GUIA DE AMOSTRAGEM EM MICROBIOLOGIA
ÍNDICE
- Air-O-Cell
- MoldSnap e MICRO-5
- Amostragem de ar cultivável (fungos ou bactérias)
- Amostragem de superfície cultivável (esfregaços e amostras a granel)
- Amostragem para proprietários de imóveis da ERMI
- Amostragem de PCR em tempo real
- Amostragem de Alérgenos
- Amostragem de coliformes totais
- Contaminação por esgoto em edifícios
- Amostragem de Legionella
- Amostragem de Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA)
- Amostragem de endotoxinas ambientais
- Condições limitantes para o crescimento de patógenos
- Informações sobre meios de cultura microbiológica
AIR-O-CELLTM
A cassete de amostragem de ar Air-O-Cell™ é um dispositivo projetado para a coleta e análise rápidas de uma ampla gama de partículas em suspensão no ar. Estas incluem esporos de fungos, pólen, partes de insetos, fragmentos de células da pele, fibras e partículas inorgânicas. O ar entra na cassete, as partículas são impactadas no substrato adesivo e o ar sai pelo orifício de saída. O fluxo de ar e o invólucro patenteado da cassete são projetados de forma que as partículas sejam distribuídas e depositadas uniformemente, formando um "traço", em uma lâmina de vidro especial com adesivo contido no invólucro da cassete.
Benefícios
- Útil para testes iniciais no local, especialmente se o crescimento de fungos não for visível.
- Procedimento rápido e simples.
- Prazos de entrega rápidos disponíveis.
- Baixa probabilidade de contaminação da amostra.
Desvantagens
- Este método não permite a identificação completa das espécies de fungos. Por exemplo, Aspergillus sp. e Penicillium sp. são normalmente relatados juntos devido às semelhanças na morfologia dos esporos.
- Não é possível avaliar a viabilidade dos esporos.
Materiais
- Cassete Air-O-CellTM.
- Bomba de vácuo adequada para operar a 15 litros por minuto (lpm).
- Rotâmetro (para calibração de bomba de vácuo).
- Tubo flexível.
Procedimento de amostragem recomendado
O cassete foi projetado para operar com uma vazão recomendada de 15 lpm. Vazões menores podem resultar na perda de alguns esporos e no acúmulo não uniforme de outros. Vazões maiores podem danificar os esporos. Portanto, é importante não operar as bombas de amostragem com vazões menores por períodos prolongados para atingir o volume de ar recomendado.
Calibração da taxa de fluxo de amostragem
Um tubo de bolhas especialmente projetado, disponível junto ao fabricante, pode ser usado para ajustar a vazão da mini bomba Air-O-Cell de ½”. Ele não pode ser usado com nenhum outro tipo de bomba, mini bomba ou bomba de amostragem.
Duração da amostragem
O tempo de amostragem depende da densidade de partículas no ambiente. É importante não sobrecarregar a amostra, caso contrário será impossível quantificar os tipos de esporos, pólen e partículas presentes. A tabela a seguir representa os tempos de amostragem típicos para se obter um traço bem definido com boa dispersão dos esporos:
Intervalos de amostragem recomendados para o cassete de amostragem de ar Air-O-Cell™ em taxas de fluxo de coleta típicas.
| Condições ambientais típicas, vazão de coleta de 15 lpm. | |
| Escritório limpo ou área externa (sem poeira visível) | 10 minutos |
| Ambiente interno, alta atividade e pessoal | 5 minutos |
| Ambiente interno, reforma de drywall ou poeira industrial pesada | 1 minuto |
AMOSTRAGEM DE AR PARA CONTAGEM TOTAL DE ESPOROS
Procedimento de amostragem
- Antes de coletar as amostras, calibre a bomba para 15 litros por minuto.
- Remova e guarde as fitas de vedação que cobrem a entrada e a saída do Air-O-Cell™.
- Conecte a saída (orifício redondo) ao adaptador de tubulação fornecido (disponível mediante solicitação) ou use tubulação de PVC padrão de ½” (para uso somente com bombas de alto volume).
- Inicie a bomba de amostragem e colete amostras durante um período de tempo apropriado (consulte o gráfico acima).
- Remova o Air-O-Cell™ do tubo e feche-o novamente com a fita adesiva original. Identifique a amostra.
- Preencha uma Cadeia de Custódia EMSL (COC), disponível no site (www.emsl.com), detalhando o nome e informações do cliente, nome ou número do projeto, amostra #, descrição da área e volume de ar utilizado.
- Para minimizar danos durante o transporte, recomenda-se que o Air-O-Cell™ seja acondicionado em uma caixa de papelão ondulado para garantir sua chegada segura ao laboratório.
Sugestões de Controle de Qualidade
- Uma interpretação eficaz baseia-se na comparação de amostras internas e externas. A comparação de amostras externas ajudará a demonstrar se a amplificação de esporos está ocorrendo em ambientes internos.
- Obtenha uma amostra de controle de uma área sem reclamações para comparação.
- Enviar periodicamente uma fita cassete em branco para análise é uma boa prática.
- A taxa de fluxo é crucial para resultados precisos. Lembre-se de calibrar e recalibrar a bomba antes de cada amostragem (15 litros/minuto).
- Nunca utilize fitas cassete danificadas ou vencidas.
Para obter mais informações, entre em contato com:
Zefon Internacional em www.zefon.com. Air-O-CellTM é uma marca registrada da Zefon International
MOLDSNAP E MICRO-5
Os modelos Zefon MoldSnap (ID do produto 8715304) e Micro5 MicroCell (ID do produto 8715306) foram projetados para operar com uma vazão de 5 litros por minuto, visando a máxima eficiência de coleta. Os cassetes devem ser armazenados entre 10°C e 27°C.
Não utilize em temperaturas abaixo de 37° F!
Procedimentos de amostragem
- Remova o pino da parte inferior do MoldSnap ou Micro5.
- Se estiver usando uma bomba convencional de alto volume: Basta conectar uma extremidade do tubo (1,5 metro ou menos) à parte inferior do cassete.
- Se estiver usando uma bomba de baixo volume, como a GilAir5: Basta conectar um pedaço de tubo de 1 polegada na parte inferior do cassete.
- Conecte a outra extremidade da tubulação a uma bomba pré-calibrada para uma vazão de 5 LPM.
- Retire a tampa da parte superior da cassete.
- Ligue a bomba e colete uma amostra durante um período de tempo adequado, dependendo do ambiente. (Consulte "Duração da Amostragem" abaixo.)
- Após a conclusão da amostragem, recoloque o pino e a tampa na parte inferior e superior da cassete.
Duração da amostragem
- Limpeza de ambientes internos e externos = 8 a 10 minutos
- Ambiente interno (atividade normal) = 5 minutos
- Ambientes internos (partículas pesadas) = 1 a 3 minutos
- Cavidade da parede interna usando apenas o Micro5 (com o adaptador de parede interna opcional, ID do produto 8715901) = 1 a 2 minutos
Dica técnica: Limpeza básica de mofo
A chave para o controle do mofo é o controle da umidade. É importante secar áreas e objetos danificados pela água dentro de 24 a 48 horas para evitar o crescimento de mofo. Se o mofo for um problema em sua casa, limpe-o e elimine o excesso de água ou umidade. Conserte vazamentos de encanamento ou outras fontes de água. Lave o mofo de superfícies duras com detergente e água e seque completamente. Materiais absorventes (como placas de teto e carpetes) que mofarem podem precisar ser substituídos. (Fonte: EPA) http://www.epa.gov/mold/moldresources.html)
AMOSTRAGEM DE AR CULTURAL (FUNGOS OU BACTÉRIAS)
Impactadores de partículas (amostradores do tipo Andersen)
Este método de amostragem de ar envolve a aspiração de um volume medido de ar sobre meios de cultura em placas de Petri. As placas de Petri são incubadas em laboratório para que os microrganismos impactados na placa possam crescer. Os fungos ou bactérias são contados e identificados. Este método geralmente utiliza um impactor do tipo Andersen N-6 (por exemplo, o Amostrador Microbiano EMSL VP-400, ID do produto 8709001). Diferentes placas de ágar estão disponíveis na EMSL Analytical, Inc., dependendo dos tipos de fungos ou bactérias a serem identificados.
