GUÍA DE MUESTREO MICROBIOLÓGICO
TABLA DE CONTENIDO
- Air-O-Cell
- MoldSnap y MICRO-5
- Muestreo de aire cultivable (hongos o bacterias)
- Muestreo de superficies cultivables (hisopos y muestras a granel)
- Muestreo de propietarios de viviendas de ERMI
- Muestreo de PCR en tiempo real
- Muestreo de alérgenos
- Muestreo de coliformes totales
- Contaminación por aguas residuales en edificios
- Muestreo de Legionella
- Muestreo de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM)
- Muestreo de endotoxinas ambientales
- Condiciones limitantes para el crecimiento de patógenos
- Información sobre medios de cultivo microbiológicos
CELDA DE AIRETM
El casete de muestreo de aire Air-O-Cell™ es un dispositivo diseñado para la recolección y el análisis rápidos de una amplia gama de partículas en suspensión. Estas incluyen esporas de hongos, polen, fragmentos de insectos, células de la piel, fibras y partículas inorgánicas. El aire ingresa al casete, las partículas se adhieren al sustrato adhesivo y el aire sale por el orificio de salida. El flujo de aire y la carcasa patentada del casete están diseñados de tal manera que las partículas se distribuyen y depositan uniformemente como un rastro sobre una lámina de vidrio especial con adhesivo, contenida en la carcasa del casete.
Beneficios
- Útil para las pruebas iniciales del terreno, especialmente si no se observa crecimiento de hongos.
- Procedimiento rápido y sencillo.
- Disponibilidad de plazos de entrega rápidos.
- Baja probabilidad de contaminación de la muestra.
Desventajas
- Con este método no es posible identificar completamente las especies de hongos. Por ejemplo, Aspergillus sp. y Penicillium sp. suelen reportarse juntas debido a las similitudes en la morfología de sus esporas.
- No se puede evaluar la viabilidad de las esporas.
Materiales
- Cassette Air-O-CellTM.
- Bomba de vacío apta para funcionar a 15 litros por minuto (lpm).
- Rotámetro (para la calibración de la bomba de vacío).
- Tubos flexibles.
Procedimiento de muestreo recomendado
El cartucho está diseñado para funcionar a un caudal recomendado de 15 l/min. Caudales inferiores pueden provocar la pérdida de algunas esporas y la acumulación irregular de otras. Caudales superiores pueden dañar las esporas. Por lo tanto, es importante no hacer funcionar las bombas de muestreo a caudales inferiores durante periodos prolongados para alcanzar el volumen de aire recomendado.
Calibración del caudal de muestreo
Se puede utilizar un tubo de burbujeo especialmente diseñado, disponible a través del fabricante, para ajustar el caudal de la minibomba Air-O-Cell de ½”. No es compatible con ningún otro tipo de bomba, minibomba ni bomba de muestreo.
Duración del muestreo
El tiempo de muestreo depende de la densidad de partículas en el ambiente. Es importante no sobrecargar la muestra, ya que de lo contrario será imposible cuantificar los tipos de esporas, polen y partículas presentes. La siguiente tabla muestra los tiempos de muestreo típicos para obtener un perfil bien definido con buena dispersión de las esporas:
Intervalos de muestreo recomendados para el casete de muestreo de aire Air-O-Cell™ a caudales de recolección típicos.
| Condiciones ambientales típicas Caudales Recolección a 15 l/min | |
| Oficina limpia o exteriores limpios (sin polvo visible). | 10 minutos |
| Ambiente interior, alta actividad y personal | 5 minutos |
| Ambiente interior, renovación de paneles de yeso o polvo industrial pesado | 1 minuto |
MUESTREO DE AIRE PARA EL RECUENTO TOTAL DE ESPORAS
Procedimiento de muestreo
- Antes de tomar la muestra, calibre la bomba a 15 litros por minuto.
- Retire y conserve las cintas de sellado que cubren la entrada y la salida del Air-O-CellTM.
- Conecte la salida (orificio redondo) al adaptador de tubería suministrado (disponible bajo pedido) o utilice tubería de PVC estándar de ½” (solo para uso con bombas de alto caudal).
- Ponga en marcha la bomba de muestreo y tome muestras durante un período de tiempo adecuado (véase la tabla anterior).
- Retire el Air-O-Cell™ del tubo y vuelva a sellarlo con la cinta adhesiva original. Etiquete la muestra.
- Complete una Cadena de Custodia (COC) de EMSL, disponible en el sitio web (www.emsl.com), detallando el nombre y la información del cliente, el nombre o número del proyecto, la muestra #, la descripción del área y el volumen de aire utilizado.
- Para reducir los daños durante el envío, se recomienda colocar el Air-O-Cell™ en una caja de cartón corrugado para garantizar que llegue en perfectas condiciones al laboratorio.
Sugerencias de control de calidad
- Una interpretación eficaz se basa en la comparación de muestras de interior y exterior. La comparación de muestras de exterior ayudará a determinar si se está produciendo amplificación de esporas en interiores.
- Obtenga una muestra de control de una zona sin quejas para realizar una comparación.
- Es recomendable enviar periódicamente un casete en blanco para su análisis.
- El caudal es fundamental para obtener resultados precisos. Recuerde calibrar y recalibrar la bomba antes de cada toma de muestras (15 litros/minuto).
- Nunca utilice casetes dañados o caducados.
Para más información, contacte con:
Zefon Internacional en www.zefon.com. Air-O-CellTM es una marca registrada de Zefon International
MOLDSNAP Y MICRO-5
Los sistemas Zefon MoldSnap (ID de producto 8715304) y Micro5 MicroCell (ID de producto 8715306) están diseñados para funcionar a un caudal de 5 litros por minuto, lo que garantiza una eficiencia de recolección óptima. Los casetes deben almacenarse a una temperatura de entre 10 °C y 27 °C.
¡No lo utilice a temperaturas inferiores a 37° F!
Procedimientos de muestreo
- Retire el pasador de la parte inferior del MoldSnap o Micro5.
- Si utiliza una bomba convencional de alto volumen: simplemente conecte un extremo del tubo (de 1,5 metros o menos) a la parte inferior del casete.
- Si utiliza una bomba de bajo volumen como la GilAir5: simplemente conecte un trozo de tubo de 1 pulgada a la parte inferior del cartucho.
- Conecte el otro extremo del tubo a una bomba previamente calibrada a un caudal de 5 LPM.
- Retire la tapa de la parte superior del casete.
- Encienda la bomba y tome una muestra durante el tiempo adecuado según las condiciones ambientales. (Consulte la sección "Duración del muestreo" a continuación).
- Una vez finalizado el muestreo, vuelva a colocar el pasador y la tapa en la parte inferior y superior del casete.
Duración del muestreo
- Ambientes limpios en interiores y exteriores = 8-10 minutos
- En interiores (actividad normal) = 5 minutos
- Interior (partículas pesadas) = 1-3 minutos
- Cavidad de pared interior utilizando solo el Micro5 (con adaptador de pared interior opcional, ID de producto 8715901) = 1-2 minutos
Consejo técnico: Limpieza básica de moho
La clave para controlar el moho es controlar la humedad. Es importante secar las áreas y los objetos dañados por el agua en un plazo de 24 a 48 horas para prevenir el crecimiento de moho. Si el moho es un problema en su hogar, límpielo y elimine el exceso de agua o humedad. Repare las fugas de plomería u otras fuentes de agua. Lave el moho de las superficies duras con detergente y agua, y séquelas completamente. Los materiales absorbentes (como las baldosas del techo y las alfombras) que se enmohecen podrían tener que reemplazarse. (Fuente: EPA) http://www.epa.gov/mold/moldresources.html)
MUESTREO DE AIRE CULTIVABLE (HONGOS O BACTERIAS)
Impactadores de partículas (muestreadores tipo Andersen)
Este método de muestreo de aire consiste en aspirar un volumen medido de aire sobre medios de cultivo en placas de Petri. Las placas se incuban en el laboratorio para que los microorganismos afectados crezcan. Los hongos o bacterias se cuentan e identifican. Este método suele utilizar un impactador tipo Andersen N-6 (por ejemplo, el muestreador microbiano EMSL VP-400, ID de producto 8709001). EMSL Analytical, Inc. ofrece diferentes placas de agar, según el tipo de hongos o bacterias que se deseen identificar.
