GUIDE D'ÉCHANTILLONNAGE MICROBIOLOGIE






TABLE DES MATIÈRES
- Air-O-Cell
- MoldSnap et MICRO-5
- Échantillonnage d'air cultivable (champignons ou bactéries)
- Échantillonnage de surfaces cultivables (écouvillons et en vrac)
- Échantillonnage pour propriétaires ERMI
- Échantillonnage PCR en temps réel
- Échantillonnage des allergènes
- Échantillonnage des coliformes totaux
- Contamination des bâtiments par les eaux usées
- Prélèvement d'échantillons de légionelles
- Échantillonnage du Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline (SARM)
- Échantillonnage des endotoxines environnementales
- Conditions limitant la croissance des pathogènes
- Informations sur les milieux de culture microbiologiques
AIR-O-CELLMC
La cassette de prélèvement d'air Air-O-Cell™ est un dispositif conçu pour la collecte et l'analyse rapides d'une large gamme de particules en suspension dans l'air. Celles-ci comprennent les spores fongiques, le pollen, les fragments d'insectes, les fragments de cellules cutanées, les fibres et les particules inorganiques. L'air pénètre dans la cassette, les particules se déposent sur le support adhésif, puis l'air s'échappe par l'orifice de sortie. Le flux d'air et le boîtier breveté de la cassette sont conçus pour que les particules soient réparties et déposées uniformément sous forme de “ trace ” sur une lame de verre spéciale, l'adhésif étant contenu dans le boîtier.
Avantages
- Utile pour les tests initiaux sur site, surtout si aucune croissance fongique n'est visible.
- Procédure rapide et simple.
- Délais de traitement rapides disponibles.
- Faible risque de contamination de l'échantillon.
Inconvénients
- Cette méthode ne permet pas d'identifier précisément les espèces de champignons. Par exemple, les espèces d'Aspergillus et de Penicillium sont généralement regroupées en raison de la similarité de la morphologie de leurs spores.
- La viabilité des spores ne peut être évaluée.
Matériels
- Cassette Air-O-CellTM.
- Pompe à vide adaptée pour un fonctionnement à 15 litres par minute (lpm).
- Rotamètre (pour l'étalonnage de la pompe à vide).
- Tuyau flexible.
Procédure d'échantillonnage recommandée
La cassette est conçue pour fonctionner à un débit recommandé de 15 l/min. Un débit inférieur peut entraîner la perte de certaines spores et l'accumulation non uniforme d'autres. Un débit supérieur peut endommager les spores. Il est donc important de ne pas faire fonctionner les pompes d'échantillonnage à faible débit pendant une durée prolongée pour atteindre le volume d'air recommandé.
Étalonnage du débit d'échantillonnage
Un tube à bulles spécialement conçu, disponible auprès du fabricant, permet de régler le débit de la mini-pompe Air-O-Cell ½". Il est incompatible avec tout autre modèle de pompe, mini-pompe ou pompe d'échantillonnage.
Durée d'échantillonnage
La durée du prélèvement dépend de la densité des particules dans l'environnement. Il est important de ne pas surcharger l'échantillon, sous peine de rendre impossible la quantification des types de spores, de pollen et de particules présents. Le tableau suivant présente les durées de prélèvement typiques permettant d'obtenir un tracé net avec une bonne dispersion des spores :
Intervalles d'échantillonnage recommandés pour la cassette d'échantillonnage d'air Air-O-CellTM aux débits de collecte typiques
| Conditions environnementales typiques Débits Collecte à 15 l/min | |
| Propreté ”bureau» ou extérieur (pas de poussière visible) | 10 minutes |
| Environnement intérieur, forte activité et personnel | 5 minutes |
| Environnement intérieur, rénovation de cloisons sèches ou poussières industrielles importantes | 1 minute |
ÉCHANTILLONNAGE D'AIR POUR LE DÉNOMBRE TOTAL DE SPORES
Procédure d'échantillonnage
- Avant le prélèvement d'échantillons, calibrez la pompe à 15 litres par minute.
- Retirez et conservez les scellés adhésifs recouvrant l'entrée et la sortie Air-O-CellTM.
- Fixez la sortie (trou rond) à l'adaptateur de tubulure fourni (disponible sur demande) ou utilisez un tube en PVC standard de ½" (pour une utilisation avec des pompes à haut volume uniquement).
- Mettez en marche la pompe d'échantillonnage et prélevez l'échantillon pendant une période de temps appropriée (voir tableau ci-dessus).
- Retirez l'Air-O-CellTM du tube et refermez-le avec le ruban adhésif d'origine. Étiquetez l'échantillon.
- Remplissez une chaîne de traçabilité EMSL (COC), disponible sur le site web (www.emsl.com), détaillant le nom et les informations du client, le nom ou le numéro du projet, l'échantillon #, la description de la zone et le volume d'air utilisé.
- Pour réduire les dommages liés au transport, il est recommandé de placer l'Air-O-CellTM dans une boîte en carton ondulé afin de garantir son arrivée en toute sécurité au laboratoire.
Suggestions en matière de contrôle de la qualité
- Une interprétation pertinente repose sur la comparaison d'échantillons prélevés à l'intérieur et à l'extérieur. La comparaison avec des échantillons extérieurs permettra de déterminer si une amplification des spores se produit à l'intérieur.
- Prélever un échantillon témoin dans une zone non concernée par la plainte, à des fins de comparaison.
- Envoyer périodiquement une cassette vierge pour analyse est une bonne pratique.
- Le débit est essentiel pour obtenir des résultats précis. N'oubliez pas de calibrer et de recalibrer la pompe avant tout échantillonnage (15 litres/minute).
- N’utilisez jamais de cassettes endommagées ou périmées.
Pour plus d'informations, veuillez contacter :
Zefon International sur www.zefon.com. Air-O-CellTM est une marque déposée de Zefon International
MOLDSNAP ET MICRO-5
Les filtres Zefon MoldSnap (réf. 8715304) et Micro5 MicroCell (réf. 8715306) sont conçus pour un débit de 5 litres par minute, garantissant une efficacité de collecte optimale. Les cassettes doivent être conservées entre 10 et 27 °C.
Ne pas utiliser à des températures inférieures à 37° F !
Procédures d'échantillonnage
- Retirez la goupille située sous le MoldSnap ou le Micro5.
- Si vous utilisez une pompe à haut volume classique : connectez simplement une extrémité du tuyau (5 pieds ou moins) au bas de la cassette.
- Si vous utilisez une pompe à faible volume comme une GilAir5 : il suffit de fixer un morceau de tuyau de 1 pouce au bas de la cassette.
- Raccordez l'autre extrémité du tube à une pompe pré-calibrée à un débit de 5 LPM.
- Retirez le capuchon situé sur le dessus de la cassette.
- Mettez la pompe en marche et prélevez un échantillon pendant une durée appropriée en fonction de l'environnement. (Voir “ Durée d'échantillonnage ” ci-dessous.)
- Une fois l'échantillonnage terminé, replacez la broche et le capuchon en haut et en bas de la cassette.
Durée d'échantillonnage
- Nettoyage des environnements extérieurs/intérieurs = 8 à 10 minutes
- En intérieur (activité normale) = 5 minutes
- Intérieur (particules lourdes) = 1 à 3 minutes
- Cavité murale intérieure avec le Micro5 uniquement (avec adaptateur mural intérieur en option, réf. 8715901) = 1 à 2 minutes
Conseil technique : Nettoyage de base des moisissures
La clé pour lutter contre la moisissure est le contrôle de l'humidité. Il est important de sécher les zones et les objets endommagés par l'eau dans les 24 à 48 heures afin d'empêcher la prolifération de moisissures. Si la moisissure est un problème chez vous, nettoyez-la et éliminez l'excès d'eau ou d'humidité. Réparez les fuites de plomberie ou autres sources d'eau. Nettoyez la moisissure des surfaces dures avec de l'eau et du détergent, puis séchez complètement. Les matériaux absorbants (comme les dalles de plafond et la moquette) qui deviennent moisis devront peut-être être remplacés. (Source : EPA) http://www.epa.gov/mold/moldresources.html)
ÉCHANTILLONNAGE D'AIR CULTIVABLE (CHAMPIGNONS OU BACTÉRIES)
Impacteurs de particules (échantillonneurs de type Andersen)
Cette méthode d'échantillonnage de l'air consiste à aspirer un volume d'air mesuré sur un milieu de culture contenu dans des boîtes de Petri. Ces boîtes sont ensuite incubées en laboratoire afin de permettre la croissance des micro-organismes déposés sur le milieu. Les champignons ou bactéries sont alors dénombrés et identifiés. Cette méthode utilise généralement un impacteur de type Andersen N-6 (par exemple, l'échantillonneur microbien EMSL VP-400, référence 8709001). Différentes géloses sont disponibles auprès d'EMSL Analytical, Inc., selon les types de champignons ou de bactéries à identifier.