Benefícios
- Culturas de fungos podem determinar se o fungo é viável (vivo) e permitem a identificação do gênero e da espécie.
- As culturas bacterianas permitem a enumeração e identificação de bactérias cultiváveis presentes no ar.
Desvantagens
- As culturas levam de 6 a 10 dias para crescer e identificar os microrganismos.
- Como a maioria das amostras ambientais contém um grande número de organismos, cada um precisa competir com os outros para crescer no meio de cultura. Consequentemente, fungos e bactérias presentes no ar podem não estar tão bem representados na cultura.
- Alguns microrganismos não crescem bem ou não crescem de todo nos meios de cultura.
- Alguns microrganismos não podem ser identificados, pois não produzem características essenciais, como esporos, ou podem não estar descritos na literatura científica.
Recomendações gerais para meios de cultura de fungos e bactérias
- Para amostragem de fungos, em geral, recomendamos o ágar extrato de malte (MEA).
- Se você estiver coletando amostras em áreas secas, o uso do meio DG18 ajudará a selecionar o crescimento de fungos que preferem ambientes secos e que podem não crescer em ágar MEA.
- A amostragem para Stachybotrys sp. pode ser realizada com ágar de celulose (CA) ou ágar de farinha de milho (CMA).
- Para amostragem bacteriana, em geral, recomendamos o Ágar Triptona de Soja (TSA) ou o TSA com sangue 5%.
- Para amostragem de bactérias Gram-negativas, recomendamos o ágar MacConkey (MAC).
- Para todas as outras situações, o Departamento de Microbiologia terá prazer em fazer recomendações com base na sua situação específica de amostragem.
- Os materiais para amostragem podem ser encomendados em www.emsl.com ou ligando para o Serviço de Atendimento ao Cliente: 800-220-3675.
Como manusear meios de cultura microbiológicos (placas de ágar)
- As placas de ágar devem ser mantidas refrigeradas ou em embalagens com gelo até o momento do uso.
- As placas devem ser deixadas aquecer até à temperatura ambiente antes de se retirar uma amostra (aproximadamente 15 minutos).
- Não remova a tampa da placa em nenhum momento, exceto durante a amostragem.
- Após a coleta da amostra, vede a tampa da placa com Parafilm ou fita adesiva.
- As placas devem ser enviadas de volta para o EMSL com gelo seco por entrega expressa com prioridade. Congele novamente e reutilize o gelo seco original (este tipo de gelo seco mantém a estabilidade por 24 horas).
- É necessário enviar material de embalagem adequado para proteger as placas.
- As placas não devem entrar em contato direto com a bolsa de gelo, pois o meio de cultura pode congelar, invalidando os testes.
- Caso haja algum atraso no envio das placas de ágar para a EMSL, elas devem ser refrigeradas até estarem prontas para entrega durante a noite.
Recomendações
- Use luvas de látex ou nitrilo durante a coleta de amostras.
- Utilize álcool isopropílico 70% para desinfetar o dispositivo de amostragem entre cada amostra.
- Coloque a tampa da placa de Petri em um saco limpo durante a coleta de amostras para reduzir qualquer contaminação cruzada.
- Inclua amostras externas e uma amostra em branco para controle.
Procedimento de amostragem
- Deixe as placas de ágar atingirem a temperatura ambiente antes de usar.
- Conecte uma extremidade do tubo à entrada da bomba de vácuo e a outra extremidade à entrada do amostrador.
- Calibre a vazão da bomba de vácuo:
- Coloque uma placa de Petri sem tampa no amostrador (Não envie esta placa como amostra, descarte-a após a calibração).
- Ligue a bomba e ajuste o fluxo até que o rotâmetro indique 28,3 LPM (a vazão é lida no centro do rolamento do rotâmetro).
- Remova a rolha e o rotâmetro antes de coletar a amostra.
- Limpe todas as superfícies expostas do amostrador com um algodão embebido em álcool isopropílico 70% e deixe secar ao ar.
- Coloque a placa de ágar na base do amostrador de forma que a placa de Petri fique apoiada nos três pinos de metal salientes.
- Remova a tampa da placa de Petri e coloque-a em um saco de amostra limpo para minimizar a contaminação (disponível mediante solicitação).
- Monte o estágio de classificação de jatos no amostrador e fixe o cone de entrada com os três clipes incluídos.
- Ajuste o temporizador para o tempo apropriado, dependendo das condições ambientais (o tempo de amostragem geralmente varia entre 2 e 5 minutos).
- Ligue a bomba e inicie o temporizador simultaneamente.
- Quando o tempo acabar, desligue a bomba, desmonte o amostrador e recoloque a tampa na placa de ágar.
- Prenda a tampa na placa de Petri com fita adesiva ou Parafilm (evite usar fita isolante, fita de embalagem, fita transparente ou fita adesiva para proteção).
- Escreva o número da amostra no fundo da placa de Petri.
- Registre todas as informações relevantes na Cadeia de Custódia.
- Devolva as amostras com gelo seco à EMSL Analytical para análise.
Kit básico EMSL VP-400 com
Pacote com 25 bombas E-Lite
#8709003
Dica técnica: O mofo pode causar problemas de saúde?
O mofo geralmente não representa um problema em ambientes internos, a menos que os esporos se depositem em um local úmido ou molhado e comecem a se proliferar. O mofo tem o potencial de causar problemas de saúde. Ele produz alérgenos (substâncias que podem causar reações alérgicas), irritantes e, em alguns casos, substâncias potencialmente tóxicas (micotoxinas). Inalar ou tocar mofo ou seus esporos pode causar reações alérgicas em pessoas sensíveis. As reações alérgicas incluem sintomas semelhantes aos da rinite alérgica, como espirros, coriza, olhos vermelhos e erupções cutâneas (dermatite). Reações alérgicas ao mofo são comuns e podem ser imediatas ou tardias. O mofo também pode causar crises de asma em pessoas asmáticas alérgicas a ele. Além disso, a exposição ao mofo pode irritar os olhos, a pele, o nariz, a garganta e os pulmões, tanto de pessoas alérgicas quanto de não alérgicas. Sintomas que não sejam de natureza alérgica ou irritante não são comumente relatados como resultado da inalação de mofo. A pesquisa sobre mofo e seus efeitos na saúde está em andamento. Este folheto fornece uma breve visão geral; ele não descreve todos os potenciais efeitos na saúde relacionados à exposição ao mofo. Para obter informações mais detalhadas, consulte um profissional de saúde. Você também pode consultar o departamento de saúde estadual ou local. (Fonte: Documento EPA # 402-K-02-003)
AMOSTRAGEM DE SUPERFÍCIE CULTURAL
AMOSTRAGEM COM ESFREGÃO CULTURAL
Benefícios
- O cotonete para cultura é barato e as superfícies podem ser amostradas rapidamente.
- Um teste útil para amostragem inicial do local.
- Possível identificação ao nível da espécie.
- A viabilidade dos fungos é determinada.
Desvantagens
- As áreas de crescimento fúngico costumam ser pequenas e dispersas, portanto, nem todas podem ser detectadas. Coletar várias amostras ajudará a contornar esse problema.
