ou no prazo de entrega solicitadas pelo cliente após a aprovação da amostra devem ser feitas por escrito e confirmadas por escrito pela EMSL. Caso as alterações solicitadas resultem em alteração de custo, o cliente deverá arcar com o pagamento. Em caso de cancelamento do trabalho por parte do cliente, a EMSL concluirá o trabalho em andamento e emitirá a fatura referente ao trabalho concluído até o momento do aviso de cancelamento. A EMSL não se responsabiliza por atrasos decorrentes de tais alterações.

Garantia
A EMSL garante aos seus clientes que todos os serviços prestados nos termos deste contrato serão executados de acordo com procedimentos analíticos de teste estabelecidos e reconhecidos, e com o devido cuidado, em conformidade com as leis federais, estaduais e locais aplicáveis. A garantia expressa acima é exclusiva e substitui todas as demais garantias, expressas ou implícitas. A EMSL se exime de quaisquer outras garantias, expressas ou implícitas, incluindo garantia de adequação a uma finalidade específica e garantia de comercialização.

Limites de responsabilidade
Em hipótese alguma a EMSL será responsável por danos indiretos, especiais, consequenciais ou incidentais, incluindo, entre outros, danos por lucros cessantes ou perda de reputação, independentemente de negligência (seja exclusiva ou concorrente) da EMSL e de a EMSL ter sido informada da possibilidade de tais danos, decorrentes ou relacionados aos serviços da EMSL ou à entrega, uso, confiança ou interpretação dos resultados dos testes pelo cliente ou por terceiros. Não assumimos qualquer responsabilidade legal pelos fins para os quais o cliente utiliza os resultados dos testes. A EMSL não será responsabilizada pela seleção inadequada de dispositivos de amostragem, mesmo que forneçamos o dispositivo ao usuário. O usuário do dispositivo de amostragem é o único responsável por selecionar o amostrador e as condições de amostragem adequadas para garantir que uma amostra válida seja coletada para análise. Qualquer reamostragem realizada ficará a critério exclusivo da EMSL, cujo custo será limitado ao valor razoável das amostras originais do grupo de entrega de amostras (GDE). Em hipótese alguma a responsabilidade da EMSL perante um cliente ou qualquer terceiro, seja com base em teorias de responsabilidade civil extracontratual, contratual ou qualquer outra teoria jurídica ou equitativa, excederá o valor pago pelo cliente à EMSL nos termos do referido contrato.

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*Taxas de laboratório serão cobradas no retorno para realização dos testes.