Avantages
- Les cultures fongiques permettent de déterminer si le champignon est viable (vivant) et permettent l'identification du genre et de l'espèce.
- Les cultures bactériennes permettent le dénombrement et l'identification des bactéries cultivables présentes dans l'air.
Inconvénients
- Il faut compter 6 à 10 jours pour que les micro-organismes se développent et soient identifiés.
- Étant donné que la plupart des échantillons environnementaux contiennent un grand nombre d'organismes, chacun doit rivaliser avec les autres pour se développer sur le milieu de culture. Par conséquent, les champignons et les bactéries présents dans l'air peuvent être sous-représentés en culture.
- Certains microbes ne se développent pas bien, voire pas du tout, sur les milieux de culture.
- Certains micro-organismes sont impossibles à identifier, car ils ne présentent pas de caractéristiques essentielles telles que des spores ou parce qu'ils ne sont pas décrits dans la littérature scientifique.
Recommandations générales concernant les médias : Champignons et bactéries
- Pour l’échantillonnage fongique, nous recommandons généralement la gélose à l’extrait de malt (MEA).
- Si vous effectuez des prélèvements dans des zones arides, l'utilisation du milieu DG18 favorisera la sélection de champignons hygrophiles qui ne se développent pas nécessairement sur gélose MEA.
- L'échantillonnage de Stachybotrys sp. peut être réalisé avec de la gélose cellulosique (CA) ou de la gélose à la farine de maïs (CMA).
- Pour l'échantillonnage bactérien, en général nous recommandons la gélose trypticase soja (TSA) ou la TSA avec du sang 5%.
- Pour l'échantillonnage des bactéries Gram négatives, nous recommandons la gélose MacConkey (MAC).
- Pour toutes les autres situations, le département de microbiologie se fera un plaisir de vous faire des recommandations en fonction de votre situation d'échantillonnage particulière.
- Les fournitures d'échantillonnage peuvent être commandées à www.emsl.com ou en appelant le service clientèle : 800-220-3675.
Comment manipuler les milieux microbiologiques (plaques de gélose)
- Les plaques de gélose doivent être conservées au réfrigérateur ou sur des accumulateurs de froid jusqu'à leur utilisation.
- Il faut laisser les plaques se réchauffer à température ambiante avant de prélever un échantillon (environ 15 minutes).
- Ne retirez le couvercle de la plaque à aucun moment, sauf lors du prélèvement d'échantillons.
- Après le prélèvement de l'échantillon, scellez le couvercle sur la plaque avec du Parafilm ou du ruban adhésif.
- Les plaques doivent être renvoyées à EMSL avec des accumulateurs de froid par livraison prioritaire le lendemain. Recongelez et réutilisez l'accumulateur d'origine (ce type d'accumulateur est stable pendant 24 heures).
- Un emballage adéquat doit être fourni pour protéger les plaques.
- Les plaques ne doivent pas entrer en contact direct avec le sachet réfrigérant, car le milieu de culture pourrait geler, invalidant ainsi les tests.
- En cas de retard dans l'envoi des plaques de gélose à EMSL, celles-ci doivent être réfrigérées jusqu'à ce qu'elles soient prêtes pour une livraison express.
Recommandations
- Portez des gants en latex ou en nitrile lors du prélèvement d'échantillons.
- Utiliser l'alcool isopropylique 70% pour désinfecter le dispositif d'échantillonnage entre chaque échantillon.
- Placez le couvercle de la boîte de Petri dans un sac propre pendant le prélèvement afin de réduire tout risque de contamination croisée.
- Inclure des échantillons externes et un échantillon témoin de terrain.
Procédure d'échantillonnage
- Laisser les plaques de gélose atteindre la température ambiante avant utilisation.
- Fixez une extrémité du tube à l'entrée de la pompe à vide et l'autre extrémité à l'entrée de l'échantillonneur.
- Calibrer le débit de la pompe à vide :
- Placer une boîte de Petri non couverte dans l'échantillonneur (ne pas soumettre cette boîte comme échantillon, la jeter après l'étalonnage).
- Mettez la pompe en marche et ajustez le débit jusqu'à ce que le rotamètre indique 28,3 LPM (le débit est lu au milieu du palier du rotamètre).
- Retirez le bouchon et le rotamètre avant l'échantillonnage.
- Essuyez toutes les surfaces exposées de l'échantillonneur avec une lingette imbibée d'alcool isopropylique 70% et laissez sécher à l'air libre.
- Placez la plaque de gélose sur la base de l'échantillonneur de manière à ce que la boîte de Petri repose sur les trois broches métalliques surélevées.
- Retirez le couvercle de la boîte de Petri et placez-la dans un sachet d'échantillon propre afin de minimiser la contamination (disponible sur demande).
- Assemblez l'étage de classification du jet sur l'échantillonneur et fixez le cône d'entrée avec les trois clips fournis.
- Réglez la minuterie sur une durée appropriée en fonction des conditions environnementales (la durée d'échantillonnage est généralement comprise entre 2 et 5 minutes).
- Mettez la pompe en marche et démarrez le minuteur simultanément.
- Une fois le temps écoulé, éteignez la pompe, démontez l'échantillonneur et replacez le couvercle sur la plaque de gélose.
- Fixez le couvercle sur la boîte de Petri avec du ruban adhésif de masquage ou du Parafilm (évitez d'utiliser du ruban adhésif électrique, d'emballage, transparent ou toilé).
- Inscrivez le numéro de l'échantillon au fond de la boîte de Petri.
- Consignez toutes les informations pertinentes relatives à la chaîne de traçabilité.
- Renvoyer les échantillons avec une poche de glace à EMSL Analytical pour analyse.
Kit de base EMSL VP-400 avec
Pompe E-Lite, lot de 25
#8709003
Conseil technique : Les moisissures peuvent-elles causer des problèmes de santé ?
Les moisissures ne posent généralement pas de problème à l'intérieur, sauf si leurs spores se déposent sur un endroit humide et commencent à proliférer. Elles peuvent toutefois engendrer des problèmes de santé. Les moisissures produisent des allergènes (substances susceptibles de provoquer des réactions allergiques), des irritants et, dans certains cas, des substances potentiellement toxiques (mycotoxines). Inhaler ou toucher des moisissures ou leurs spores peut provoquer des réactions allergiques chez les personnes sensibles. Ces réactions allergiques se manifestent par des symptômes semblables à ceux du rhume des foins, tels que des éternuements, un écoulement nasal, des yeux rouges et des éruptions cutanées (dermatite). Les réactions allergiques aux moisissures sont fréquentes et peuvent être immédiates ou retardées. Les moisissures peuvent également provoquer des crises d'asthme chez les personnes asthmatiques allergiques. De plus, l'exposition aux moisissures peut irriter les yeux, la peau, le nez, la gorge et les poumons, aussi bien chez les personnes allergiques que non allergiques. Les symptômes autres que les réactions allergiques et irritantes sont rarement rapportés suite à l'inhalation de moisissures. Les recherches sur les moisissures et leurs effets sur la santé se poursuivent. Cette brochure en offre un bref aperçu. Ce document ne décrit pas tous les effets potentiels sur la santé liés à l'exposition aux moisissures. Pour des informations plus détaillées, consultez un professionnel de la santé. Vous pouvez également contacter votre agence régionale de santé publique. (Source : Document EPA # 402-K-02-003)
ÉCHANTILLONNAGE DE SURFACE CULTIVABLE
PRÉLÈVEMENT PAR ÉCOUVILLON CULTURABLE
Avantages
- L'écouvillon de culture est peu coûteux et permet un prélèvement rapide des surfaces.
- Un test utile pour l'échantillonnage initial du site.
- Identification possible au niveau de l'espèce.