- Os problemas de saúde relacionados ao crescimento microbiano em ambientes internos são geralmente causados pela inalação de um número substancial de esporos presentes no ar, às vezes por um longo período. A presença de materiais biológicos em uma determinada superfície pode não ser uma indicação direta do que está presente no ar.
- Este método detecta apenas esporos e hifas viáveis, mas não consegue detectar fungos não viáveis ou de difícil cultivo. É aconselhável combinar a análise direta das amostras com métodos de cultura caso a detecção de fungos não viáveis seja importante para o seu projeto.
- As culturas não conseguem distinguir entre esporos, hifas e outras células fúngicas; os resultados são relatados como unidades formadoras de colônias.
Materiais
- Kit de cultura/esfregaço estéril com solução tampão apropriada para coleta e transporte da amostra (fornecido pela EMSL mediante solicitação).
- Luvas de látex/nitrilo
Coleção de amostras
- Usando luvas, retire o cotonete da embalagem.
- Remova a rolha do tubo de mídia.
- Limpe cuidadosamente a área desejada com um cotonete, passando-o levemente para frente e para trás sobre a área a ser amostrada.
- Insira o cotonete no tubo, feche bem a tampa e identifique-o adequadamente.
- Para relatórios de cultura quantitativa, a área da qual foi coletada a amostra precisa ser registrada na cadeia de custódia.
Preencha uma Cadeia de Custódia EMSL (COC), disponível em nosso site (www.emsl.com), detalhando o nome e as informações do cliente, o nome ou número do projeto, a amostra # e uma descrição da área.
Envio de amostras
- Coloque as amostras em uma caixa térmica com bolsas de gelo reutilizáveis.
- Envio noturno recomendado
AMOSTRAGEM A GRANEL CULTURAL
Benefícios
- A amostragem em massa é barata e permite a coleta rápida de amostras de materiais de superfície.
- Um teste útil para a investigação inicial do local.
- Possível identificação ao nível da espécie.
- A viabilidade dos fungos é determinada.
Desvantagens
- As áreas de crescimento fúngico são frequentemente pequenas e dispersas, portanto, podem não ser todas detectadas na amostra total. Serão necessárias múltiplas amostras para ajudar a contornar esse problema.
- Os problemas de saúde relacionados ao crescimento microbiano em ambientes internos são geralmente causados pela inalação de um número substancial de esporos presentes no ar, às vezes por um longo período. A presença de materiais biológicos em uma determinada superfície pode não ser uma indicação direta do que está presente no ar.
- Este método detecta apenas esporos e hifas viáveis, mas não consegue detectar fungos não viáveis ou de difícil cultivo. É aconselhável combinar a análise direta das amostras com métodos de cultura caso a detecção de fungos não viáveis seja importante para o seu projeto.
- As culturas não conseguem distinguir entre esporos, hifas e outras células fúngicas; os resultados são relatados como unidades formadoras de colônias.
Materiais
- Sacos estéreis para coleta e transporte de amostras (fornecidos pela EMSL mediante solicitação).
- Luvas de látex/nitrilo
Coleção de amostras
- Usando luvas e ferramentas limpas, remova uma área representativa da vegetação juntamente com o material de construção (gesso acartonado, madeira, etc.). Uma área de 2,5 cm x 2,5 cm é suficiente.
- Coloque o material a granel em um saco de amostragem e identifique a parte externa do saco com o local ou descrição da amostragem.
Preencha uma Cadeia de Custódia EMSL (COC), disponível em nosso site (www.emsl.com), detalhando o nome e informações do cliente, nome ou número do projeto, número da amostra e uma descrição da área.
Envio de amostras
- Coloque as amostras em uma caixa térmica com bolsas de gelo reutilizáveis.
- Envio noturno recomendado
AMOSTRAGEM PARA PROPRIETÁRIOS DE IMÓVEIS DA ERMI
Passo 1
Prepare sua casa para os testes.
Maximize as condições de tranquilidade em casa no dia anterior ao teste e durante o período de teste. Desligue ventiladores portáteis e o aquecimento ou ar condicionado para evitar que o ar seja direcionado para as áreas a serem testadas. Mantenha as pessoas afastadas das áreas a serem testadas. O objetivo é evitar que a poeira depositada se espalhe pelo ar pouco antes ou durante o teste.
Passo 2
Equipamento necessário
- 1 fita métrica
- 1 aspirador de pó com acessório de mangueira
- 1 cabo de extensão
- 1 rolo de fita adesiva para dutos, tinta ou fita crepe.
- Cronômetro ou temporizador de cozinha com incrementos de 5 minutos
- 1 kit de aspiração de pó (adquirido da EMSL Analytical, Inc.)
Prepare as áreas de teste
Para amostragem residencial, os pesquisadores da EPA recomendam coletar amostras compostas da sala de estar e do quarto, utilizando o mesmo aspirador de pó para ambos os cômodos. Outras áreas devem ser amostradas separadamente.
- Na área comum de convivência (sala de estar ou sala de família), selecione o sofá. Na ausência de um sofá, selecione outra cadeira de uso comum. Usando a fita métrica e o rolo de fita adesiva, marque os cantos de uma área retangular de amostragem de 90 cm x 180 cm (3 pés x 6 pés) ao longo do lado mais comprido do sofá. Se a área não comportar a área de amostragem recomendada, ajuste as dimensões de acordo (mas tente amostrar um total de 1,7 m²/18 pés quadrados). Registre a área de amostragem final que você marcou com a fita adesiva nas linhas correspondentes ao cômodo amostrado na folha de dados.
- Para o quarto, selecione o quarto mais frequentemente utilizado. Se houver mais de uma cama no quarto, selecione a cama mais utilizada. Usando a fita métrica e o rolo de fita adesiva, marque os cantos de uma área de amostragem retangular de 90 cm x 180 cm no chão, imediatamente ao lado da cama onde o residente tem maior probabilidade de entrar e sair da cama. Se possível, tente estender a área de amostragem retangular sob a cama em 7 a 10 cm, para que parte da amostra fique sob a cama. Se a área não comportar a área de amostragem recomendada, ajuste as dimensões de acordo (mas tente amostrar um total de 1,7 m²). Registre a área de amostragem final que você marcou com fita adesiva nas linhas ao lado do quarto que você amostrou na folha de dados.
- É possível coletar amostras em áreas que não sejam a sala de estar, sala de família ou quartos. Caso opte por coletar amostras em outras áreas, utilize um aspirador de pó separado para cada uma delas. Em caso de dúvidas, entre em contato com o laboratório.
- Para se familiarizar com os procedimentos, leia o Passo 3 abaixo antes de iniciar o teste.
Etapa 3
Fazer o teste
- Certifique-se de que o bocal da mangueira esteja conectado corretamente ao seu aspirador de pó. Ligue o aspirador para verificar se o bocal da mangueira está puxando ar e, em seguida, desligue-o.
- Às vezes, o dispositivo de coleta de pó não se encaixa corretamente na conexão da mangueira. Nesse caso, você pode usar fita adesiva ou fita isolante para fixar o coletor de pó à conexão da mangueira.
- Utilize a extensão elétrica conforme necessário para alcançar a área marcada com a mangueira do aspirador de pó.
- Remova ambas as tampas do dispositivo de amostragem. Coloque as tampas em um local onde você possa encontrá-las após a conclusão do teste.
- Conecte a extremidade plana e arredondada do dispositivo de amostragem à extremidade da mangueira de encaixe do seu aspirador de pó.
- Utilize a extremidade inclinada do dispositivo de amostragem para coletar a amostra. Mantenha a extremidade inclinada do dispositivo de amostragem alinhada com a superfície a ser amostrada.
- Ligue o aspirador de pó e inicie o cronômetro. Comece a cronometrar o procedimento de aspiração usando o cronômetro. Tente não perturbar a fita. Tente não exceder o período de amostragem de 5 minutos.