Beneficios
- Los cultivos de hongos pueden determinar si el hongo es viable (está vivo) y permiten la identificación del género y la especie.
- Los cultivos bacterianos permiten la enumeración e identificación de las bacterias cultivables presentes en el aire.
Desventajas
- Los cultivos tardan entre 6 y 10 días en que los microorganismos crezcan y puedan ser identificados.
- Dado que la mayoría de las muestras ambientales contienen una gran cantidad de organismos, cada uno debe competir con los demás para crecer en el medio de cultivo. Como resultado, los hongos y las bacterias presentes en el aire pueden no estar tan bien representados en el cultivo.
- Algunos microbios no crecen bien, o no crecen en absoluto, en los medios de cultivo.
- Algunos microorganismos no pueden identificarse, ya que no producen características clave como las esporas o no están descritos en la literatura científica.
Recomendaciones generales sobre medios de cultivo: Hongos y bacterias
- Para el muestreo de hongos, en general, recomendamos el agar de extracto de malta (MEA).
- Si realiza muestreos en zonas secas, el uso de DG18 ayudará a seleccionar el crecimiento de hongos que prefieren la sequedad y que podrían no crecer en agar MEA.
- El muestreo para Stachybotrys sp. se puede realizar con agar de celulosa (CA) o agar de harina de maíz (CMA).
- Para la toma de muestras bacterianas, en general, recomendamos el agar tripticasa de soja (TSA) o el TSA con sangre 5%.
- Para el muestreo de bacterias Gram negativas, recomendamos el agar MacConkey (MAC).
- Para cualquier otra situación, el Departamento de Microbiología estará encantado de hacerle recomendaciones basadas en su situación particular de muestreo.
- Los suministros para el muestreo se pueden solicitar en www.emsl.com o llamando al Servicio de Atención al Cliente: 800-220-3675.
Cómo manipular medios de cultivo microbiológicos (placas de agar)
- Las placas de agar deben mantenerse refrigeradas o en bolsas de congelación hasta que estén listas para usarse.
- Las placas deben dejarse atemperar a temperatura ambiente antes de tomar una muestra (aproximadamente 15 minutos).
- No retire la tapa de la placa en ningún momento, excepto durante la toma de muestras.
- Tras recoger la muestra, selle la tapa de la placa con Parafilm o cinta adhesiva.
- Las placas deben enviarse de vuelta a EMSL con acumuladores de frío mediante envío urgente prioritario. Vuelva a congelar y reutilice el acumulador de frío original (este tipo de acumulador de frío se mantiene estable durante 24 horas).
- Se debe enviar material de embalaje adecuado para proteger las placas.
- Las placas no deben entrar en contacto directo con la bolsa de congelación, ya que el material de cultivo podría congelarse e invalidar las pruebas.
- Si se produce algún retraso en el envío de las placas de agar a EMSL, deberán mantenerse refrigeradas hasta que estén listas para su entrega urgente.
Recomendaciones
- Utilice guantes de látex o nitrilo durante la toma de muestras.
- Utilice alcohol isopropílico 70% para desinfectar el dispositivo de muestreo entre cada muestra.
- Coloque la tapa de la placa de Petri en una bolsa limpia durante el muestreo para reducir la contaminación cruzada.
- Incluya muestras externas y una muestra de control en blanco.
Procedimiento de muestreo
- Deje que las placas de agar alcancen la temperatura ambiente antes de usarlas.
- Conecte un extremo del tubo a la entrada de la bomba de vacío y el otro extremo a la entrada del muestreador.
- Calibrar el caudal de la bomba de vacío:
- Coloque una placa de Petri sin tapar en el muestreador (no envíe esta placa como muestra, deséchela después de la calibración).
- Encienda la bomba y ajuste el caudal hasta que el rotámetro marque 28,3 LPM (el caudal se lee en el centro del cojinete del rotámetro).
- Retire el tapón y el rotámetro antes de tomar la muestra.
- Limpie todas las superficies expuestas del muestreador con una toallita con alcohol isopropílico 70% y deje que se seque al aire.
- Coloque la placa de agar sobre la base del muestreador de manera que la placa de Petri descanse sobre los tres pasadores metálicos elevados.
- Retire la tapa de la placa de Petri y colóquela en una bolsa de muestra limpia para minimizar la contaminación (disponible bajo petición).
- Monte la etapa de clasificación por chorro en el muestreador y fije el cono de entrada con los tres clips adjuntos.
- Ajuste el temporizador al tiempo adecuado según las condiciones ambientales (el tiempo de muestreo suele ser de entre 2 y 5 minutos).
- Encienda la bomba y ponga en marcha el temporizador simultáneamente.
- Cuando se acabe el tiempo, apague la bomba, desmonte el muestreador y vuelva a colocar la tapa sobre la placa de agar.
- Fije la tapa a la placa de Petri con cinta adhesiva o Parafilm (evite usar cinta aislante, de embalaje, transparente o cinta americana).
- Escriba el número de muestra en la parte inferior de la placa de Petri.
- Registre toda la información pertinente en la Cadena de Custodia.
- Devuelva las muestras con una bolsa de hielo a EMSL Analytical para su análisis.
Kit básico EMSL VP-400 con
Paquete de 25 bombas E-Lite
#8709003
Consejo técnico: ¿Puede el moho causar problemas de salud?
El moho generalmente no representa un problema en interiores, a menos que las esporas caigan sobre una superficie húmeda y comiencen a crecer. El moho puede causar problemas de salud, ya que produce alérgenos (sustancias que pueden provocar reacciones alérgicas), irritantes y, en algunos casos, sustancias potencialmente tóxicas (micotoxinas). Inhalar o tocar moho o sus esporas puede provocar reacciones alérgicas en personas sensibles. Las reacciones alérgicas incluyen síntomas similares a los de la fiebre del heno, como estornudos, secreción nasal, ojos rojos y sarpullido (dermatitis). Las reacciones alérgicas al moho son comunes y pueden ser inmediatas o tardías. El moho también puede provocar ataques de asma en personas asmáticas alérgicas. Además, la exposición al moho puede irritar los ojos, la piel, la nariz, la garganta y los pulmones, tanto en personas alérgicas como no alérgicas. No se suelen reportar otros síntomas además de los alérgicos e irritantes como resultado de la inhalación de moho. La investigación sobre el moho y sus efectos en la salud continúa. Este folleto ofrece una breve descripción general; no describe todos los posibles efectos en la salud relacionados con la exposición al moho. Para obtener información más detallada, consulte a un profesional de la salud. También puede consultar con el departamento de salud estatal o local. (Fuente: Documento # 402-K-02-003 de la EPA)
MUESTREO DE SUPERFICIES CULTIVABLES
MUESTREO DE HISOPOS CULTIVABLES
Beneficios
- El hisopo para cultivo es económico y permite tomar muestras de las superficies rápidamente.
- Una prueba útil para el muestreo inicial del sitio.
- Posibilidad de identificación a nivel de especie.
- Se determina la viabilidad de los hongos.
Desventajas
- Las zonas de crecimiento de hongos suelen ser pequeñas y dispersas, por lo que es posible que no se detecten todas. Tomar varias muestras ayudará a solucionar este problema.
- Los problemas de salud relacionados con el crecimiento microbiano en interiores suelen deberse a la inhalación de grandes cantidades de esporas presentes en el aire, a veces durante un período prolongado. La presencia de material biológico en una superficie determinada no siempre indica la composición del aire.