- La viabilité des champignons est déterminée.
Inconvénients
- Les zones de prolifération fongique sont souvent petites et dispersées, il est donc possible qu'elles ne soient pas toutes détectées. Le prélèvement de plusieurs échantillons permettra de pallier ce problème.
- Les problèmes de santé liés à la prolifération microbienne en intérieur sont généralement causés par l'inhalation d'une quantité importante de spores en suspension dans l'air, parfois sur une longue période. La présence de matières biologiques sur une surface donnée ne reflète pas nécessairement la composition de l'air.
- Cette méthode ne détecte que les spores et les hyphes viables, mais pas les champignons non viables ou difficiles à cultiver. Il est conseillé de combiner l'examen direct des échantillons avec des méthodes de culture si la présence de champignons non viables est importante pour votre projet.
- Les cultures ne permettent pas de distinguer les spores, les hyphes et les autres cellules fongiques ; les résultats sont exprimés en unités formant colonies.
Matériels
- Écouvillon stérile avec solution tampon appropriée pour le prélèvement et le transport de l'échantillon (fourni sur demande par EMSL).
- gants en latex/nitrile
Échantillonnage
- En portant des gants, retirez l'écouvillon de son emballage.
- Retirez le bouchon du tube média.
- Prélevez soigneusement le échantillon sur la zone souhaitée en faisant rouler légèrement l'écouvillon d'avant en arrière sur la zone prélevée.
- Insérer l'écouvillon dans le tube, bien refermer le bouchon et étiqueter de manière appropriée.
- Pour les rapports quantitatifs de culture, la zone prélevée doit être inscrite dans la chaîne de traçabilité.
Remplissez une chaîne de traçabilité EMSL (COC), disponible sur notre site web (www.emsl.com), détaillant le nom et les informations du client, le nom ou le numéro du projet, l'exemple # et une description de la zone.
Échantillon d'envoi
- Placer les échantillons dans une glacière avec des blocs réfrigérants réutilisables.
- Livraison express recommandée
Gants en nitrile
Petit #8705400
Moyen #8705401
Grand #8705402
Très grand #8705403
ÉCHANTILLONNAGE EN VRAC CULTURABLE
Avantages
- L'échantillonnage en vrac est peu coûteux et les matériaux de surface peuvent être échantillonnés rapidement.
- Un test utile pour l'exploration initiale du site.
- Identification possible au niveau de l'espèce.
- La viabilité des champignons est déterminée.
Inconvénients
- Les zones de prolifération fongique sont souvent petites et dispersées, et il est donc possible qu'elles ne soient pas toutes détectées dans l'échantillon global. Plusieurs échantillons seront nécessaires pour pallier ce problème.
- Les problèmes de santé liés à la prolifération microbienne en intérieur sont généralement causés par l'inhalation d'une quantité importante de spores en suspension dans l'air, parfois sur une longue période. La présence de matières biologiques sur une surface donnée ne reflète pas nécessairement la composition de l'air.
- Cette méthode ne détecte que les spores et les hyphes viables, mais pas les champignons non viables ou difficiles à cultiver. Il est conseillé de combiner l'examen direct des échantillons avec des méthodes de culture si la présence de champignons non viables est importante pour votre projet.
- Les cultures ne permettent pas de distinguer les spores, les hyphes et les autres cellules fongiques ; les résultats sont exprimés en unités formant colonies.
Matériels
- Sacs de prélèvement stériles (Ziplock) pour collecter et transporter l'échantillon (fournis sur demande par EMSL).
- gants en latex/nitrile
Échantillonnage
- En portant des gants et en utilisant des outils propres, retirez une zone représentative de la végétation ainsi que le matériau de construction (plaque de plâtre, bois, etc.). Une surface de 2,5 cm² est suffisante.
- Placer le matériau en vrac dans un sac d'échantillonnage et étiqueter l'extérieur du sac avec le lieu ou la description de l'échantillonnage.
Remplissez une chaîne de traçabilité EMSL (COC), disponible sur notre site web (www.emsl.com), détaillant le nom et les informations du client, le nom ou le numéro du projet, le numéro de l'échantillon et une description de la zone.
Échantillon d'envoi
- Placer les échantillons dans une glacière avec des blocs réfrigérants réutilisables.
- Livraison express recommandée
ÉCHANTILLONNAGE ERMI POUR LES PROPRIÉTAIRES
Étape 1
Préparez votre maison aux tests
La veille et pendant toute la durée du test, veillez à ce que le calme règne dans la maison. Éteignez les ventilateurs portables ainsi que le chauffage ou la climatisation afin d'éviter de souffler de l'air sur les zones à tester. Éloignez les personnes de ces zones. L'objectif est d'éviter de remettre en suspension la poussière déposée et de la disperser dans l'air juste avant ou pendant le test.
Étape 2
Matériel nécessaire
- 1 mètre ruban
- 1 aspirateur avec embout flexible
- 1 rallonge électrique
- 1 rouleau de ruban adhésif toilé, de peinture ou de masquage
- Chronomètre ou minuteur de cuisine avec incréments de 5 minutes
- 1 kit d'aspiration de poussière (acheté auprès d'EMSL Analytical, Inc.)
Préparer les zones de test
Pour les prélèvements à domicile, les chercheurs de l'EPA recommandent de prélever un échantillon composite du salon et de la chambre à coucher en utilisant le même aspirateur pour les deux pièces. Les autres zones doivent être échantillonnées séparément.
- Dans la pièce de vie principale (salon ou salle familiale), choisissez le canapé. À défaut, choisissez un autre fauteuil fréquemment utilisé. À l'aide du mètre ruban et du ruban adhésif, marquez les coins d'une zone d'échantillonnage rectangulaire de 90 cm x 180 cm (3 pieds x 6 pieds) le long du côté le plus long du canapé. Si l'espace est trop restreint, ajustez les dimensions en conséquence (essayez toutefois d'échantillonner une surface totale de 1,7 m² ou 18 pieds carrés). Reportez les dimensions de la zone d'échantillonnage finale, marquée au ruban adhésif, sur les lignes correspondant à la pièce échantillonnée sur la fiche de données.
- Pour la chambre, choisissez la chambre la plus fréquemment utilisée. S'il y a plusieurs lits dans la chambre, choisissez celui qui est le plus souvent utilisé. À l'aide du mètre ruban et du ruban adhésif, marquez les coins d'une zone d'échantillonnage rectangulaire de 90 cm x 180 cm (3 pi x 6 pi) au sol, juste contre le côté du lit où la personne se lève et se couche le plus souvent. Si possible, essayez d'étendre la zone d'échantillonnage rectangulaire de 8 à 10 cm (3 à 4 po) sous le lit afin qu'une partie de l'échantillon se trouve en dessous. Si l'espace est insuffisant, ajustez les dimensions en conséquence (mais essayez d'échantillonner une surface totale de 1,7 m² ou 18 pi²). Notez la surface d'échantillonnage finale marquée au ruban adhésif sur les lignes à côté de la chambre échantillonnée sur la fiche de données.
- Il est possible de prélever des échantillons dans d'autres pièces que le salon, la salle familiale ou les chambres. Si vous choisissez de prélever des échantillons dans d'autres zones, veuillez utiliser un aspirateur distinct pour chaque zone. N'hésitez pas à contacter le laboratoire pour toute question.
- Pour vous familiariser avec les procédures, veuillez lire l'étape 3 ci-dessous avant de commencer le test.
Étape 3
Passer le test
- Assurez-vous que le tuyau est correctement raccordé à votre aspirateur. Mettez l'aspirateur en marche pour vérifier que le tuyau aspire bien l'air, puis éteignez-le.
- Il arrive que le dispositif d'aspiration de poussière ne s'emboîte pas correctement sur le raccord du tuyau. Dans ce cas, vous pouvez utiliser du ruban adhésif toilé ou du ruban isolant pour fixer l'aspirateur à poussière au raccord du tuyau.
- Utilisez la rallonge électrique au besoin pour atteindre la zone marquée avec le tuyau d'aspirateur.
- Retirez les deux capuchons du dispositif d'échantillonnage. Placez-les à un endroit où vous pourrez les retrouver une fois le test terminé.
- Fixez l'extrémité plate et ronde du dispositif d'échantillonnage à l'extrémité du tuyau de votre aspirateur.