- Aspire a área delimitada com fita adesiva. Para isso, passe o dispositivo de amostragem sobre linhas paralelas imaginárias, ligeiramente sobrepostas, dentro da área de amostragem, durante cerca de 5 minutos. Se necessário, ajuste a velocidade de movimento para que um total de 5 minutos seja utilizado para aspirar toda a área de amostragem de 1,7 m² (18 pés quadrados).
- Vá para o segundo cômodo e repita a aspiração da área desejada. Após a coleta da amostra, segure o dispositivo de coleta em direção ao teto e desligue o aspirador de pó. Recoloque a tampa na extremidade inclinada do dispositivo de coleta para não perder a poeira coletada.
- Evite aspirar quaisquer detritos grandes que não sejam poeira. Se você aspirar a fita adesiva acidentalmente, aponte o dispositivo de amostragem para o teto e desligue o aspirador. Retire a fita adesiva do dispositivo de amostragem. Ligue o aspirador novamente e retome a aspiração da área de amostragem. Certifique-se de levar em conta qualquer tempo de amostragem perdido ao fazer isso, para que você tenha um total de 5 minutos de tempo de amostragem.
- Separe o dispositivo de amostragem da mangueira do aspirador de pó e recoloque a tampa na extremidade plana do dispositivo.
- Após fixar as pequenas tampas no dispositivo de amostragem de poeira, certifique-se de que haja poeira no recipiente de coleta antes de enviá-lo ao laboratório. Caso não seja detectada poeira visível, repita o procedimento de amostragem em ambos os cômodos, em locais diferentes, até que haja poeira visível no dispositivo.
- Caso perca as tampinhas, vede as aberturas completamente e com segurança usando fita isolante ou fita adesiva.
Passo 4
Preencha a documentação.
- Na folha de dados, preencha o número do dispositivo de amostragem onde for necessário (encontrado abaixo do código de barras na lateral da caixa).
- Na folha de dados, identifique todas as áreas amostradas utilizando aquele número de dispositivo de amostragem específico.
- Preencha todas as informações completamente, levando em consideração qualquer ajuste na área de amostragem de 18 pés quadrados.
- Coloque o dispositivo de amostragem com a respectiva folha de dados de volta na caixa.
- Feche a caixa com fita adesiva para evitar que ela se abra durante o transporte.
Etapa 5
Devolva o dispositivo de amostragem
- Envie a caixa de volta para a EMSL. É essencial que apenas laboratórios licenciados pela EPA para usar essa tecnologia patenteada realizem essa análise. A EMSL atualmente possui essa licença da EPA.
- Os resultados estarão prontos em 5 dias úteis.
- Resultados expressos estão disponíveis mediante o pagamento de uma taxa adicional.
Um relatório escrito comparando sua casa com a ERMI Será enviado para o endereço postal indicado na ficha técnica.
Passo 6
E agora?
Se os resultados indicarem um possível problema de mofo em sua casa, recomendamos que você contrate uma empresa qualificada para identificar a origem do problema. Você pode consultar as páginas amarelas na seção de consultores ambientais. Verifique também os seguintes sites para encontrar uma lista de profissionais qualificados em qualidade do ar interno na sua região:
Guarde esta seção para seus registros.
O kit de teste de mofo da EMSL destina-se ao uso exclusivo conforme descrito nas instruções inclusas. Estas instruções são aplicáveis ao uso residencial. Para aplicações não residenciais, entre em contato com a EMSL para obter os protocolos de amostragem adequados. A EMSL não se responsabiliza por erros do usuário na coleta das amostras. A EMSL não se responsabiliza por quaisquer danos aos equipamentos utilizados na coleta destas amostras. Este kit não se destina a substituir uma inspeção visual e completa do local amostrado. Em nenhuma hipótese a EMSL será responsabilizada por danos diretos, especiais, consequenciais ou incidentais, independentemente de negligência (seja exclusiva ou concorrente) da EMSL e de a EMSL ter sido informada ou não da possibilidade de tais danos, decorrentes ou relacionados aos serviços da EMSL aqui descritos ou à entrega, uso, confiança ou interpretação dos resultados dos testes pelo cliente ou por terceiros. A EMSL não assume qualquer responsabilidade legal pelos fins para os quais o cliente utilize os resultados dos testes. Em hipótese alguma a responsabilidade da EMSL perante um cliente ou qualquer terceiro, seja com base em teorias de responsabilidade civil, contratual ou qualquer outra teoria jurídica ou equitativa, excederá o preço de compra.
AMOSTRAGEM DE PCR
Amostragem de ar por PCR
(As fitas cassete Air estão disponíveis na EMSL, códigos de produto 8715309 e 8715251)
- Obtenha a cassete de amostragem de ar para PCR da EMSL.
- Remova os plugues superior (azul) e inferior (vermelho) da fita cassete.
- Conecte uma bomba de vácuo ao cassete através da abertura inferior.
- Ajuste a vazão da bomba para 10 litros por minuto – 13 litros por minuto.
- A quantidade de ar desejada pode ser injetada pela abertura superior. Não há limite máximo para o tempo de amostragem; no entanto, coletar 1000 litros de ar é suficiente para a maioria dos testes de PCR.
- Coloque cada cassete de ar em um recipiente hermético individual, como um saco plástico tipo Ziploc.
- Identifique claramente o saco plástico com o código de identificação da amostra.
- Preencha o Formulário de Cadeia de Custódia do EMSL especificando o número da amostra, o volume de ar coletado, o local da coleta, a hora e a data.
- Enviar cassete para EMSL.
Amostragem em massa por PCR
(Potes de vidro de 2 oz e 4 oz estão disponíveis na EMSL, códigos de produto 8714223 e 8714232)
- Obtenha sacos plásticos ou frascos de vidro na EMSL.
- Localize a porção representativa do material a granel.
- Recolha pequenas quantidades de material com uma colher, espátula ou qualquer outra ferramenta.
- Coloque a amostra em um recipiente limpo e hermético, como um saco plástico tipo Ziploc ou um pequeno frasco de vidro. Feche bem.
- Limpe qualquer resíduo de material na parte externa do recipiente. Se necessário, desinfete com lenços umedecidos com álcool.
- Identifique claramente o recipiente com a amostra.
- Preencha a Cadeia de Custódia do EMSL especificando o número da amostra, o local de coleta, a hora e a data.
- Enviar amostra em grande quantidade para a EMSL.
Amostragem por zaragatoa para PCR
(O cotonete Butterfields de 1 ml está disponível na EMSL, código do produto 8708935)
- Obtenha um cotonete no EMSL para coletar a amostra.
- Usando luvas, retire o cotonete do tubo de transporte.
- Limpe cuidadosamente a área desejada com um cotonete, passando-o levemente para frente e para trás sobre a área de amostragem. Uma área de amostragem de 10 cm x 10 cm é adequada para a maioria dos testes de PCR.
- Insira o cotonete no tubo com o meio de transporte e feche bem a tampa.
- Identifique claramente o tubo de transporte com a identificação da amostra.
- Preencha a Cadeia de Custódia do EMSL especificando o número da amostra, a área de amostragem, o local de coleta, a hora e a data.
- Enviar amostra para EMSL.
Amostragem de poeira por PCR
(O coletor de amostras de poeira e alérgenos está disponível na EMSL, código do produto 8715600)
- Obtenha o coletor de amostras de poeira e alérgenos da EMSL.
- Remova as tampas de plástico brancas de ambas as extremidades do coletor de amostras de poeira e alérgenos.
- Conecte o coletor de amostras de poeira e alérgenos à mangueira ou tubo do aspirador de pó.
- Ligue o aspirador de pó e aspire a área necessária para obter material suficiente para o teste de PCR. Não há limite máximo para o tempo de amostragem, porém, para a maioria dos testes de PCR, é necessário coletar pelo menos 5 mg de poeira.