- Este método detecta únicamente esporas e hifas viables, pero no hongos no viables o difíciles de cultivar. Se recomienda combinar el análisis directo de muestras con métodos de cultivo si la presencia de hongos no viables es importante para su proyecto.
- Los cultivos no pueden distinguir entre esporas, hifas y otras células fúngicas; los resultados se expresan como unidades formadoras de colonias.
Materiales
- Hisopo/paquete de cultivo estéril con la solución tampón adecuada para recoger y transportar la muestra (proporcionado por EMSL a petición del cliente).
- Guantes de látex/nitrilo
Recolección de muestras
- Con guantes puestos, retire el hisopo del material de embalaje.
- Retire el tapón del tubo de medios.
- Frota bien la zona deseada con el hisopo, haciéndolo rodar suavemente de un lado a otro sobre el área de muestreo.
- Introduzca el hisopo en el tubo, cierre bien la tapa y etiquételo correctamente.
- Para la elaboración de informes de cultivo cuantitativos, es necesario registrar la zona muestreada en la cadena de custodia.
Complete una Cadena de Custodia (COC) de EMSL, disponible en nuestro sitio web (www.emsl.com), detallando el nombre y la información del cliente, el nombre o número del proyecto, la muestra # y una descripción del área.
Envío de muestras
- Coloque las muestras en una nevera portátil con acumuladores de frío reutilizables.
- Se recomienda el envío urgente.
Guantes de nitrilo
Pequeño #8705400
Mediano #8705401
Grande #8705402
Extra grande #8705403
MUESTREO DE GRANDES CULTIVOS
Beneficios
- El muestreo a granel es económico y permite muestrear rápidamente los materiales de la superficie.
- Una prueba útil para la investigación inicial del sitio.
- Posibilidad de identificación a nivel de especie.
- Se determina la viabilidad de los hongos.
Desventajas
- Las zonas de crecimiento fúngico suelen ser pequeñas y dispersas, por lo que es posible que no se detecten todas en la muestra global. Se necesitarán varias muestras para solucionar este problema.
- Los problemas de salud relacionados con el crecimiento microbiano en interiores suelen deberse a la inhalación de grandes cantidades de esporas presentes en el aire, a veces durante un período prolongado. La presencia de materia biológica en una superficie determinada no siempre indica directamente qué hay en el aire.
- Este método detecta únicamente esporas e hifas viables, pero no hongos no viables o difíciles de cultivar. Se recomienda combinar el análisis directo de muestras con métodos de cultivo si la presencia de hongos no viables es importante para su proyecto.
- Los cultivos no pueden distinguir entre esporas, hifas y otras células fúngicas; los resultados se expresan como unidades formadoras de colonias.
Materiales
- Bolsas estériles para la toma de muestras (tipo Ziplock) para recoger y transportar las muestras (proporcionadas por EMSL a petición del cliente).
- Guantes de látex/nitrilo
Recolección de muestras
- Con guantes y herramientas limpias, retire una zona representativa del crecimiento de moho junto con el material de construcción (placas de yeso, madera, etc.). Un cuadrado de 2,5 cm (1 pulgada) es suficiente.
- Coloque el material a granel en una bolsa de muestreo y etiquete el exterior de la bolsa con la ubicación o descripción del muestreo.
Complete una Cadena de Custodia (COC) de EMSL, disponible en nuestro sitio web (www.emsl.com), detallando el nombre y la información del cliente, el nombre o número del proyecto, el número de muestra y una descripción del área.
Envío de muestras
- Coloque las muestras en una nevera portátil con acumuladores de frío reutilizables.
- Se recomienda el envío urgente.
MUESTREO DE PROPIETARIOS DE VIVIENDAS DE ERMI
Paso 1
Prepara tu casa para las pruebas.
Maximice las condiciones de reposo en el hogar el día anterior a la prueba y durante la misma. Apague los ventiladores portátiles y la calefacción o el aire acondicionado para evitar que el aire circule sobre las áreas que se van a analizar. Mantenga a las personas alejadas de las áreas que se van a analizar. El objetivo es evitar remover el polvo acumulado y que este se disperse en el aire poco antes o durante la prueba.
Paso 2
Equipo necesario
- 1 cinta métrica
- 1 aspiradora con accesorio de manguera
- 1 cable de extensión
- 1 rollo de cinta adhesiva, de pintura o de enmascarar
- Cronómetro o temporizador de cocina con incrementos de 5 minutos.
- 1 kit de aspiración de polvo (adquirido en EMSL Analytical, Inc.)
Prepare las áreas de prueba
Para el muestreo en viviendas, los investigadores de la EPA recomiendan tomar una muestra compuesta de la sala de estar y el dormitorio, utilizando el mismo aspirador de polvo para ambas habitaciones. Las demás áreas deben muestrearse por separado.
- En la sala de estar (sala familiar o salón), seleccione el sofá. Si no hay sofá, seleccione otra silla de uso común. Con la cinta métrica y el rollo de cinta adhesiva, marque las esquinas de un área de muestreo rectangular de 90 cm x 180 cm (3 pies x 6 pies) a lo largo del lado más largo del sofá. Si el área no es suficiente para el área de muestreo recomendada, ajuste las dimensiones según corresponda (pero intente muestrear un total de 1,7 metros cuadrados, 18 pies cuadrados). Registre el área de muestreo final que marcó con cinta adhesiva en las líneas correspondientes a la habitación muestreada en la hoja de datos.
- Para el dormitorio, seleccione el que se utilice con mayor frecuencia. Si hay más de una cama en el dormitorio, seleccione la que se utilice con mayor frecuencia. Con la cinta métrica y el rollo de cinta adhesiva, marque las esquinas de un área de muestreo rectangular de 3 pies x 6 pies en el suelo, justo al lado de la cama por donde el residente tiene más probabilidades de entrar y salir de ella. Si es posible, procure que el área de muestreo rectangular se extienda por debajo de la cama entre tres y cuatro pulgadas para que parte de la muestra quede debajo de la cama. Si el área no permite el muestreo recomendado, ajuste las dimensiones según corresponda (pero intente muestrear un total de 18 pies cuadrados). Registre el área de muestreo final que marcó con cinta adhesiva en las líneas junto al dormitorio muestreado en la hoja de datos.
- Se pueden tomar muestras de áreas distintas a la sala de estar, la sala familiar o los dormitorios. Si decide tomar muestras de otras áreas, deberá utilizar un aspirador de polvo independiente para cada una. Si tiene alguna pregunta, llame al laboratorio.
- Para familiarizarse con los procedimientos, lea el paso 3 a continuación antes de comenzar la prueba.
Paso 3
Realizar la prueba
- Asegúrese de que la manguera esté conectada correctamente a la aspiradora. Encienda la aspiradora para comprobar que la manguera esté aspirando aire y, a continuación, apáguela.
- En ocasiones, el dispositivo de recolección de polvo no encajará correctamente en la conexión de la manguera. En ese caso, puede usar cinta adhesiva o cinta aislante para sujetar el colector de polvo a la conexión de la manguera.
- Utilice el cable de extensión según sea necesario para alcanzar la zona marcada con la manguera de la aspiradora.
- Retire ambas tapas del dispositivo de muestreo. Coloque las tapas en un lugar donde pueda encontrarlas una vez finalizada la prueba.
- Conecte el extremo plano y redondo del dispositivo de muestreo al extremo del accesorio de manguera de su aspiradora.
- Utilice el extremo inclinado del dispositivo de muestreo para recoger la muestra. Mantenga el extremo inclinado del dispositivo de muestreo al ras con la superficie que se va a muestrear.
- Encienda la aspiradora y ponga en marcha el cronómetro. Comience a cronometrar el proceso de aspirado con el cronómetro. Procure no mover la cinta. Procure no exceder el período de muestreo de 5 minutos.