- Utilisez l'extrémité biseautée du dispositif de prélèvement pour recueillir votre échantillon. Veillez à ce que cette extrémité soit bien alignée avec la surface à prélever.
- Mettez l'aspirateur en marche et lancez le chronomètre. Chronométrez la durée du passage de l'aspirateur. Veillez à ne pas perturber l'enregistrement. Ne dépassez pas la durée d'échantillonnage de 5 minutes.
- Aspirez l'intérieur de la zone délimitée par le ruban adhésif. Pour ce faire, passez l'appareil d'échantillonnage le long de lignes parallèles imaginaires, légèrement superposées, à l'intérieur de la zone d'échantillonnage pendant environ 5 minutes. Si nécessaire, ajustez votre vitesse de déplacement afin d'aspirer la totalité de la zone d'échantillonnage de 1,7 m² (18 pieds carrés) en 5 minutes.
- Passez dans la deuxième pièce et répétez le passage de l'aspirateur dans la zone ciblée. Une fois le prélèvement terminé, tenez l'embout vers le plafond et éteignez l'aspirateur. Refermez l'embout en retirant le capuchon afin de ne pas perdre de poussière.
- Évitez d'aspirer les gros débris autres que la poussière. Si vous aspirez accidentellement le ruban adhésif, orientez l'appareil de prélèvement vers le plafond et éteignez l'aspirateur. Retirez le ruban adhésif de l'appareil. Remettez l'aspirateur en marche et reprenez l'aspiration de la zone de prélèvement. Tenez compte du temps d'échantillonnage perdu lors de cette opération afin d'obtenir un temps total de prélèvement de 5 minutes.
- Séparez le dispositif d'échantillonnage du tuyau de l'aspirateur et remettez le capuchon sur l'extrémité plate du dispositif.
- Après avoir fixé les petits bouchons sur le dispositif de prélèvement de poussière, vérifiez la présence de poussière dans le récipient avant de l'envoyer au laboratoire. Si aucune poussière n'est visible, répétez la procédure de prélèvement dans les deux pièces, à différents endroits, jusqu'à ce que de la poussière soit présente dans le dispositif.
- Si vous perdez les petits bouchons, bouchez complètement et solidement les ouvertures avec du ruban adhésif isolant ou du ruban adhésif toilé.
Étape 4
Remplissez les formulaires
- Sur la fiche technique, indiquez le numéro du dispositif d'échantillonnage à l'endroit indiqué (il se trouve sous le code-barres sur le côté de la boîte).
- Sur la fiche de données, identifiez toutes les zones échantillonnées à l'aide de ce numéro d'appareil d'échantillonnage particulier.
- Remplissez tous les champs en tenant compte de tout ajustement de la zone d'échantillonnage de 18 pieds carrés.
- Remettez le dispositif d'échantillonnage et sa fiche technique correspondante dans la boîte.
- Fermez la boîte avec du ruban adhésif pour éviter qu'elle ne s'ouvre pendant le transport.
Étape 5
Retournez le dispositif d'échantillonnage
- Veuillez renvoyer le colis à EMSL. Il est impératif que seules les analyses effectuées par des laboratoires agréés par l'EPA pour l'utilisation de cette technologie brevetée soient réalisées. EMSL détient actuellement cet agrément auprès de l'EPA.
- Les résultats seront disponibles après 5 jours ouvrables.
- Des résultats express sont disponibles moyennant un supplément.
Un rapport écrit comparant votre maison à ERMI sera envoyé à l'adresse postale indiquée sur la fiche technique.
Étape 6
Et ensuite ?
Si vos résultats indiquent un risque de moisissure dans votre maison, nous vous recommandons de faire appel à une entreprise qualifiée pour en identifier la source. Vous pouvez consulter les pages jaunes à la rubrique « Conseillers en environnement ». Consultez également les sites web suivants pour trouver des professionnels qualifiés en qualité de l'air intérieur dans votre région :
Veuillez conserver cette section pour vos archives.
Le kit de test de moisissures EMSL est destiné à être utilisé uniquement conformément aux instructions fournies. Ces instructions s'appliquent à un usage résidentiel. Pour les applications non résidentielles, veuillez contacter EMSL afin de connaître les protocoles d'échantillonnage appropriés. EMSL décline toute responsabilité en cas d'erreur de l'utilisateur lors de l'échantillonnage. EMSL n'est pas responsable des dommages causés aux appareils utilisés pour le prélèvement des échantillons. Ce kit ne saurait se substituer à une inspection visuelle et complète des locaux échantillonnés. En aucun cas, EMSL ne pourra être tenu responsable des dommages directs, spéciaux, indirects ou accessoires, quelle que soit la négligence (unique ou partagée) d'EMSL et même si EMSL a été informé de la possibilité de tels dommages, découlant des services fournis par EMSL en vertu des présentes ou de la livraison, de l'utilisation, de la confiance accordée ou de l'interprétation des résultats des tests par le client ou un tiers. EMSL décline toute responsabilité légale quant à l'utilisation que le client fait des résultats des tests. En aucun cas, la responsabilité d'EMSL envers un client ou un tiers, que ce soit sur la base de théories de la responsabilité délictuelle, contractuelle ou de toute autre théorie juridique ou équitable, ne pourra excéder le prix d'achat.
ÉCHANTILLONNAGE PCR
Échantillonnage de l'air par PCR
(Les cassettes d'air sont disponibles auprès d'EMSL, références 8715309 et 8715251)
- Obtenez la cassette de prélèvement d'air PCR auprès d'EMSL.
- Retirez les bouchons supérieur (bleu) et inférieur (rouge) de la cassette.
- Fixez une pompe à vide à la cassette par l'ouverture inférieure.
- Réglez le débit de la pompe entre 10 et 13 litres par minute.
- On peut aspirer autant d'air que souhaité par l'ouverture supérieure. La durée d'échantillonnage n'est pas limitée, mais un volume de 1 000 litres d'air est généralement suffisant pour la plupart des tests PCR.
- Placez chaque cassette d'air dans un récipient individuel hermétique, comme un sac en plastique Ziploc.
- Étiquetez clairement le sac en plastique avec l'identification de l'échantillon.
- Remplissez la chaîne de traçabilité EMSL en précisant le numéro d'échantillon, le volume d'air prélevé, le lieu de prélèvement, l'heure et la date.
- Expédier la cassette à EMSL.
Échantillonnage en masse par PCR
(Des pots en verre de 2 oz et 4 oz sont disponibles chez EMSL, sous les références 8714223 et 8714232)
- Obtenez des sacs en plastique ou des bocaux en verre auprès d'EMSL.
- Repérer la portion représentative du matériau en vrac.
- Prélevez une petite quantité de matière à l'aide d'une cuillère, d'une spatule ou de tout autre outil.
- Placez l'échantillon dans un récipient propre et hermétique, comme un sac plastique Ziploc ou un petit bocal en verre. Fermez hermétiquement.
- Nettoyez tout résidu à l'extérieur du récipient. Si nécessaire, désinfectez-le avec des lingettes alcoolisées.
- Étiquetez clairement le récipient avec l'identification de l'échantillon.
- Remplissez le formulaire EMSL de chaîne de traçabilité en précisant le numéro d'échantillon, le lieu de prélèvement, l'heure et la date.
- Expédier un échantillon en vrac à EMSL.
Prélèvement par écouvillonnage PCR
(Un écouvillon Butterfields de 1 ml est disponible auprès d'EMSL, référence produit 8708935)
- Obtenez un écouvillon auprès d'EMSL pour prélever l'échantillon.
- En portant des gants, retirez l'écouvillon du tube de transport.
- Prélevez soigneusement le prélèvement sur la zone souhaitée en faisant rouler légèrement l'écouvillon d'avant en arrière. Une zone de prélèvement de 10 x 10 cm est suffisante pour la plupart des tests PCR.
- Introduire l'écouvillon dans le tube contenant le milieu de transport et refermer fermement le bouchon.
- Étiquetez clairement le tube de transport avec l'identification de l'échantillon.
- Remplissez le formulaire EMSL de chaîne de traçabilité en précisant le numéro d'échantillon, la zone d'échantillonnage, le lieu de prélèvement, l'heure et la date.
- Expédier l'écouvillon à EMSL.