- Desconecte o coletor de amostras de poeira e alérgenos da mangueira ou tubo do aspirador de pó.
- Coloque tampas de plástico brancas em ambas as extremidades do coletor de amostras de poeira e alérgenos para proteger a amostra de poeira dentro do tubo interno de malha plástica.
- Insira cada amostrador de poeira e alérgenos em um recipiente individual hermético, como um saco plástico tipo Ziploc.
- Identifique claramente o saco plástico com o código de identificação da amostra.
- Preencha a Cadeia de Custódia do EMSL especificando o número da amostra, o local de coleta, a hora e a data.
- Envie o coletor de amostras de poeira e alérgenos para a EMSL.
Garrafas para teste de água
GRÁTIS para EMSL
Clientes ligam para
Detalhes
Amostragem de água por PCR
(Frascos plásticos estéreis com conservante de 120 ml, 250 ml e 1000 ml estão disponíveis na EMSL, com os códigos de produto 87M007, 87M005 e 87M001).
- Obtenha frascos de plástico estéreis com conservante da EMSL.
- Encha o recipiente com o volume de água especificado e feche-o bem para evitar vazamentos durante o transporte. Coletar entre 100 mililitros e 1 litro de água é suficiente para a maioria dos testes de PCR.
- Limpe qualquer resíduo de líquido na parte externa do recipiente. Desinfete com lenços umedecidos com álcool, se necessário.
- Identifique claramente a garrafa de plástico com a identificação da amostra.
- Preencha o Formulário de Cadeia de Custódia do EMSL especificando o número da amostra, o volume de água, o local de coleta, a hora e a data.
- Embale os frascos no recipiente térmico com bolsas de gelo para evitar o superaquecimento das amostras durante o transporte.
- Envie amostras de água para o EMSL com entrega expressa.
Amostragem de cultura bacteriana e fúngica por PCR
- Cepas bacterianas e fúngicas podem ser submetidas para identificação como culturas axênicas em placas de ágar.
- Colônias isoladas devem ser visíveis em uma placa para garantir a pureza da cultura e a precisão da identificação.
- Identifique claramente a placa de ágar com o código da amostra.
- Preencha a Cadeia de Custódia EMSL especificando o número da amostra.
- Embale a placa de ágar no recipiente isotérmico, garantindo a integridade da amostra durante o transporte.
- Enviar placa de ágar para EMSL.
AMOSTRAGEM DE ALERGÊNICOS
Procedimento para coleta de amostras de poeira com o coletor de poeira
- Identifique quatro (4) áreas separadas para amostragem. Cada área amostrada deve ter cerca de 1/4 de metro quadrado (aproximadamente 2,75 pés quadrados).
- Remova as tampas brancas de ambas as extremidades da fita coletora vermelha. Guarde-as para recolocá-las após a conclusão da amostragem.
- Conecte a extremidade não inclinada da cassete vermelha à mangueira/tubo do aspirador. (Recomenda-se um aspirador com filtro HEPA).
- Use a extremidade inclinada para coletar poeira por 30 segundos em cada uma das quatro (4) áreas. O tempo total de amostragem e a área coletada, por cassete vermelha, devem ser de 2 minutos e 1 metro quadrado, respectivamente.
- A quantidade mínima de poeira coletada dentro do coletor vermelho deve ser suficiente para atingir a metade da altura do filtro de malha.
- Após a coleta da amostra, recoloque as tampas brancas em ambas as extremidades da fita vermelha e coloque-a em um pequeno saco plástico com fecho hermético ou similar. Escreva no saco o número da sua amostra/nome e a localização. (ex.: Amostra 1, Quarto)
- Envie os filtros contendo a amostra de poeira para a EMSL Analytical, Inc. para análise de alérgenos utilizando o formulário de Cadeia de Custódia de Microbiologia da EMSL. Selecione o prazo de entrega desejado.
| Análises de alérgenos em ambientes internos disponíveis | |
|---|---|
| Código de teste | Descrição* |
| M034 Caspa de Gato | Caspa de gato (Fel d 1) |
| M035 Caspa de Cão | Caspa de cachorro (Lata f 1) |
| M036 Barata | Barata (Bla g 2) |
| M037 Ácaros da poeira | Ácaros da poeira (Der p 1 e Der f 1) |
| Rato M038 | Rato (Músculo m 1) |
| Rato M039 | Rato (Rato n 1) |
| Grupo M044 IA | Gato, cachorro, barata e ácaros |
| Grupo M254 IA | Rato e camundongo |
| * Todas as análises são realizadas pelo MARIA (Multiplex Array for Indoor Allergens). | |
| * Vários alérgenos podem ser analisados a partir de um único filtro com uma amostra de poeira. | |
Kit de amostras de tapetes disponível
Uso exclusivo do consultor.
Amostragem de carpetes EMSL
Kit de 25 mm
#8715314
Procedimento para coleta de amostras de ar para animais de laboratório
- Utilizando uma bomba de amostragem de baixo volume, colete amostras do ambiente de trabalho com um cassete de 37 mm com um filtro de fibra de vidro de 1,0 mícron ou um filtro MCE de 0,8 mícron.
- O tempo de coleta deve ser de 1,5 a 2,5 litros por minuto e o tempo de amostragem deve ser de quatro (4) a oito (8) horas. (Indicar o tempo em minutos para fins de rastreabilidade)
- Identifique cada cassete de amostra com o nome do local e a data/hora da coleta da amostra.
- Utilize o Formulário de Cadeia de Custódia de Microbiologia da EMSL e preencha-o com as informações de faturamento e relatórios solicitadas. Para cada amostra coletada, inclua o número da amostra, a localização, a matriz (ar), o código do teste (veja abaixo), o volume total coletado em minutos (ex.: 1,8 LPM x 240 minutos = 432 volume total da amostra) e a data/hora da coleta. Assine e envie para a EMSL Analytical, Inc. – unidade de Cinnaminson, NJ.
| Análises de alérgenos disponíveis | |
|---|---|
| Código de teste | Descrição* |
| Rato M038 | Rato (Músculo m 1) |
| Rato M039 | Rato (Rato n 1) |
| Grupo M254 IA | Rato e camundongo |
AMOSTRAGEM DE COLIFORMES TOTAIS
Cadeia de Custódia
Deve conter a data e hora da coleta da amostra, bem como a sua origem. Essas informações são necessárias para determinar se as amostras estão dentro do prazo de validade e se são adequadas para análise. Caso deseje a análise de coliformes totais, informe se prefere o resultado de Presença/Ausência (Colilert) ou Enumeração (Número Mais Provável - MPNM ou Técnica de Filtração por Membrana - MFT).
Coleção de amostras
Todas as amostras de água devem ser coletadas em recipientes estéreis aprovados, que nosso laboratório pode fornecer mediante solicitação. Amostras de água tratada (de sistemas municipais/de distribuição) devem ser decloradas com tiossulfato de sódio (este já está presente nos frascos fornecidos pelo nosso laboratório). Mantenha o frasco de coleta fechado até o momento de ser preenchido no local da coleta.
Amostra de distribuição ou torneira de pia
- Remova o arejador da torneira.
- Enxágue a torneira com uma solução de água sanitária.
- Para limpar a tubulação, abra a torneira completamente e deixe a água correr por dois a três minutos, ou por tempo suficiente para permitir a desobstrução da tubulação.
- Reduza o fluxo de água para permitir o enchimento da garrafa sem respingar.
- São necessários 100 mL para cada amostra submetida à análise.