- Aspire dentro del área delimitada con cinta adhesiva. Para ello, pase el dispositivo de muestreo sobre líneas paralelas imaginarias ligeramente superpuestas dentro del área de muestreo durante unos 5 minutos. Si es necesario, ajuste la velocidad de movimiento para que se utilicen 5 minutos en total para aspirar toda el área de muestreo de 18 pies cuadrados.
- Pase a la segunda habitación y repita la aspiración de la zona objetivo. Una vez finalizada la toma de muestras, sostenga el dispositivo de muestreo hacia arriba, apuntando al techo, y apague la aspiradora. Vuelva a tapar el extremo inclinado del dispositivo de muestreo para no perder el polvo recogido.
- Evite aspirar residuos grandes que no sean polvo. Si aspira accidentalmente la cinta, apunte el dispositivo de muestreo hacia el techo y apague la aspiradora. Retire la cinta del dispositivo de muestreo. Vuelva a encender la aspiradora y continúe aspirando la zona de muestreo. Asegúrese de tener en cuenta el tiempo de muestreo perdido al realizar esta operación, de modo que obtenga un total de 5 minutos de muestreo.
- Separe el dispositivo de muestreo de la manguera de la aspiradora y vuelva a tapar el extremo plano del dispositivo.
- Una vez colocadas las tapas pequeñas en el dispositivo de muestreo de polvo, asegúrese de que haya polvo en el recipiente antes de enviarlo al laboratorio. Si no se observa polvo visible, repita el procedimiento de muestreo en ambas habitaciones, en ubicaciones diferentes, hasta que aparezca polvo visible en el dispositivo.
- Si pierde las tapas pequeñas, selle las aberturas de forma completa y segura con cinta aislante o cinta americana.
Paso 4
Complete el papeleo
- En la hoja de datos, indique el número del dispositivo de muestreo donde sea necesario (se encuentra debajo del código de barras en el lateral de la caja).
- En la hoja de datos, identifique todas las áreas muestreadas utilizando ese número de dispositivo de muestreo en particular.
- Complete toda la información teniendo en cuenta cualquier ajuste del área de muestreo de 18 pies cuadrados.
- Vuelva a colocar el dispositivo de muestreo junto con su hoja de datos correspondiente en la caja.
- Selle la caja con cinta adhesiva para evitar que se abra durante el envío.
Paso 5
Devuelva el dispositivo de muestreo.
- Devuelva la caja por correo a EMSL. Es fundamental que solo los laboratorios autorizados por la EPA para utilizar esta tecnología patentada realicen este análisis. EMSL cuenta actualmente con dicha autorización de la EPA.
- Los resultados estarán listos después de 5 días hábiles.
- Los resultados urgentes están disponibles con un recargo.
Un informe escrito que compara su casa con la ERMI Se enviará a la dirección postal indicada en la hoja de datos.
Paso 6
¿Y ahora qué?
Si los resultados indican que su hogar podría tener un problema de moho, le recomendamos contratar a una empresa especializada para identificar la fuente del problema. Puede consultar las páginas amarillas en la sección de consultores ambientales. También puede consultar los siguientes sitios web para encontrar una lista de profesionales cualificados en calidad del aire interior en su zona:
Por favor, conserve esta sección para sus registros.
El kit de prueba de moho EMSL está diseñado para usarse únicamente según se describe en las instrucciones adjuntas. Estas instrucciones son aplicables para uso residencial. Para aplicaciones no residenciales, comuníquese con EMSL para obtener los protocolos de muestreo adecuados. EMSL no se responsabiliza por errores del usuario durante el muestreo. EMSL no se responsabiliza por ningún daño a los electrodomésticos utilizados en la recolección de estas muestras. Este kit no debe usarse en lugar de una inspección visual y completa de las instalaciones muestreadas. En ningún caso EMSL será responsable por daños directos, especiales, consecuenciales o incidentales, independientemente de la negligencia (ya sea exclusiva o concurrente) de EMSL y de si EMSL ha sido informada de la posibilidad de tales daños, que surjan de o en relación con los servicios de EMSL en virtud del presente acuerdo o la entrega, uso, confianza o interpretación de los resultados de la prueba por parte del cliente o cualquier tercero. EMSL no acepta ninguna responsabilidad legal por los fines para los que el cliente utilice los resultados de la prueba. En ningún caso EMSL será responsable ante un cliente o cualquier tercero, ya sea con base en teorías de responsabilidad extracontractual, contractual o cualquier otra teoría legal o equitativa, por un monto superior al precio de compra.
MUESTREO DE PCR
Muestreo de aire mediante PCR
(Los cartuchos de aire están disponibles en EMSL, con los números de identificación de producto 8715309 y 8715251).
- Obtenga el casete de muestreo de aire para PCR de EMSL.
- Retire los tapones superior (azul) e inferior (rojo) del casete.
- Conecte una bomba de vacío al casete a través de la abertura inferior.
- Ajuste el caudal de la bomba entre 10 y 13 litros por minuto.
- Puede introducirse la cantidad de aire que se desee por la abertura superior. No hay límite máximo de tiempo para la toma de muestras; sin embargo, recolectar 1000 litros de aire es suficiente para la mayoría de las pruebas de PCR.
- Coloque cada cartucho de aire en un recipiente individual hermético, como por ejemplo una bolsa de plástico Ziploc.
- Etiquete claramente la bolsa de plástico con la identificación de la muestra.
- Complete el formulario de Cadena de Custodia de EMSL especificando el número de muestra, el volumen de aire recogido, el lugar de recogida, la hora y la fecha.
- Enviar el casete a EMSL.
Muestreo masivo de PCR
(Los frascos de vidrio de 2 oz y 4 oz están disponibles en EMSL, con los números de identificación de producto 8714223 y 8714232).
- Adquiera bolsas de plástico o frascos de vidrio en EMSL.
- Localice la porción representativa del material a granel.
- Recoja una pequeña cantidad de material con una cuchara, espátula o cualquier otra herramienta.
- Coloque la muestra en un recipiente limpio y hermético, como una bolsa de plástico Ziploc o un frasco de vidrio pequeño. Ciérrelo bien.
- Limpie cualquier residuo en el exterior del recipiente. Si es necesario, desinféctelo con toallitas con alcohol.
- Etiquete claramente el recipiente con la identificación de la muestra.
- Complete el formulario de Cadena de Custodia de EMSL especificando el número de muestra, el lugar de recolección, la hora y la fecha.
- Enviar muestra a granel a EMSL.
Muestreo mediante hisopado PCR
(El hisopo Butterfields de 1 ml está disponible en EMSL, ID de producto 8708935)
- Obtenga un hisopo del EMSL para recolectar la muestra.
- Con guantes puestos, retire el hisopo del tubo de transporte.
- Frota bien la zona deseada con el hisopo, haciéndolo rodar suavemente de un lado a otro sobre el área de muestreo. Un área de muestreo de 10 x 10 cm (4" x 4") es suficiente para la mayoría de las pruebas de PCR.
- Introduzca el hisopo en el tubo con el medio de transporte y cierre bien la tapa.
- Etiquete claramente el tubo de transporte con la identificación de la muestra.
- Complete el formulario de Cadena de Custodia de EMSL especificando el número de muestra, el área de muestreo, el lugar de recolección, la hora y la fecha.
- Enviar la muestra al EMSL.
Muestreo de polvo mediante PCR
(El muestreador de polvo y alérgenos está disponible en EMSL, ID de producto 8715600).
- Obtenga el muestreador de polvo y alérgenos de EMSL.
- Retire las tapas de plástico blancas de ambos extremos del muestreador de polvo y alérgenos.
- Conecte el muestreador de polvo y alérgenos a la manguera o tubo de la aspiradora.