Échantillonnage de poussière par PCR
(Un échantillonneur de poussières et d'allergènes est disponible auprès d'EMSL, référence produit 8715600)
- Obtenez un échantillonneur de poussière et d'allergènes auprès d'EMSL.
- Retirez les capuchons en plastique blanc des deux extrémités de l'échantillonneur de poussière et d'allergènes.
- Fixez l'échantillonneur de poussière et d'allergènes au tuyau ou au tube de l'aspirateur.
- Mettez l'aspirateur en marche et aspirez la zone nécessaire pour obtenir suffisamment de matière pour le test PCR. Il n'y a pas de limite de temps pour le prélèvement, mais il est nécessaire de recueillir au moins 5 mg de poussière pour la plupart des tests PCR.
- Débranchez l'échantillonneur de poussière et d'allergènes du tuyau ou du tube de l'aspirateur.
- Fixez des bouchons en plastique blanc aux deux extrémités de l'échantillonneur de poussière et d'allergènes afin de maintenir l'échantillon de poussière à l'intérieur du tube en plastique à mailles.
- Insérez chaque échantillonneur de poussière et d'allergènes dans un récipient individuel hermétique, tel qu'un sac en plastique Ziploc.
- Étiquetez clairement le sac en plastique avec l'identification de l'échantillon.
- Remplissez le formulaire EMSL de chaîne de traçabilité en précisant le numéro d'échantillon, le lieu de prélèvement, l'heure et la date.
- Expédier un échantillonneur de poussières et d'allergènes à EMSL.
Bouteilles pour tester l'eau
GRATUIT pour EMSL
Les clients appellent pour
Détails
Échantillonnage d'eau par PCR
(Des flacons en plastique stériles de 120 ml, 250 ml et 1000 ml avec conservateur sont disponibles chez EMSL, sous les références 87M007, 87M005 et 87M001).
- Obtenez des flacons en plastique stériles avec conservateur auprès d'EMSL.
- Remplissez le récipient avec le volume d'eau spécifié et fermez-le hermétiquement pour éviter toute fuite pendant le transport. Un volume d'eau compris entre 100 millilitres et 1 litre est suffisant pour la plupart des tests PCR.
- Essuyez toute trace de liquide résiduel à l'extérieur du récipient. Désinfectez-le avec des lingettes alcoolisées si nécessaire.
- Étiquetez clairement la bouteille en plastique avec l'identification de l'échantillon.
- Remplissez le formulaire EMSL de chaîne de traçabilité en précisant le numéro d'échantillon, le volume d'eau, le lieu de prélèvement, l'heure et la date.
- Placez les flacons dans le conteneur isotherme avec des blocs réfrigérants afin d'éviter la surchauffe des échantillons pendant le transport.
- Expédier les échantillons d'eau à EMSL avec livraison express.
Échantillonnage de cultures bactériennes et fongiques par PCR
- Les souches bactériennes et fongiques peuvent être soumises à identification sous forme de cultures axéniques sur des plaques de gélose.
- Les colonies isolées doivent être visibles sur une plaque pour garantir la pureté de la culture et l'exactitude de l'identification.
- Étiquetez clairement la plaque de gélose avec l'identification de l'échantillon.
- Remplissez le formulaire EMSL de chaîne de traçabilité en précisant le numéro d'échantillon.
- Emballer la plaque de gélose dans le conteneur isotherme en veillant à l'intégrité de l'échantillon pendant le transport.
- Expédier la plaque d'agar à EMSL.
ÉCHANTILLONNAGE D'ALLERGÈNES
Procédure d'échantillonnage des poussières à l'aide du dépoussiéreur
- Identifiez quatre (4) zones distinctes à échantillonner. Chaque zone échantillonnée doit avoir une superficie d'environ 1/4 de mètre carré (environ 2,75 pieds carrés).
- Retirez les capuchons blancs des deux extrémités de la cassette collectrice rouge. Conservez-les pour les remettre en place une fois l'échantillonnage terminé.
- Fixez l'extrémité non inclinée de la cassette rouge au tuyau d'aspiration. (Un aspirateur équipé d'un filtre HEPA est recommandé.)
- Utilisez l'extrémité inclinée pour prélever la poussière pendant 30 secondes dans chacune des quatre (4) zones. La durée totale d'échantillonnage et la surface collectée, par cassette rouge, doivent être respectivement de 2 minutes et de 1 mètre carré.
- La quantité minimale de poussière collectée à l'intérieur du collecteur rouge doit atteindre la moitié de la hauteur du filtre à mailles.
- Une fois l'échantillonnage terminé, replacez les bouchons blancs aux extrémités de la cassette rouge et placez-la dans un petit sac Ziploc ou équivalent. Inscrivez sur le sac le numéro de l'échantillon, votre nom et son emplacement (ex. : Échantillon 1, Chambre).
- Envoyez les filtres contenant l'échantillon de poussière à EMSL Analytical, Inc. pour analyse des allergènes, en utilisant le formulaire EMSL de chaîne de traçabilité microbiologique. Choisissez le délai de traitement souhaité.
| Analyses d'allergènes intérieurs disponibles | |
|---|---|
| Code de test | Description* |
| M034 Pellicules de chat | Poils de chat (Fel d 1) |
| M035 Pellicules de chien | Pellicules de chien (Can f 1) |
| M036 Cafard | Cafard (Bla g 2) |
| M037 Acariens de la poussière | Acariens (Der p 1 & Der f 1) |
| Souris M038 | Souris (Mus m 1) |
| Rat M039 | Rat (Rat n 1) |
| Groupe M044 IA | Chat, chien, cafard et acariens |
| Groupe M254 IA | Rat et souris |
| * Toutes les analyses sont réalisées par MARIA (Multiplex Array for Indoor Allergens). | |
| * Plusieurs allergènes peuvent être analysés à partir d'un seul filtre contenant un échantillon de poussière. | |
Échantillon d'allergènes
#8715600
Kit d'échantillons de tapis disponible
Réservé aux consultants.
Échantillonnage de tapis EMSL
Kit 25 mm
#8715314
Procédure de prélèvement d'air pour les animaux de laboratoire
- En utilisant une pompe d'échantillonnage à faible volume, prélevez un échantillon de l'environnement de travail avec une cassette de 37 mm équipée soit d'un filtre en fibre de verre de 1,0 micron, soit d'un filtre MCE de 0,8 micron.
- Le débit de prélèvement doit être de 1,5 à 2,5 litres par minute et la durée de prélèvement de quatre (4) à huit (8) heures. (Indiquer la durée en minutes pour la chaîne de traçabilité)
- Étiquetez chaque cassette d'échantillon avec le nom du lieu et la date/heure de l'échantillonnage.
- Utilisez un formulaire de chaîne de traçabilité microbiologique EMSL et complétez-le avec les informations de facturation et de rapport demandées. Pour chaque échantillon prélevé, indiquez le numéro d'échantillon, le lieu de prélèvement, la matrice (air), le code de test (voir ci-dessous), le volume total prélevé en minutes (ex. : 1,8 L/min x 240 minutes = 432 L/min de volume total) et la date et l'heure du prélèvement. Signez le formulaire et envoyez-le à EMSL Analytical, Inc. – Cinnaminson, NJ.
| Analyses d'allergènes disponibles | |
|---|---|
| Code de test | Description* |
| Souris M038 | Souris (Mus m 1) |
| Rat M039 | Rat (Rat n 1) |
| Groupe M254 IA | Rat et souris |
ÉCHANTILLONNAGE DES COLIFORMES TOTAUX
Chaîne de possession
Le formulaire doit comporter la date, l'heure et la source du prélèvement. Ces informations sont nécessaires pour vérifier que les échantillons sont conformes aux délais de conservation et valides pour l'analyse. Si vous recherchez les coliformes totaux, veuillez préciser si vous souhaitez une analyse de présence/absence (Colilert) ou un dénombrement (Numéro le plus probable [NPP] ou technique de filtration sur membrane [TFM]).
Échantillonnage
Tous les prélèvements d'eau doivent être effectués dans des récipients stériles homologués, que notre laboratoire peut fournir sur demande. Les échantillons d'eau traitée (réseau municipal/de distribution) doivent être déchlorés au thiosulfate de sodium (déjà conditionné dans des flacons fournis par notre laboratoire). Conserver le flacon de prélèvement fermé jusqu'à son remplissage sur le lieu de prélèvement.