Poços de amostras
Se a amostra for coletada de um poço com bomba manual, bombeie água para o descarte por cerca de cinco minutos antes de coletar a amostra. Se o poço estiver equipado com uma bomba mecânica, colete a amostra em uma torneira na saída. Se não houver bombeamento mecânico, colete a amostra diretamente do poço utilizando um frasco esterilizado com um peso na base; tome cuidado para evitar a contaminação da amostra por qualquer resíduo superficial.
Tempos de espera
O tempo de espera para amostras regulatórias é de 30 horas para o método de teste de Presença/Ausência e de 8 horas para o método de filtração por membrana. Para amostras não regulatórias, o tempo de espera é de 8 horas, independentemente do método de teste.
Caso o cliente esteja ciente de que os prazos de retenção serão excedidos, mas deseje que a análise prossiga mesmo assim, favor indicar isso na Cadeia de Custódia.
Se os tempos de espera forem excedidos, os resultados serão inválidos e isso será registrado no relatório final.
Prazos de entrega
Os resultados de presença/ausência de coliformes totais (Colilert) ou de enumeração (NMP) podem ser divulgados em 24 horas.
Os resultados da contagem total de coliformes (MFT) levarão de 6 a 10 dias.
Envio de amostras
Todas as amostras devem ser enviadas refrigeradas, não congeladas, e devem permanecer na posição vertical. O melhor método de envio para essas amostras é utilizar bolsas de gelo, e não garrafas de refrigerante cheias de água congelada, sacos de gelo ou gelo solto. Amostras que não forem enviadas corretamente podem acabar contaminadas ou serem rejeitadas.
CONTAMINAÇÃO DE ESGOTO EM EDIFÍCIOS
- Os métodos disponíveis para testar a contaminação por esgoto em edifícios incluem:
- M117 – um método baseado em cultura para detecção de coliformes totais, E. coli e enterococos (tempo de resposta de 48 horas).
- M013 – um método baseado em cultura para detecção de coliformes totais, coliformes fecais, E. coli e estreptococos fecais (tempo de resposta de 6 a 10 dias)
- M095 – um novo método baseado em PCR para detecção de Bacteroides totais (resultado disponível em 24 horas)
- Os métodos baseados em cultura têm a vantagem de procurar apenas contaminantes bacterianos vivos, que podem ser os únicos de interesse caso haja preocupação com doenças. Os testes de endotoxinas também podem ser úteis para medir a quantidade total de bactérias Gram-negativas no edifício (ver página 17).
- O teste para Bacteroides apresenta algumas vantagens em relação aos testes tradicionais baseados em cultura, incluindo:
- Bacteroides é específico para contaminação fecal de todas as fontes – animais, aves e humanos.
- Coliformes, E. coli, estreptococos fecais e enterococos podem se desenvolver na água, no solo, em sedimentos e na vegetação em ambientes não contaminados (E. coli é encontrada em ambientes tropicais intocados).
- Bacteroides não se multiplicará no ambiente.
- As bactérias do gênero Bacteroides superam os coliformes em uma proporção de 1.000:1 e as bactérias do gênero E. coli em uma proporção de 10.000:1; portanto, a probabilidade de encontrar Bacteroides é muito maior.
- Os testes tradicionais baseados em cultura dependem da presença de bactérias vivas. Essas bactérias geralmente não são viáveis em ambientes internos. Isso significa que um resultado negativo para coliformes ou E. coli não significa ausência de contaminação fecal. O novo teste para Bacteroides supera essas limitações de cultura. O laboratório pode detectar bactérias vivas, não viáveis ou viáveis, mas não cultiváveis.
Procedimento de amostragem para todos os testes de contaminação de esgoto
- Obtenha um cotonete estéril de 1 mL com solução de Butterfield (ID do produto EMSL 8708935) para coletar e transportar amostras (fornecido pela EMSL mediante sua solicitação).
- Usando luvas, retire o cotonete da embalagem estéril.
- Desenrosque cuidadosamente a tampa do dispositivo de amostragem – o cotonete está preso à tampa.
- Remova o excesso de solução do cotonete pressionando-o delicadamente contra a parede interna do tubo com um movimento de rolamento.
- Segure o cotonete em um ângulo aproximado de 30° em relação à superfície de amostragem, tomando cuidado para não contaminar nenhuma parte do cotonete ou o local da amostragem.
- Aplicando pressão firme e uniforme, mova o cotonete lenta e cuidadosamente sobre toda a área de amostragem de 10 x 10 cm (4” x 4”), umedecendo a ponta do cotonete com a Solução Neutralizante conforme necessário. Primeiro na horizontal e depois na vertical:
- Após a coleta da amostra, coloque cuidadosamente o cotonete de volta no frasco e feche bem a tampa.
- Identifique a amostra usando um marcador permanente.
- Devem ser coletadas amostras de fundo em áreas não contaminadas com fezes.
Envio de amostras
- As amostras destinadas à análise por cultura devem ser enviadas refrigeradas durante a noite, não congeladas, em até 24 horas após a coleta. O melhor método de envio para essas amostras é utilizar uma caixa térmica com gelo reutilizável, e não sacos de gelo ou gelo solto.
- Não há requisitos especiais de envio ou tempo de espera para Bacteroides, visto que essas bactérias não se multiplicam fora do intestino. No entanto, não armazene a amostra por mais de um mês antes da análise.
LEGIONELA AMOSTRAGEM
Legionellaceae são onipresentes em águas superficiais, subterrâneas e em ambientes estuarinos. A maioria dos surtos de doenças devido a Legionella São causadas pela névoa contaminada proveniente de torres de resfriamento e sistemas de distribuição de água potável. A exposição ocorre por meio da água contaminada em forma de aerossol.
Oferecemos quatro métodos diferentes baseados na cultura, dependendo do nível de informação que você precisa. Para mais informações sobre os diferentes testes, acesse [link para o site]. www.legionellatesting.com. Todos os testes de cultura requerem de 10 a 14 dias para serem concluídos.
Também oferecemos diversos métodos de PCR diferentes, dependendo das informações que você precisa. Mais informações sobre esses métodos podem ser encontradas em [link para o site]. www.legionellatesting.com. Embora o método de cultura seja considerado o "padrão ouro", a PCR é útil para descartar possíveis causas. Legionella Contaminação em projetos com prazos apertados. Os resultados do PCR podem ser solicitados no mesmo dia, em 24 horas ou em 48 horas, dependendo das suas necessidades.
Onde procurar
Esta é uma lista de sistemas de água que comprovadamente abrigam a bactéria Legionella e foram associados a surtos. A investigação desses sistemas deve ser incluída em qualquer programa de avaliação de risco de Legionella.
- Sistemas de água potável
- Torres de resfriamento
- Geração de aerossóis durante o tratamento biológico de alguns efluentes industriais. Por exemplo, nas indústrias de celulose e papel, alimentos e bebidas e produtos farmacêuticos.
- Geração de aerossóis durante o tratamento de água e esgoto municipais
- Água bruta, utilitária ou para combate a incêndios
- Fontes e lagos ornamentais para exterior e interior.
- Piscinas aquecidas
- Água CPAP
- Terra para vasos
- banheiras de hidromassagem
- Umidificadores
- fluidos para usinagem de metais
- Equipamentos de terapia médica, como unidades de diálise, sondas nasogástricas, equipamentos respiratórios e nebulizadores, banheiras de hidromassagem.
- Instalações comerciais de lavagem de carros, especialmente aquelas que utilizam água reciclada.
- Pulverizadores de vegetais de supermercado
- Máquinas de gelo em hotéis e hospitais
- Borrifadores de água para o corpo em estádios e parques de diversões*
*Não foi associado a nenhum caso de legionelose.
Considerações sobre amostragem
- As amostras de água devem ser coletadas em recipientes estéreis (disponíveis na EMSL).
- Recomenda-se uma amostra de 1 litro de água para águas potáveis (que contenham tiossulfato de sódio).