- Encienda la aspiradora y aspire la zona necesaria para obtener suficiente material para la prueba PCR. No hay límite máximo de tiempo para la toma de muestras; sin embargo, se requiere recolectar al menos 5 mg de polvo para la mayoría de las pruebas PCR.
- Desconecte el muestreador de polvo y alérgenos de la manguera o tubo de la aspiradora.
- Coloque las tapas de plástico blancas en ambos extremos del muestreador de polvo y alérgenos para asegurar la muestra de polvo dentro del tubo interior de malla de plástico.
- Introduzca cada muestrario de polvo y alérgenos en un recipiente individual hermético, como una bolsa de plástico Ziploc.
- Etiquete claramente la bolsa de plástico con la identificación de la muestra.
- Complete el formulario de Cadena de Custodia de EMSL especificando el número de muestra, el lugar de recolección, la hora y la fecha.
- Enviar el muestreador de polvo y alérgenos a EMSL.
Botellas para análisis de agua
GRATIS para EMSL
Los clientes llaman para
Detalles
Muestreo de agua mediante PCR
(EMSL ofrece frascos de plástico estériles con conservante de 120 ml, 250 ml y 1000 ml con los números de identificación de producto 87M007, 87M005 y 87M001).
- Adquiera botellas de plástico estériles con conservante de EMSL.
- Llene el recipiente con el volumen de agua especificado y ciérrelo herméticamente para evitar fugas durante el transporte. Para la mayoría de las pruebas PCR, es suficiente recoger entre 100 mililitros y 1 litro de agua.
- Limpie cualquier resto de líquido en el exterior del recipiente. Desinfecte con toallitas con alcohol si es necesario.
- Etiquete claramente la botella de plástico con la identificación de la muestra.
- Complete el formulario de Cadena de Custodia de EMSL especificando el número de muestra, el volumen de agua, el lugar de recolección, la hora y la fecha.
- Coloque las botellas en el contenedor isotérmico con bolsas de hielo para evitar que las muestras se sobrecalienten durante el envío.
- Envíe muestras de agua a EMSL con entrega al día siguiente.
Muestreo de cultivos bacterianos y fúngicos mediante PCR
- Las cepas bacterianas y fúngicas pueden enviarse para su identificación como cultivos axénicos en placas de agar.
- Para garantizar la pureza del cultivo y la precisión de la identificación, las colonias aisladas deben ser visibles en una placa.
- Etiquete claramente la placa de agar con la identificación de la muestra.
- Complete el formulario de Cadena de Custodia de EMSL especificando el número de muestra.
- Coloque la placa de agar en el contenedor isotérmico, garantizando la integridad de la muestra durante el envío.
- Enviar la placa de agar a EMSL.
MUESTREO DE ALÉRGENOS
Procedimiento para el muestreo de polvo con el colector de polvo
- Identifique cuatro (4) áreas separadas para muestrear. Cada área muestreada debe tener aproximadamente 1/4 de metro cuadrado (aproximadamente 2.75 pies cuadrados).
- Retire las tapas blancas de ambos extremos del casete colector rojo. Guárdelas para volver a colocarlas una vez finalizado el muestreo.
- Conecte el extremo recto del cartucho rojo a la manguera/tubo de la aspiradora. (Se recomienda una aspiradora con filtro HEPA).
- Utilice el extremo inclinado para recoger polvo durante 30 segundos en cada una de las cuatro (4) áreas. El tiempo total de muestreo y el área recogida, por casete rojo, deben ser de 2 minutos y 1 metro cuadrado, respectivamente.
- La cantidad mínima de polvo que se acumula dentro del colector rojo debe llegar hasta la mitad de la altura del filtro de malla.
- Una vez finalizado el muestreo, vuelva a colocar las tapas blancas en ambos extremos del casete rojo y colóquelo en una bolsa pequeña con cierre hermético o similar. Escriba en la bolsa el número de muestra, su nombre y la ubicación (por ejemplo: Muestra 1, Dormitorio).
- Envíe los filtros que contienen la muestra de polvo a EMSL Analytical, Inc. para su análisis de alérgenos utilizando el formulario de cadena de custodia de EMSL Microbiology. Seleccione el plazo de entrega deseado.
| Análisis de alérgenos en interiores disponibles | |
|---|---|
| Código de prueba | Descripción* |
| M034 Caspa de gato | Caspa de gato (Fel d 1) |
| M035 Caspa de perro | Caspa de perro (Can f 1) |
| Cucaracha M036 | Cucaracha (Bla g 2) |
| M037 Ácaros del polvo | Ácaros del polvo (Der p 1 y Der f 1) |
| Ratón M038 | Ratón (Mus m 1) |
| M039 Rata | Rata (Rata n 1) |
| Grupo IA M044 | Gato, perro, cucaracha y ácaros del polvo |
| Grupo IA M254 | Rata y ratón |
| * Todos los análisis se realizan mediante MARIA (Multiplex Array for Indoor Allergens). | |
| * Se pueden analizar múltiples alérgenos a partir de un solo filtro con una muestra de polvo. | |
Muestreador de alérgenos
#8715600
Kit de muestras de alfombras disponible
Solo para uso del consultor.
Muestreo de alfombras EMSL
Kit de 25 mm
#8715314
Procedimiento para la toma de muestras de aire para animales de laboratorio
- Utilizando una bomba de muestreo de bajo volumen, tome muestras del entorno de trabajo con un casete de 37 mm que contenga un filtro de fibra de vidrio de 1,0 micras o un filtro MCE de 0,8 micras.
- El tiempo de recolección debe ser de 1,5 a 2,5 litros por minuto y el tiempo de muestreo debe ser de cuatro (4) a ocho (8) horas. (Tenga en cuenta que el tiempo debe estar en minutos para la cadena de custodia).
- Etiquete cada casete de muestra con el nombre del lugar y la fecha/hora en que se tomó la muestra.
- Utilice el formulario de cadena de custodia de EMSL Microbiology y complételo con la información de facturación e informes solicitada. Para cada muestra recolectada, incluya el número de muestra, la ubicación, la matriz (aire), el código de prueba (ver más abajo), el volumen total recolectado en minutos (por ejemplo, 1.8 LPM x 240 minutos = 432 LPM) y la fecha y hora de recolección. Firme y envíelo a EMSL Analytical, Inc. – Cinnaminson, NJ.
| Análisis de alérgenos disponibles | |
|---|---|
| Código de prueba | Descripción* |
| Ratón M038 | Ratón (Mus m 1) |
| M039 Rata | Rata (Rata n 1) |
| Grupo IA M254 | Rata y ratón |
MUESTREO DE COLIFORMES TOTALES
Cadena de custodia
Debe incluir la fecha y hora de muestreo, así como la procedencia de la muestra. Esto es necesario para determinar si las muestras se encuentran dentro del plazo de conservación y son válidas para el análisis. Si busca coliformes totales, indíquenos si prefiere la detección de presencia/ausencia (Colilert) o el recuento (Número Más Probable o técnica de filtración por membrana).
Recolección de muestras
Todas las muestras de agua deben tomarse en recipientes de muestreo estériles y homologados, que nuestro laboratorio puede proporcionar si se solicitan. Las muestras de agua tratada (de la red municipal/de distribución) deben declorarse con tiosulfato de sodio (este producto ya viene en botellas que proporciona nuestro laboratorio). Mantenga la botella de muestreo cerrada hasta que se llene en el punto de muestreo.
Muestra de distribución o grifo del fregadero
- Retire el aireador del grifo.
- Enjuague el grifo con una solución de lejía.
- Para purgar la tubería, abra el grifo completamente y déjelo correr durante dos o tres minutos, o durante el tiempo suficiente para que se limpie la línea de servicio.
- Reduzca el flujo de agua para poder llenar la botella sin salpicaduras.
- Se necesitan 100 ml por cada muestra enviada para análisis.