Échantillon de distribution ou de robinet d'évier
- Retirez l'aérateur du robinet.
- Rincez le robinet avec une solution de javel.
- Purgez la conduite en ouvrant complètement le robinet et en laissant couler l'eau pendant deux à trois minutes, ou pendant une durée suffisante pour permettre le dégagement de la conduite de service.
- Réduire le débit d'eau pour permettre le remplissage de la bouteille sans éclaboussures.
- 100 mL sont nécessaires pour chaque échantillon soumis à l'analyse.
échantillons de puits
Si l'échantillon est prélevé dans un puits muni d'une pompe manuelle, pompez l'eau pendant environ cinq minutes avant le prélèvement. Si le puits est équipé d'une pompe mécanique, prélevez l'échantillon au robinet situé à la sortie. En l'absence de pompe, prélevez l'échantillon directement dans le puits à l'aide d'un flacon stérilisé lesté au fond ; veillez à éviter toute contamination par les dépôts présents en surface.
Temps d'attente
Le délai de conservation des échantillons réglementaires est de 30 heures pour la méthode de détection de présence/absence et de 8 heures pour la méthode de filtration sur membrane. Pour les échantillons non réglementaires, ce délai est de [durée manquante] heures, quelle que soit la méthode d'analyse.
Si le client est conscient que les délais de conservation vont être dépassés mais souhaite néanmoins que l'analyse se poursuive, veuillez l'indiquer sur la chaîne de traçabilité.
Si les délais d'attente sont dépassés, les résultats sont invalides et cela sera indiqué dans le rapport final.
Délais de traitement
Les résultats du test de présence/absence de coliformes totaux (Colilert) ou du dénombrement (MPN) peuvent être communiqués en 24 heures.
Les résultats du dénombrement total des coliformes (MFT) prendront 6 à 10 jours.
Expédition d'échantillons
Tous les échantillons doivent être expédiés réfrigérés, non congelés, et maintenus en position verticale. La meilleure méthode d'expédition consiste à utiliser des pains de glace, et non des bouteilles de soda remplies d'eau congelée, des sacs de glace ou de la glace en vrac. Les échantillons mal expédiés risquent d'être contaminés ou refusés.
CONTAMINATION DES BÂTIMENTS PAR LES EAUX USÉES
- Les méthodes disponibles pour détecter la contamination des bâtiments par les eaux usées comprennent :
- M117 – une méthode basée sur la culture pour la détection des coliformes totaux, d'E. coli et d'entérocoques (délai d'obtention des résultats : 48 h)
- M013 – une méthode basée sur la culture permettant de détecter les coliformes totaux, les coliformes fécaux, E. coli et les streptocoques fécaux (délai d'obtention des résultats : 6 à 10 jours)
- M095 – une nouvelle méthode basée sur la PCR pour la détection des Bacteroides totaux (délai d'exécution de 24 h disponible)
- Les méthodes de culture présentent l'avantage de ne détecter que les bactéries contaminantes vivantes, qui peuvent être les seules pertinentes en cas de suspicion de maladie. La recherche d'endotoxines peut également s'avérer utile pour quantifier la quantité totale de bactéries Gram négatif dans le bâtiment (voir page 17).
- Le test Bacteroides présente certains avantages par rapport aux tests traditionnels basés sur la culture, notamment :
- Bacteroides est spécifique à la contamination fécale de toutes origines – animales, aviaires et humaines
- Les coliformes, E. coli, les streptocoques fécaux et les entérocoques peuvent se développer dans l'eau, le sol, les sédiments et sur la végétation dans des environnements non contaminés (E. coli se trouve dans des environnements tropicaux vierges).
- Les Bacteroides ne se multiplieront pas dans l'environnement.
- Les Bacteroides sont 1 000 fois plus nombreux que les coliformes et 10 000 fois plus nombreux que les E. coli ; par conséquent, la probabilité de trouver des Bacteroides est grandement augmentée.
- Les tests de culture traditionnels reposent sur la présence de bactéries vivantes. Or, ces bactéries ne sont souvent pas viables en milieu intérieur. CECI SIGNIFIE QU'UN RÉSULTAT NÉGATIF AUX COLIFORMES OU À E. COLI NE SIGNIFIE PAS L'ABSENCE DE CONTAMINATION FÉCALE. Le nouveau test Bacteroides surmonte ces limitations de culture. Le laboratoire peut détecter les bactéries vivantes, non viables ou viables mais non cultivables.
Procédure d'échantillonnage pour tous les tests de contamination des eaux usées
- Obtenez un écouvillon stérile de 1 mL de solution de Butterfield (référence produit EMSL 8708935) pour prélever et transporter les échantillons (fourni sur demande par EMSL).
- Enfilant des gants, retirez l'écouvillon de son emballage stérile.
- Dévissez soigneusement le bouchon du dispositif de prélèvement – l’écouvillon est fixé au couvercle.
- Éliminez délicatement l'excédent de solution de l'écouvillon de prélèvement en pressant celui-ci contre la paroi intérieure du tube par un mouvement de roulement.
- Tenez l’écouvillon à un angle d’environ 30° par rapport à la surface de prélèvement, en veillant à ne contaminer aucune partie de l’écouvillon ni le site de prélèvement.
- En exerçant une pression ferme et uniforme, déplacez lentement et soigneusement l'écouvillon sur toute la surface de prélèvement de 10 x 10 cm, en réhumidifiant l'extrémité de l'écouvillon avec la solution neutralisante au besoin. Commencez horizontalement, puis verticalement :

- Une fois le prélèvement terminé, remettez soigneusement l'écouvillon dans le flacon et refermez-le hermétiquement.
- Étiquetez l'échantillon à l'aide d'un marqueur à encre permanente.
- Des échantillons de fond doivent être prélevés dans les zones non contaminées par des matières fécales.
Expédition d'échantillons
- Les échantillons destinés à une analyse par culture doivent être expédiés sous réfrigération (et non congelés) dans les 24 heures suivant leur prélèvement. La meilleure méthode d'expédition consiste à utiliser une glacière avec des blocs réfrigérants, et non des sacs de glace ou de la glace en vrac.
- Aucune condition particulière d'expédition ni délai de conservation n'est requis pour les Bacteroides, car ces bactéries ne se multiplient pas en dehors de l'intestin. Toutefois, il est déconseillé de conserver les échantillons plus d'un mois avant analyse.
LÉGIONELLE ÉCHANTILLON
Legionellaceae sont omniprésents dans les eaux de surface, les eaux souterraines et les milieux estuariens. La plupart des épidémies sont dues à légionelles Ces infections sont dues aux brouillards contaminés provenant des tours de refroidissement et des réseaux de distribution d'eau potable. L'exposition se produit par aérosolisation d'eau contaminée.
Nous proposons quatre méthodes culturelles différentes, selon le niveau d'information dont vous avez besoin. Pour plus d'informations sur les différents tests, veuillez consulter : www.legionellatesting.com. Tous les tests de culture nécessitent 10 à 14 jours avant d'être terminés.
Nous proposons également différentes méthodes PCR en fonction des informations dont vous avez besoin. Vous trouverez plus d'informations à ce sujet sur notre site web. www.legionellatesting.com. Bien que la méthode de culture soit considérée comme la méthode de référence, la PCR est utile pour exclure d'éventuelles infections. légionelles Contamination dans les projets urgents. Les résultats PCR peuvent être obtenus le jour même, sous 24 h ou sous 48 h, selon vos besoins.
Où chercher
Voici une liste des réseaux d'eau potable où la présence de la bactérie Legionella a été démontrée et qui ont été associés à des épidémies. Leur investigation devrait être intégrée à tout programme d'évaluation des risques liés à la légionellose.
- Systèmes d'eau potable
- tours de refroidissement
- Génération d'aérosols lors du traitement biologique de certains effluents de procédés industriels, notamment dans les industries de la pâte à papier, des produits alimentaires et des boissons, et pharmaceutiques.
- Génération d'aérosols lors du traitement des eaux municipales et des eaux usées
- eau brute, utilitaire ou d'incendie
- Fontaines et bassins ornementaux d'extérieur et d'intérieur
- Piscines chauffées
- Eau CPAP
- Terreau
- bains à remous
- Humidificateurs
- fluides de travail des métaux
- Équipements de thérapie médicale tels que les appareils de dialyse, les sondes nasogastriques, les appareils respiratoires et les nébuliseurs, les bains à remous
- Les stations de lavage automobile commerciales, en particulier celles utilisant de l'eau recyclée,
- brumisateurs à légumes de supermarché
- Machines à glaçons dans les hôtels et les hôpitaux
- Brumisateurs corporels extérieurs dans les stades et les parcs d'attractions*
*N'a été associé à aucun cas de légionellose.