- Menos de 1 litro é aceitável se houver suspeita de níveis mais elevados de bactérias.
- A água clorada deve ser tratada com tiossulfato de sódio.
- Normalmente, 100 a 250 mL são suficientes para amostras de água não potável.
- Além de coletar amostras de água, é útil coletar uma amostra do biofilme encontrado nos canos de abastecimento de água.
- As amostras devem ser transportadas para o laboratório em até 24 horas, em caixas térmicas com gelo.
Locais de coleta de amostras de água potável - Coletar amostras semestralmente
- Ponto de entrada da rede de água da cidade
- Tanques de armazenamento
- Ponto de drenagem do aquecedor de água quente*
- Retorno de água quente
- Último ponto na água fria/Primeiro ponto na água quente
- Último ponto na água quente*/Primeiro ponto na água fria
- 10% de pontos de venda selecionados (água e cotonete)*
*Teste rotineiramente
Legionella Locais de coleta de amostras de rotina
- Testar todas as localizações para estabelecer uma linha de base.
- Testar todos os locais durante um surto
Envio de amostras
- Identifique o número da amostra na garrafa e registre-o na cadeia de custódia.
- Utilize um número distinto para cada amostra. Preencha todas as informações da amostra em uma ficha de dados para seus registros. Envie uma cópia junto com as amostras para o laboratório. Você pode baixar uma cópia do formulário de Cadeia de Custódia em nosso site. www.emsl.com.
- Feche bem as garrafas com a tampa. Certifique-se de que não haja vazamentos durante o transporte. Recomenda-se vedar a garrafa ao redor da tampa e do gargalo com fita isolante de vinil. Coloque as garrafas vedadas em um saco plástico limpo.
- Coloque as amostras em caixas isotérmicas ou sobre bolsas de gelo para protegê-las de flutuações extremas de temperatura durante os meses de verão. NUNCA UTILIZE GELO OU GELO SECO. Preencha a caixa com flocos de espuma para amortecer e selar a caixa com segurança para o envio. Envie as amostras por transportadora expressa com entrega no dia seguinte. Agende a coleta de amostras entre segunda e sexta-feira para que as amostras possam ser entregues ao laboratório até sábado.
Locais de amostragem da torre de resfriamento - Amostragem trimestral
- Maquiagem de torre
- Torre de coleta longe de maquiagem* (água e algodão)
- Entrada para o trocador de calor
- Saída do trocador de calor
- Pacote de Distribuição
- Kit Torre* (água e cotonete)
AMOSTRAGEM DE MRSA
A Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) é um tipo de bactéria resistente ao tratamento com antibióticos relacionados à penicilina. Essa bactéria geralmente se dissemina por contato direto com as mãos de um profissional de saúde ou de uma pessoa infectada ou portadora do microrganismo. Também existem infecções adquiridas na comunidade, que ocorrem fora do ambiente hospitalar, em locais como academias, escolas, creches, navios de cruzeiro e casas de repouso.
A EMSL Analytical, Inc. oferece análises de MRSA em amostras ambientais (cotonetes, amostras a granel ou água). Observe que não podemos aceitar amostras clínicas para análise.
Ao coletar amostras de itens contaminados, é necessário tomar precauções e usar luvas; coloque luvas limpas imediatamente antes da coleta. Remova as luvas imediatamente após o uso, antes de tocar em itens não contaminados e superfícies ambientais, e lave as mãos imediatamente para evitar a transferência de microrganismos para outros ambientes.
Procedimento de amostragem
Coleta de amostras por cotonete
- Obtenha um swab estéril de 1 mL com caldo neutralizante HiCap Pur-Blue (ID do produto 8708942) da EMSL para coletar amostras para cultura.
- Retire o cotonete da embalagem e esfregue-o cuidadosamente na área desejada, passando-o levemente para frente e para trás sobre a amostra. Recomenda-se uma área de 10 x 10 cm (4” x 4”). Insira o cotonete no tubo e feche bem a tampa. Envie os cotonetes para o EMSL.
Amostras a granel
- Usando luvas, retire um pequeno pedaço do material suspeito. Coloque o pedaço dentro de um recipiente limpo e estéril ou em um novo saco plástico (tipo Ziplock).
- Feche o saco ou tampe o recipiente e etiquete-o adequadamente.
Envio de amostras
- Todas as amostras devem ser enviadas refrigeradas, não congeladas, durante a noite, em até 24 horas após a coleta. O melhor método de envio para essas amostras é utilizar bolsas de gelo reutilizáveis, e não sacos de gelo ou gelo solto. Amostras que não forem enviadas corretamente podem ser contaminadas e rejeitadas pelo laboratório.
- A EMSL oferece dois métodos de teste de MRSA baseados em cultura (Código M729 para P/A) e (Código M730 para Quantitativo).
AMOSTRAGEM DE ENDOTOXINAS AMBIENTAIS
As endotoxinas são moléculas que possuem certos efeitos tóxicos característicos. Atualmente, são reconhecidas como uma classe de compostos encontrados na membrana externa de certas bactérias (“Gram-negativas”). Como essas bactérias Gram-negativas são amplamente distribuídas no meio ambiente, o mesmo ocorre com as endotoxinas. Altos níveis dessas substâncias foram relatados em diversos ambientes, como fábricas de algodão, agricultura ou estações de tratamento de efluentes, lavagem industrial, névoas de água e umidificadores de ambiente contaminados, onde se espera a presença de água e bactérias Gram-negativas. Os principais reservatórios são fluidos aquosos recirculados que produzem aerossóis.
Resumo dos Procedimentos
As amostras de ar são coletadas em filtros de membrana isentos de endotoxinas, armazenadas dessecadas sempre que possível ou a 4 °C. A análise de endotoxinas pode ser feita em amostras de ar, água, poeira ou em amostras a granel.
ATENÇÃO: Não existem valores limite aceitos, portanto, comparações relativas devem ser feitas entre a área suspeita e uma área não suspeita sob condições ambientais semelhantes. Como os níveis de endotoxina podem ser significativos no ar externo, este último pode não ser adequado para níveis de fundo, especialmente em ambientes conhecidos por apresentarem altos níveis de bactérias Gram-negativas (ver acima, 1º parágrafo). Todos os utensílios de amostragem devem ser certificados como livres de endotoxinas, e materiais de PVC e polipropileno não podem ser usados devido à sua afinidade e ligação com a endotoxina.
Materiais
Fluidos e amostras a granel:
- Recolha em recipientes isentos de endotoxinas (de preferência de vidro, ou então de poliestireno).
Equipamentos necessários para amostragem de ar:
- Bomba de baixo fluxo
- Rotâmetro
- Tubo flexível
- Cassetes de poliestireno isentas de endotoxinas com filtros de membrana de policarbonato de 0,2 µm e 37 mm de diâmetro e almofadas de suporte de fibra de vidro AP40. Esses produtos devem ser tratados especialmente para remover todas as endotoxinas; faça seu pedido na EMSL.
- Ao coletar amostras, devem ser utilizadas luvas cirúrgicas estéreis.
Procedimento de amostragem
Para amostragem de ar:
- Deve-se tomar precauções para evitar respirar, tocar ou expor de qualquer outra forma os recipientes de amostragem à contaminação humana.
- Para coleta de amostras em ambientes internos, certifique-se de que todas as portas e janelas estejam fechadas.
- Calibre a bomba para 1,5 litros/minuto.
- Usando luvas, conecte o cassete à bomba com a extremidade com a tampa vermelha voltada para a bomba. Colete amostras de ar durante 4 horas por amostra.
- Desconecte a cassete e recoloque a tampa protetora nas entradas e saídas. Embale toda a cassete na embalagem original e vede com fita adesiva.