Muestras de pozos
Si se toma una muestra de un pozo con bomba manual, deseche el agua durante unos cinco minutos antes de recogerla. Si el pozo cuenta con una bomba mecánica, recoja la muestra de un grifo en la salida. Si no hay bomba, recoja la muestra directamente del pozo con una botella esterilizada con un peso en la base; tenga cuidado de evitar la contaminación de la muestra con cualquier residuo superficial.
Tiempos de espera
Los tiempos de retención para muestras reglamentarias son de 30 horas para el método de prueba de presencia/ausencia y de 8 horas para el método de filtración por membrana. Las muestras no reglamentarias tienen un tiempo de retención de 8 horas, independientemente del método de prueba.
Si el cliente es consciente de que se van a superar los plazos de espera, pero desea que el análisis continúe de todos modos, por favor, indíquelo en la Cadena de Custodia.
Si se superan los tiempos de espera, los resultados no serán válidos y esto se indicará en el informe final.
Tiempos de respuesta
Los resultados de la prueba de presencia/ausencia de coliformes totales (Colilert) o del recuento (NMP) pueden notificarse en 24 horas.
Los resultados del recuento total de coliformes (MFT) tardarán entre 6 y 10 días.
Envío de muestras
Todas las muestras deben enviarse refrigeradas, no congeladas, y en posición vertical. El mejor método de envío para estas muestras es utilizar bolsas de hielo, no botellas de refresco llenas de agua congelada, bolsas de hielo ni hielo suelto. Las muestras que no se envíen correctamente podrían contaminarse o ser rechazadas.
CONTAMINACIÓN POR AGUAS RESIDUALES EN EDIFICIOS
- Los métodos disponibles para detectar la contaminación por aguas residuales en edificios incluyen:
- M117: un método basado en cultivos para la detección de coliformes totales, E. coli y enterococos (tiempo de respuesta: 48 horas).
- M013: método basado en cultivo para la detección de coliformes totales, coliformes fecales, E. coli y estreptococos fecales (tiempo de respuesta: 6-10 días).
- M095: un nuevo método basado en PCR para la detección de Bacteroides totales (tiempo de respuesta disponible: 24 horas).
- Los métodos basados en cultivos tienen la ventaja de detectar únicamente contaminantes bacterianos vivos, que pueden ser los únicos de interés si existe preocupación por la presencia de enfermedades. Las pruebas de endotoxinas también pueden ser útiles para medir la cantidad total de bacterias Gram negativas en el edificio (véase la página 17).
- La prueba de Bacteroides tiene algunas ventajas sobre las pruebas tradicionales basadas en cultivos, entre las que se incluyen:
- Bacteroides es específico para la contaminación fecal de todas las fuentes: animales, aves y humanos.
- Los coliformes, la E. coli, los estreptococos fecales y los enterococos pueden crecer en el agua, el suelo, los sedimentos y la vegetación en entornos no contaminados (la E. coli se encuentra en entornos tropicales prístinos).
- Las bacterias del género Bacteroides no se multiplican en el medio ambiente.
- Las bacterias del género Bacteroides superan en número a las bacterias coliformes en una proporción de 1.000:1 y a las bacterias del género E. coli en una proporción de 10.000:1; por lo tanto, la probabilidad de encontrar Bacteroides aumenta considerablemente.
- Las pruebas tradicionales basadas en cultivos dependen de la presencia de bacterias vivas. Estas bacterias a menudo no son viables en ambientes interiores. ESTO SIGNIFICA QUE UN RESULTADO NEGATIVO DE COLIFORMES O E. COLI NO IMPLICA LA AUSENCIA DE CONTAMINACIÓN FECAL. La nueva prueba Bacteroides supera estas limitaciones de cultivo. El laboratorio puede detectar bacterias vivas, no viables o viables pero no cultivables.
Procedimiento de muestreo para todas las pruebas de contaminación de aguas residuales
- Obtenga un hisopo estéril de 1 ml de solución de Butterfield (ID de producto EMSL 8708935) para recoger y transportar muestras (proporcionado por EMSL a su solicitud).
- Con los guantes puestos, retire el hisopo del envase estéril.
- Desenrosque con cuidado la tapa del dispositivo de muestreo; el hisopo está unido a la tapa.
- Elimine suavemente el exceso de solución del hisopo de muestreo presionando el hisopo contra la pared interior del tubo con un movimiento de rodadura.
- Sostenga el hisopo en un ángulo aproximado de 30° con respecto a la superficie de muestreo, teniendo cuidado de no contaminar ninguna parte del hisopo ni del lugar de muestreo.
- Con una presión firme y uniforme, mueva el hisopo lenta y completamente sobre un área de muestreo de 4” x 4”, humedeciendo la punta del hisopo con la solución neutralizante según sea necesario. Primero horizontalmente, luego verticalmente:
- Una vez finalizada la toma de muestras, vuelva a colocar con cuidado el hisopo en el vial y cierre bien la tapa.
- Etiquete la muestra con un rotulador de tinta permanente.
- Se deben tomar muestras de fondo en áreas no contaminadas con materia fecal.
Envío de muestras
- Las muestras que se sometan a análisis de cultivo deben enviarse refrigeradas (no congeladas) durante la noche, dentro de las 24 horas posteriores a su recolección. El mejor método de envío para estas muestras es utilizar una nevera portátil con acumuladores de frío, no bolsas de hielo ni hielo suelto.
- No existen requisitos especiales de envío ni tiempos de espera para las bacterias del género Bacteroides, ya que no se multiplican fuera del intestino. Sin embargo, no almacene la muestra durante más de un mes antes de su análisis.
LEGIONELA SAMPLIN
Legioneláceas son omnipresentes en aguas superficiales, aguas subterráneas y ambientes estuarinos. La mayoría de los brotes de enfermedades se deben a Legionella Se deben a la niebla contaminada procedente de las torres de refrigeración y los sistemas de distribución de agua potable. La exposición se produce por el contacto con agua contaminada en forma de aerosol.
Ofrecemos cuatro métodos diferentes basados en la cultura, según el nivel de información que necesite. Para obtener más información sobre las diferentes pruebas, visite: www.legionellatesting.com. Todas las pruebas de cultivo requieren de 10 a 14 días para completarse.
También ofrecemos varios métodos de PCR diferentes según la información que necesite. Puede encontrar más información sobre estos en www.legionellatesting.com. Si bien el método de cultivo se considera el "estándar de oro", la PCR es útil para descartar posibles Legionella Contaminación en proyectos con plazos de entrega ajustados. Los resultados de la PCR se pueden solicitar el mismo día, en 24 horas o en 48 horas, según sus necesidades.
Dónde buscar
Esta es una lista de sistemas de agua que han demostrado albergar la bacteria Legionella y que se han asociado con brotes. Su investigación debe incluirse en cualquier programa de evaluación de riesgos de Legionella.
- Sistemas de agua potable
- Torres de refrigeración
- Generación de aerosoles durante el tratamiento biológico de algunas corrientes de aguas residuales de procesos industriales. Por ejemplo, en la fabricación de pulpa y papel, alimentos y bebidas, y productos farmacéuticos.
- Generación de aerosoles durante el tratamiento de aguas residuales y aguas pluviales municipales.
- Agua cruda, agua de servicio o agua contra incendios
- Fuentes y estanques ornamentales para exteriores e interiores.
- Piscinas climatizadas
- Agua para CPAP
- Tierra para macetas
- Bañeras de hidromasaje
- Humidificadores
- fluidos para el trabajo de metales
- Equipos de terapia médica como unidades de diálisis, sondas nasogástricas, equipos respiratorios y nebulizadores, bañeras de hidromasaje.
- Instalaciones de lavado de autos comerciales, en particular aquellas que utilizan agua reciclada.
- rociadores de verduras de supermercado
- Máquinas de hielo en hoteles y hospitales
- Vaporizadores corporales al aire libre en estadios de béisbol y parques de atracciones*
*No se ha asociado con ningún caso de legionelosis.