Considérations relatives à l'échantillonnage
- Les échantillons d'eau doivent être prélevés dans des récipients stériles (disponibles auprès d'EMSL).
- Un échantillon d'eau de 1 L est recommandé pour les eaux potables (contenant du thiosulfate de sodium).
- Un volume inférieur à 1 L est acceptable si l'on soupçonne des niveaux de bactéries plus élevés.
- L'eau chlorée doit être traitée au thiosulfate de sodium.
- 100 à 250 mL suffisent généralement pour les échantillons d'eau non potable.
- En plus de prélever des échantillons d'eau, il est utile de prélever un échantillon du biofilm présent dans les canalisations d'eau potable.
- Les échantillons doivent être transportés au laboratoire dans les 24 heures, dans des glacières avec des blocs réfrigérants.
Emplacements de prélèvement d'eau potable - Prélèvement semestriel
- Point d'entrée du réseau d'eau de la ville
- Réservoirs de stockage
- Point de vidange du chauffe-eau*
- Retour d'eau chaude
- Dernier point sur l'eau froide / Premier point sur l'eau chaude
- Dernier point sur l'eau chaude*/Premier point sur l'eau froide
- 10% de points de vente sélectionnés (eau et écouvillon)*
*Tester régulièrement
légionelles Emplacements des prélèvements de routine
- Tester tous les sites pour établir une base de référence
- Tester tous les sites lors d'une épidémie
Expédition d'échantillons
- Inscrire le numéro d'échantillon sur la bouteille et l'enregistrer dans la chaîne de traçabilité.
- Attribuez un numéro unique à chaque échantillon. Remplissez toutes les informations relatives à l'échantillon sur une fiche de données pour vos archives. Joignez une copie de cette fiche au laboratoire avec les échantillons. Vous pouvez télécharger le formulaire de chaîne de traçabilité sur notre site web. www.emsl.com.
- Fermez hermétiquement les bouteilles. Assurez-vous qu'il n'y ait pas de fuite d'eau pendant le transport. Il est recommandé de sceller le bouchon et le goulot avec du ruban adhésif isolant. Placez les bouteilles scellées dans un sac plastique propre.
- Placez les échantillons dans des boîtes isothermes ou sur des blocs réfrigérants pour les protéger des variations de température extrêmes pendant les mois d'été. N’UTILISEZ JAMAIS DE GLACE NI DE GLACE SÈCHE. Remplissez la boîte de copeaux de polystyrène pour la protéger et fermez-la hermétiquement pour l'expédition. Envoyez les échantillons par transporteur express. Planifiez les prélèvements entre le lundi et le vendredi afin que les échantillons parviennent au laboratoire au plus tard le samedi.
Emplacements de prélèvement des tours de refroidissement - Échantillonnage trimestriel
- Maquillage de la tour
- Tour de vidange éloignée du maquillage* (eau et coton-tige)
- Entrée de l'échangeur de chaleur
- Sortie de l'échangeur de chaleur
- Pack de distribution
- Pack Tour* (eau et écouvillon)
ÉCHANTILLONNAGE DE SARM
Le Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline (SARM) est une bactérie résistante aux antibiotiques de la famille des pénicillines. Cette bactérie se transmet généralement par contact direct avec les mains d'un professionnel de santé ou d'une personne infectée ou porteuse du virus. Des infections communautaires peuvent également survenir en dehors du milieu hospitalier, notamment dans les salles de sport, les écoles, les crèches, les navires de croisière et les établissements d'hébergement pour personnes âgées.
EMSL Analytical, Inc. propose des analyses de SARM sur des échantillons environnementaux (écouvillons, échantillons en vrac ou eau). Veuillez noter que nous n'acceptons pas les échantillons cliniques pour analyse.
Il convient de porter des gants lors du prélèvement d'échantillons sur des objets contaminés ; enfiler des gants propres immédiatement avant le prélèvement. Retirer les gants rapidement après usage, avant de toucher des objets non contaminés ou des surfaces environnementales, et se laver les mains immédiatement afin d'éviter la transmission de micro-organismes à d'autres environnements.
Procédure d'échantillonnage
Prélèvement par écouvillonnage
- Obtenez un écouvillon stérile de 1 mL de bouillon neutralisant HiCap Pur-Blue (ID produit 8708942) auprès d'EMSL pour prélever des échantillons pour la culture.
- Retirez l’écouvillon de son emballage et frottez soigneusement la zone souhaitée en effectuant de légers mouvements de va-et-vient avec l’écouvillon. Une zone de 10 x 10 cm est recommandée. Insérez l’écouvillon dans le tube et refermez-le hermétiquement. Expédiez les écouvillons à EMSL.
Échantillons en vrac
- En portant des gants, prélevez un petit morceau du matériau suspect. Placez-le dans un récipient stérile propre ou dans un nouveau sac en plastique (type Ziploc).
- Fermez le sac ou le couvercle du récipient et étiquetez-le correctement.
Expédition d'échantillons
- Tous les échantillons doivent être expédiés réfrigérés (et non congelés) dans les 24 heures suivant leur prélèvement. Il est recommandé d'utiliser des accumulateurs de froid plutôt que des sacs de glace ou de la glace en vrac. Les échantillons mal expédiés risquent d'être contaminés et d'être refusés par le laboratoire.
- EMSL propose deux méthodes de test MRSA basées sur la culture (Code M729 pour P/A) et (Code M730 pour Quantitatif).
ÉCHANTILLONNAGE D'ENDOTOXINES ENVIRONNEMENTALES
Les endotoxines sont des molécules aux effets toxiques caractéristiques. Elles sont aujourd'hui reconnues comme une classe de composés présents dans la membrane externe de certaines bactéries Gram négatives. Ces bactéries étant largement répandues dans l'environnement, les endotoxines le sont également. Des concentrations élevées ont été relevées dans divers milieux, tels que les filatures de coton, l'agriculture, les stations d'épuration, les installations de lavage industriel, les brouillards d'eau et les humidificateurs d'air contaminés, autant de lieux où l'on peut s'attendre à trouver de l'eau et des bactéries Gram négatives. Les principaux réservoirs sont les fluides aqueux recirculés qui produisent des aérosols.
Résumé des procédures
Les échantillons d'air sont prélevés sur des filtres à membrane sans endotoxines, conservés à l'abri de l'humidité autant que possible, ou stockés à 4 °C. L'analyse des endotoxines peut être effectuée sur l'air, l'eau, la poussière ou des échantillons en vrac.
ATTENTION : Il n’existe pas de valeurs seuils reconnues. Il est donc nécessaire de comparer les valeurs relatives entre la zone suspecte et une zone non suspecte dans des conditions environnementales similaires. Les niveaux d’endotoxines pouvant être importants dans l’air extérieur, ce dernier peut ne pas convenir pour l’estimation des niveaux de fond, notamment dans les environnements connus pour présenter des concentrations élevées de bactéries Gram négatif (voir ci-dessus, 1er paragraphe). Tous les instruments de prélèvement doivent être certifiés exempts d’endotoxines. L’utilisation de PVC et de polypropylène est proscrite en raison de leur affinité pour les endotoxines.
Matériels
Échantillons de fluides et en vrac :
- Collecter dans des récipients sans endotoxines (de préférence en verre, à défaut en polystyrène).
Matériel nécessaire pour l'échantillonnage de l'air :
- Pompe à faible débit
- Rotamètre
- tubes flexibles
- Cassettes en polystyrène sans endotoxines avec filtres à membrane en polycarbonate de 0,2 µm de diamètre et de 37 mm et supports en fibre de verre AP40. Ces produits doivent être traités spécialement pour éliminer toutes les endotoxines ; veuillez commander auprès d'EMSL.
- Le port de gants chirurgicaux stériles est recommandé lors du prélèvement d'échantillons.
Procédure d'échantillonnage
Pour l'échantillonnage de l'air :
- Il convient de prendre des précautions pour éviter de respirer sur les récipients d'échantillonnage, de les toucher ou de les exposer de quelque manière que ce soit à une contamination humaine.