Para fluidos e amostras em massa:
- Recolha a amostra num recipiente livre de endotoxinas. Normalmente, 15-50 mL são suficientes.
Para todas as matrizes:
- Etiqueta com informações de amostra.
- Preencha uma Cadeia de Custódia EMSL (COC), disponível no site (www.emsl.com), detalhando o nome e as informações do cliente, o nome ou número do projeto, a amostra # e uma descrição da área.
- Envie as amostras para a EMSL Analytical, Inc. o mais breve possível. As amostras de fluidos devem ser enviadas com gelo seco.
Sugestões de Controle de Qualidade
- É necessário coletar várias amostras em um local para comparar uma área possivelmente afetada com uma área não afetada.
- Os recipientes utilizados para os materiais de teste não devem estar rachados nem quebrados, e o material de embalagem deve estar intacto.
CONDIÇÕES LIMITANTES PARA O CRESCIMENTO DE PATÓGENOS
Orientações fornecidas pela EMSL Analytical, Inc.
| Patógenos | Mín. aw | Mín. pH | Máximo pH | Máximo Sal % | Mín. Temp. (°C) | Máximo Temp. | Oxigênio Exigência |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Campylobacter jejuni | 0.99 | 4.9-5.5 | 8.0 | 1.5-2.0 | 30-32 | 42-45 | Microaerofílico |
| Clostridium botulinum tipo A e proteolítico B e F | 0.93-0.96 | 4.7 | 9.0 | 10.0 | 10.0 | 48-50 | Anaeróbio |
| Clostridium botulismo tipo E, e B e F não proteolíticos | 0.93-0.96 | 4.7-4.8 | 9.0 | 4.5-6.0 | 3.0 | 45 | Anaeróbio |
| E. coli | 0.93-0.95 | 3.6-4.7 | 9.5 | 7.5-8.0 | 0.6-3.0 | 45 | Anaeróbio facultativo |
| Listeria monocytogenes | 0.92-0.95 | 4.8 | 9.6 | 8-12 | 0-2.0 | 45 | Anaeróbio facultativo |
| Salmonella spp. | 0.92 | 4.0 | 9.0 | 8.0 | 5.0 | 46-47 | Anaeróbio facultativo |
| Shigella spp. | 0.96 | 6.0 | 10.0 | 6.0 | 7.0 | 46 | Anaeróbio facultativo |
| Staphylococcus aureus | 0.85-0.86 | 4.0 | 10.0 | 18-20 | 5-6* | 45-45 | Anaeróbio facultativo |
| Vibrio cholerae | 0.95 | 3.6-6.0 | 9.6 | 6-8 | 8.0 | 42-46 | Anaeróbio facultativo |
| Vibrio parahemolítico | 0.94 | 4.8-5.0 | 9.6 | 8-10 | 5.0 | 43 | Anaeróbio facultativo |
| Vibrio vulnificus | 0.95 | 6.3 | 9.0 | 6.0 | 13.0 | 44 | Anaeróbio facultativo |
| Yersinia enterocolitica | 0.95-0.96 | 4.1-4.4 | 9.0 | 6-7 | -1.0-1 | 44 | Anaeróbio facultativo |
*A temperatura mínima para a formação de toxinas é de 10°C.
Microaerofílico: requer níveis limitados de oxigênio
Anaeróbio: requer a ausência de oxigênio
Anaeróbio facultativo: cresce com ou sem oxigênio.
INFORMAÇÕES SOBRE MEIOS DE CULTURA EM MICROBIOLOGIA
A EMSL Analytical, Inc. oferece uma ampla variedade de meios de amostragem aos seus clientes. As informações a seguir visam auxiliar na seleção do meio de cultura mais adequado para obter a amostra ambiental mais representativa possível. A lista de meios abaixo não é exaustiva; caso tenha requisitos específicos, entre em contato conosco.
Meios de cultura bacterianos
- TSA (Ágar de Soja Triptonado)
- TSA com sangue 5%
- MAC (MacConkey)
- Ágar HE (Hekton Entérico)
- Ágar BCYE (Ágar de Levedura com Carvão Ativado Tamponado)
- MSA (Ágar Sal Manitol)
- EMB (Azul de Eosina Metileno)
- BE (Ágar Esculina Biliar)
- Agar de chocolate
- BHI (Infusão Cerebral e Cardíaca)
- Ágar xilose lisina desoxicolato (ágar XLD)
Meios de cultura para fungos
- MEA (Ágar Extrato de Malte)
- PDA (Ágar dextrose de batata)
- Ágar de celulose
- SAB (Ágar Sabouraud Dextrose)
- Ágar de farinha de milho
- DG18 (Ágar Diclorano-Glicerol 18)
- Ágar de sementes para pássaros
- Ágar micobiótico
Recomendações gerais sobre meios de cultura para amostragem de ar de bactérias e fungos cultiváveis.
- Para amostragem de fungos, na maioria dos casos recomendamos o uso de MEA (microagulhamento em meio de cultura).
- Para identificação de espécies de fungos, utilize placas de MEA e DG18.
- Para amostragem bacteriana, na maioria dos casos recomendamos TSA ou TSA com sangue 5%.
- Ao coletar amostras especificamente para bactérias Gram-negativas, recomendamos o ágar MacConkey.
- O Departamento de Microbiologia terá prazer em fazer recomendações com base na sua situação específica de amostragem.
Meios de cultura fúngica
| MEA (Ágar Extrato de Malte) | Meios de cultura padrão ouro para a identificação de espécies de fungos. |
| PDA (Ágar dextrose de batata) | Meios de cultura de uso geral utilizados para o isolamento de fungos e bolores. |
| Ágar de celulose | Meios de cultura microbianos multiuso utilizados para isolar ou para isolar fungos hidrofílicos capazes de utilizar carboidratos complexos. São frequentemente recomendados em investigações de qualidade do ar interior. Estaquibotria contaminação sp. |
| Ágar de farinha de milho | Meios de cultura de uso geral para o cultivo de fungos do ambiente, comumente utilizados em investigações de qualidade do ar interior. Stachybotrys chartarum contaminação. |
| DG18 (Ágar Diclorano-Glicerol 18) | Meio contendo glicerol 18%, utilizado para a recuperação de leveduras e fungos xerofílicos. Recomendado para recuperação em locais secos, como áreas de armazenamento de pó seco e de produção. |
| Ágar de sementes para pássaros | Para o isolamento de Cryptococcus neoformans. |
| Ágar micobiótico | Para o isolamento de Histoplasma capsulatum |
Meios de cultura bacteriana
| TSA (Ágar de Soja Triptonado) | Meios de cultura de uso geral para isolamento e cultivo de bactérias (gram-positivas e gram-negativas). |
| TSA com sangue 5% | Meios de cultura de uso geral para o cultivo, isolamento e determinação da atividade hemolítica de bactérias. |
| MAC (MacConkey) | Para procedimentos quantitativos de isolamento de bactérias gram-negativas e para a diferenciação desses microrganismos com base na fermentação da lactose. |
| Ágar HE (Hekton Entérico) | Para o isolamento e diferenciação de microrganismos entéricos gram-negativos. |
| Ágar BCYE (Ágar de Levedura com Carvão Ativado Tamponado) | Para o isolamento, seleção e diferenciação de Legionella sp. forma amostras ambientais. |
| MSA (Ágar Sal Manitol) | Para o isolamento e diferenciação seletivos de Estafilococos sp. |
| EMB (Azul de Eosina Metileno) | Para o isolamento e diferenciação de bactérias gram-negativas. |
| BE (Ágar Esculina Biliar) | Para o isolamento e identificação do Grupo D Estreptococo sp. |
| Ágar xilose lisina desoxicolato (ágar XLD) | Para o isolamento e diferenciação de Salmonella sp. |
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