Consideraciones sobre el muestreo
- Las muestras de agua deben recogerse en recipientes estériles (disponibles en EMSL).
- Se recomienda una muestra de agua de 1 litro para aguas potables (que contengan tiosulfato de sodio).
- Si se sospecha la presencia de niveles elevados de bacterias, se acepta una cantidad inferior a 1 litro.
- El agua clorada debe ser tratada con tiosulfato de sodio.
- Normalmente, entre 100 y 250 ml son suficientes para muestras de agua no potable.
- Además de recoger muestras de agua, es útil tomar una muestra con un hisopo de la biopelícula que se encuentra en las tuberías de suministro de agua.
- Las muestras deben transportarse al laboratorio en un plazo de 24 horas en neveras portátiles con acumuladores de frío.
Puntos de muestreo de agua potable - Muestreo semestral
- Punto de entrada de la tubería principal de agua de la ciudad
- tanques de almacenamiento
- Punto de drenaje del calentador de agua*
- Retorno de agua caliente
- Último punto para agua fría/Primer punto para agua caliente
- Último punto en agua caliente*/Primer punto en agua fría
- 10% de salidas seleccionadas (agua y hisopo)*
*Realizar pruebas periódicamente
Legionella Lugares de muestreo rutinario
- Pruebe todas las ubicaciones para establecer una línea de base.
- Pruebe todas las ubicaciones durante un brote.
Envío de muestras
- Etiquete la botella con el número de muestra y regístrelo en la cadena de custodia.
- Utilice un número distintivo para cada muestra. Complete toda la información de las muestras en una hoja de datos de muestras para su propio registro. Envíe una copia junto con las muestras al laboratorio. Puede descargar una copia del formulario de Cadena de Custodia en nuestro sitio web. www.emsl.com.
- Cierre bien las botellas. Asegúrese de que no haya fugas de agua durante el envío y el transporte. Se recomienda sellar la botella alrededor de la tapa y el cuello con cinta aislante de vinilo. Coloque las botellas selladas en una bolsa de plástico limpia.
- Coloque las muestras en cajas isotérmicas o sobre acumuladores de frío para protegerlas de las fluctuaciones extremas de temperatura durante los meses de verano. NUNCA UTILICE HIELO NI HIELO SECO. Rellene la caja con virutas de espuma para amortiguar y selle la caja de forma segura para el envío. Envíe las muestras por mensajería urgente. Programe la toma de muestras entre el lunes y el viernes para que puedan entregarse en el laboratorio a más tardar el sábado.
Ubicaciones de muestreo de torres de enfriamiento - Muestreo trimestral
- Maquillaje de torre
- Sumidero de torre lejos del maquillaje* (agua y hisopo)
- Entrada al intercambiador de calor
- Salida del intercambiador de calor
- Paquete de distribución
- Kit Tower* (agua y toallita)
MUESTREO DE SARM
El Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM) es un tipo de bacteria resistente al tratamiento con antibióticos derivados de la penicilina. Esta bacteria se transmite generalmente por contacto directo con las manos de un trabajador sanitario o de una persona infectada o portadora del microorganismo. También se han producido infecciones adquiridas en la comunidad fuera del entorno hospitalario, en lugares como gimnasios, escuelas, guarderías, cruceros y residencias de ancianos.
EMSL Analytical, Inc. ofrece análisis de MRSA en muestras ambientales (hisopos, muestras a granel o agua). Tenga en cuenta que no podemos aceptar muestras clínicas para su análisis.
Se debe tener precaución y usar guantes al recolectar muestras de objetos contaminados; colóquese guantes limpios inmediatamente antes de la recolección. Quítese los guantes inmediatamente después de usarlos, antes de tocar objetos no contaminados y superficies ambientales, y lávese las manos de inmediato para evitar la transmisión de microorganismos a otros entornos.
Procedimiento de muestreo
Muestreo con hisopo
- Obtenga un hisopo estéril de 1 ml de caldo neutralizante HiCap Pur-Blue (ID de producto 8708942) de EMSL para recolectar muestras para cultivo.
- Retire el hisopo del empaque y frote bien la zona deseada, moviéndolo suavemente de un lado a otro. Se recomienda un área de 10 x 10 cm (4" x 4"). Introduzca el hisopo en el tubo y cierre bien la tapa. Envíe los hisopos a EMSL.
Muestras a granel
- Con guantes puestos, extraiga un pequeño trozo del material sospechoso. Coloque el trozo dentro de un recipiente limpio y estéril o una bolsa de plástico nueva (tipo Ziploc).
- Cierre la bolsa o tape el recipiente y etiquételo adecuadamente.
Envío de muestras
- Todas las muestras deben enviarse refrigeradas (no congeladas) durante la noche, dentro de las 24 horas posteriores a su recolección. El mejor método de envío para estas muestras es usar acumuladores de frío, no bolsas de hielo ni hielo suelto. Las muestras que no se envíen correctamente podrían contaminarse y ser rechazadas por el laboratorio.
- EMSL ofrece dos métodos de análisis de SARM basados en cultivos (código M729 para P/A) y (código M730 para análisis cuantitativo).
MUESTREO DE ENDOTOXINAS AMBIENTALES
Las endotoxinas son moléculas con ciertos efectos tóxicos característicos. Actualmente se reconocen como una clase de compuestos presentes en la membrana externa de ciertas bacterias (gramnegativas). Dado que estas bacterias gramnegativas están muy extendidas en el medio ambiente, también lo están las endotoxinas. Se han detectado altos niveles en diversos entornos, como fábricas de algodón, plantas de tratamiento de aguas residuales agrícolas o industriales, lavados industriales, nebulizaciones de agua y humidificadores contaminados, donde se espera la presencia de agua y bacterias gramnegativas. Los principales focos de contaminación son los fluidos a base de agua recirculada que generan aerosoles.
Resumen de procedimientos
Las muestras de aire se recogen en filtros de membrana libres de endotoxinas, se almacenan desecadas siempre que sea posible o a 4 °C. El análisis de endotoxinas puede realizarse en muestras de aire, agua, polvo o muestras a granel.
PRECAUCIÓN: No existen valores umbral aceptados, por lo que deben realizarse comparaciones de valores relativos entre el área sospechosa y un área no sospechosa en condiciones ambientales similares. Dado que los niveles de endotoxinas pueden ser significativos en el aire exterior, este último podría no ser adecuado para medir los niveles de fondo, especialmente en entornos con altos niveles de bacterias Gram negativas (véase el primer párrafo). Todos los utensilios de muestreo deben estar certificados como libres de endotoxinas, y no se pueden utilizar materiales de PVC ni polipropileno debido a su afinidad y unión con las endotoxinas.
Materiales
Fluidos y muestras a granel:
- Recoger en recipientes libres de endotoxinas (preferiblemente de vidrio, o en su defecto, de poliestireno).
Equipo necesario para el muestreo de aire:
- Bomba de bajo caudal
- rotámetro
- Tubos flexibles
- Casetes de poliestireno libres de endotoxinas con filtros de membrana de policarbonato de 0,2 µm de diámetro y almohadillas de soporte de fibra de vidrio AP40. Estos productos deben ser tratados especialmente para eliminar todas las endotoxinas; por favor, haga su pedido a EMSL.
- Se deben usar guantes quirúrgicos estériles al tomar muestras.
Procedimiento de muestreo
Para el muestreo de aire:
- Se debe tener precaución para evitar respirar sobre los recipientes de muestreo, tocarlos o exponerlos de cualquier otra forma a la contaminación humana.
- Para la toma de muestras en interiores, asegúrese de que todas las puertas y ventanas estén cerradas.
- Calibrar la bomba a 1,5 litros/minuto
- Con guantes, conecte el casete a la bomba con el extremo de la tapa roja hacia la bomba. Recoja muestras de aire durante 4 horas por muestra.
- Desconecte el casete y vuelva a colocar la cubierta protectora tanto en la entrada como en la salida. Envuelva todo el casete en su embalaje original y séllelo con cinta adhesiva.
Para fluidos y muestras a granel:
- Recoja la muestra en un recipiente libre de endotoxinas. Generalmente, 15-50 ml son suficientes.
Para todas las matrices:
- Etiqueta con información de muestra.
- Complete una Cadena de Custodia (COC) de EMSL, disponible en el sitio web (www.emsl.com), detallando el nombre y la información del cliente, el nombre o número del proyecto, la muestra # y una descripción del área.
- Envíe las muestras a EMSL Analytical, Inc. lo antes posible. Las muestras de fluidos deben enviarse con bolsas de hielo.
Sugerencias de control de calidad
- Es necesario recoger varias muestras en un mismo lugar para poder comparar una zona posiblemente afectada con otra que no lo esté.
- Los recipientes utilizados para los materiales de prueba no deben estar agrietados ni rotos, y el material de embalaje debe permanecer intacto.
CONDICIONES LIMITANTES PARA EL CRECIMIENTO DE PATÓGENOS
Asesoramiento proporcionado por EMSL Analytical, Inc.
| Patógenos | Mín. aw | Mín. pH | Máximo pH | Máximo sal % | Mín. Temperatura (°C) | Máximo Temperatura. | Oxígeno Requisito |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Campylobacter jejuni | 0.99 | 4.9-5.5 | 8.0 | 1.5-2.0 | 30-32 | 42-45 | Microaerófilo |
| Clostridium botulinum tipo A y proteolítico B y F | 0.93-0.96 | 4.7 | 9.0 | 10.0 | 10.0 | 48-50 | Anaerobio |
| Clostridium botulismo tipo E y B y F no proteolíticos | 0.93-0.96 | 4.7-4.8 | 9.0 | 4.5-6.0 | 3.0 | 45 | Anaerobio |
| E. coli | 0.93-0.95 | 3.6-4.7 | 9.5 | 7.5-8.0 | 0.6-3.0 | 45 | Anaerobio facultativo |
| Listeria monocytogenes | 0.92-0.95 | 4.8 | 9.6 | 8-12 | 0-2.0 | 45 | Anaerobio facultativo |
| Salmonella spp. | 0.92 | 4.0 | 9.0 | 8.0 | 5.0 | 46-47 | Anaerobio facultativo |
| Shigella spp. | 0.96 | 6.0 | 10.0 | 6.0 | 7.0 | 46 | Anaerobio facultativo |
| Staphylococcus aureus | 0.85-0.86 | 4.0 | 10.0 | 18-20 | 5-6* | 45-45 | Anaerobio facultativo |
| Vibrio cholerae | 0.95 | 3.6-6.0 | 9.6 | 6-8 | 8.0 | 42-46 | Anaerobio facultativo |
| Vibrio parahemolítico | 0.94 | 4.8-5.0 | 9.6 | 8-10 | 5.0 | 43 | Anaerobio facultativo |
| Vibrio vulnificus | 0.95 | 6.3 | 9.0 | 6.0 | 13.0 | 44 | Anaerobio facultativo |
| Yersinia enterocolitica | 0.95-0.96 | 4.1-4.4 | 9.0 | 6-7 | -1.0-1 | 44 | Anaerobio facultativo |
*La temperatura mínima para la formación de toxinas es de 10 °C.
Microaerófilo: requiere niveles limitados de oxígeno.
Anaerobio: requiere la ausencia de oxígeno.
Anaerobio facultativo: crece con o sin oxígeno.
INFORMACIÓN SOBRE MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROBIOLOGÍA
EMSL Analytical, Inc. ofrece una amplia variedad de medios de muestreo a sus clientes. La siguiente información le ayudará a seleccionar el medio de cultivo más adecuado para obtener la muestra más representativa del entorno. La lista de medios que se presenta a continuación no es exhaustiva; si tiene requisitos específicos, no dude en consultarnos.
Medios bacterianos
- TSA (agar tripticasa de soja)
- TSA con sangre 5%
- MAC (MacConkey)
- Agar HE (Hekton Enteric)
- Agar BCYE (agar de levadura con carbón activado tamponado)
- MSA (agar sal manitol)
- EMB (Azul de metileno eosina)
- BE (Agar bilis-esculina)
- Chocolate Agar
- BHI (Infusión Cerebro-Corazón)
- Agar xilosa lisina desoxicolato (agar XLD)
Medios de cultivo para hongos
- MEA (Agar de extracto de malta)
- PDA (Agar de dextrosa de patata)
- Agar de celulosa
- SAB (agar dextrosa de Sabouraud)
- Agar de harina de maíz
- DG18 (Agar diclorán-glicerol 18)
- Agar de semillas de pájaro
- Agar micobiótico
Recomendaciones generales sobre los medios de muestreo de aire para bacterias y hongos cultivables.
- Para el muestreo de hongos, en la mayoría de los casos, recomendamos MEA.
- Para la identificación de especies de hongos, utilice placas MEA y DG18.
- Para la toma de muestras bacterianas, en la mayoría de los casos, recomendamos TSA o TSA con 5% Blood.
- Para la toma de muestras específicamente para bacterias Gram negativas, recomendamos el agar MacConkey.
- El Departamento de Microbiología estará encantado de hacerle recomendaciones basadas en su situación particular de muestreo.
Medios de cultivo de hongos
| MEA (Agar de extracto de malta) | Medio de cultivo de referencia para la especiación de hongos. |
| PDA (Agar de dextrosa de patata) | Medios de cultivo de uso general utilizados para el aislamiento de hongos y mohos. |
| Agar de celulosa | Medios microbianos multipropósito utilizados para aislar o para aislar hongos hidrófilos capaces de utilizar carbohidratos complejos. Se recomienda con mayor frecuencia en investigaciones de calidad del aire interior. Stachybotrys contaminación por sp. |
| Agar de harina de maíz | Medios de cultivo de uso general para el cultivo de hongos del medio ambiente, comúnmente utilizados en la investigación de la calidad del aire interior. Stachybotrys chartarum contaminación. |
| DG18 (Agar diclorán-glicerol 18) | Medio de cultivo que contiene glicerol 18%, utilizado para la recuperación de levaduras y mohos xerófilos. Recomendado para la recuperación en lugares secos, como áreas de almacenamiento de polvo seco y de fabricación. |
| Agar de semillas de pájaro | Para el aislamiento de Cryptococcus neoformans. |
| Agar micobiótico | Para el aislamiento de Histoplasma capsulatum |
Medios de cultivo bacteriano
| TSA (agar tripticasa de soja) | Medios de cultivo de uso general para el aislamiento y cultivo de bacterias (grampositivas y gramnegativas). |
| TSA con sangre 5% | Medios de cultivo de uso general para el cultivo, aislamiento y determinación de la actividad hemolítica de las bacterias. |
| MAC (MacConkey) | Para procedimientos cuantitativos para el aislamiento de bacterias gramnegativas y para la diferenciación de esos microorganismos en función de la fermentación de la lactosa. |
| Agar HE (Hekton Enteric) | Para el aislamiento y la diferenciación de microorganismos entéricos gramnegativos. |
| Agar BCYE (agar de levadura con carbón activado tamponado) | Para el aislamiento, selección y diferenciación de Legionella Muestras ambientales de forma esp. |
| MSA (agar sal manitol) | Para el aislamiento selectivo y la diferenciación de Estafilococo esp. |
| EMB (Azul de metileno eosina) | Para el aislamiento y diferenciación de bacterias gramnegativas. |
| BE (Agar bilis-esculina) | Para el aislamiento e identificación del Grupo D Estreptococo esp. |
| Agar xilosa lisina desoxicolato (agar XLD) | Para el aislamiento y diferenciación de Salmonela esp. |
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