- Pour les prélèvements en intérieur, assurez-vous que toutes les portes et fenêtres sont fermées.
- Calibrer la pompe à 1,5 litres/minute
- En portant des gants, connectez la cassette à la pompe en orientant l'extrémité à capuchon rouge vers la pompe. Prélevez des échantillons d'air pendant 4 heures par échantillon.
- Débranchez la cassette et remettez en place les protections sur l'entrée et la sortie. Enveloppez la cassette dans son emballage d'origine et scellez-le avec du ruban adhésif.
Pour les fluides et les échantillons en vrac :
- Prélever l'échantillon dans un récipient exempt d'endotoxines. Un volume de 15 à 50 mL est généralement suffisant.
Pour toutes les matrices :
- Étiquette avec des informations d'exemple.
- Remplissez une chaîne de traçabilité EMSL (COC), disponible sur le site web (www.emsl.com), détaillant le nom et les informations du client, le nom ou le numéro du projet, l'exemple # et une description de la zone.
- Expédiez les échantillons à EMSL Analytical, Inc. dès que possible. Les échantillons de fluides doivent être expédiés avec des blocs réfrigérants.
Suggestions en matière de contrôle de la qualité
- Il est nécessaire de prélever plusieurs échantillons sur un site afin de comparer une zone potentiellement touchée avec une zone non touchée.
- Les conteneurs utilisés pour les matériaux d'essai ne doivent être ni fissurés ni cassés, et leur matériau d'emballage doit être intact.
CONDITIONS LIMITANT LA CROISSANCE DES PATHOGÈNES
Conseils fournis par EMSL Analytical, Inc.
| Agents pathogènes | Min. aw | Min. pH | Max pH | Max sel % | Min. Température (°C) | Max Temp. | Oxygène Exigence |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Campylobacter jejuni | 0.99 | 4.9-5.5 | 8.0 | 1.5-2.0 | 30-32 | 42-45 | Microaérophile |
| Clostridium botulinum de type A et protéolytique B et F | 0.93-0.96 | 4.7 | 9.0 | 10.0 | 10.0 | 48-50 | Anaérobe |
| Clostridium botulisme de type E, et B et F non protéolytiques | 0.93-0.96 | 4.7-4.8 | 9.0 | 4.5-6.0 | 3.0 | 45 | Anaérobe |
| E. coli | 0.93-0.95 | 3.6-4.7 | 9.5 | 7.5-8.0 | 0.6-3.0 | 45 | anaérobie facultatif |
| Listeria monocytogenes | 0.92-0.95 | 4.8 | 9.6 | 8-12 | 0-2.0 | 45 | anaérobie facultatif |
| Salmonella spp. | 0.92 | 4.0 | 9.0 | 8.0 | 5.0 | 46-47 | anaérobie facultatif |
| Shigella spp. | 0.96 | 6.0 | 10.0 | 6.0 | 7.0 | 46 | anaérobie facultatif |
| Staphylocoque doré | 0.85-0.86 | 4.0 | 10.0 | 18-20 | 5-6* | 45-45 | anaérobie facultatif |
| Vibrio cholerae | 0.95 | 3.6-6.0 | 9.6 | 6-8 | 8.0 | 42-46 | anaérobie facultatif |
| Vibrio parahémolytique | 0.94 | 4.8-5.0 | 9.6 | 8-10 | 5.0 | 43 | anaérobie facultatif |
| Vibrio vulnificus | 0.95 | 6.3 | 9.0 | 6.0 | 13.0 | 44 | anaérobie facultatif |
| Yersinia enterocolitica | 0.95-0.96 | 4.1-4.4 | 9.0 | 6-7 | -1.0-1 | 44 | anaérobie facultatif |
*La température minimale de formation des toxines est de 10 °C
Microaérophile : nécessite des niveaux limités d'oxygène
Anaérobie : nécessite l'absence d'oxygène
Anaérobie facultative : se développe avec ou sans oxygène
INFORMATIONS SUR LES MILIEUX DE CULTURE MICROBIOLOGIE
EMSL Analytical, Inc. propose à ses clients une vaste gamme de milieux de culture. Les informations suivantes visent à faciliter le choix du milieu de culture le plus représentatif possible de l'environnement. Cette liste n'est pas exhaustive ; n'hésitez pas à nous faire part de vos besoins spécifiques.
milieux bactériens
- TSA (gélose trypticase soja)
- TSA avec 5% Sang
- MAC (MacConkey)
- Agar HE (Hekton Enteric)
- Gélose BCYE (gélose au charbon actif et à la levure tamponnée)
- MSA (gélose au mannitol et au sel)
- EMB (Éosine Bleu de Méthylène)
- BE (gélose à l'esculine biliaire)
- Agar-agar chocolaté
- BHI (Infusion cerveau-cœur)
- Gélose xylose lysine désoxycholate (gélose XLD)
Médias fongiques
- MEA (Agar à l'extrait de malt)
- PDA (gélose de dextrose de pomme de terre)
- Agar de cellulose
- SAB (gélose Sabouraud dextrose)
- Agar à la farine de maïs
- DG18 (Dichloran-Glycérol Agar 18)
- Agar pour graines d'oiseaux
- Gélose mycobiotique
Recommandations générales concernant les milieux de culture pour l'échantillonnage de l'air en vue de la recherche de bactéries et de champignons cultivables
- Pour le prélèvement d'échantillons fongiques, nous recommandons dans la plupart des cas le MEA.
- Pour l'identification des espèces fongiques, utiliser les plaques MEA et DG18.
- Pour les prélèvements bactériens, dans la plupart des cas, nous recommandons le TSA ou le TSA avec 5% Blood.
- Pour la recherche spécifique de bactéries Gram négatives, nous recommandons la gélose MacConkey.
- Le département de microbiologie se fera un plaisir de vous faire des recommandations en fonction de votre situation d'échantillonnage particulière.
Milieux de culture fongique
| MEA (Agar à l'extrait de malt) | Milieux de référence pour la spéciation des champignons. |
| PDA (gélose de dextrose de pomme de terre) | Milieux de culture à usage général utilisés pour l'isolement des champignons et des moisissures. |
| Agar de cellulose | Milieux microbiens polyvalents utilisés pour isoler des champignons hydrophiles capables d'utiliser des glucides complexes. Le plus souvent recommandés dans les études sur la qualité de l'air intérieur. Stachybotrys contamination sp. |
| Agar à la farine de maïs | Milieux de culture polyvalents pour les champignons environnementaux, couramment utilisés dans les études sur la qualité de l'air intérieur. Stachybotrys chartarum contamination. |
| DG18 (Dichloran-Glycérol Agar 18) | Milieux contenant du glycérol 18%, utilisés pour la récupération de levures et de moisissures xérophiles. Recommandés pour la récupération dans des environnements secs tels que les zones de stockage et de production de poudres sèches. |
| Agar pour graines d'oiseaux | Pour l'isolement de Cryptococcus neoformans. |
| Gélose mycobiotique | Pour l'isolement d'Histoplasma capsulatum |
Milieux de culture bactérienne
| TSA (gélose trypticase soja) | Milieux à usage général pour l'isolement et la culture des bactéries (Gram positif et Gram négatif). |
| TSA avec 5% Sang | Milieux de culture à usage général pour la culture, l'isolement et la détermination de l'activité hémolytique des bactéries. |
| MAC (MacConkey) | Pour les procédures quantitatives d'isolement des bactéries Gram négatives et de différenciation de ces micro-organismes par fermentation du lactose. |
| Agar HE (Hekton Enteric) | Pour l'isolement et la différenciation des micro-organismes entériques à Gram négatif. |
| Gélose BCYE (gélose au charbon actif et à la levure tamponnée) | Pour l'isolement, la sélection et la différenciation de légionelles sp. échantillons environnementaux. |
| MSA (gélose au sel et au mannitol) | Pour l'isolement et la différenciation sélectifs de Staphylocoque sp. |
| EMB (Éosine Bleu de Méthylène) | Pour l'isolement et la différenciation des bactéries Gram négatives. |
| BE (gélose à l'esculine biliaire) | Pour l'isolement et l'identification du groupe D Streptocoque sp. |
| Gélose xylose lysine désoxycholate (gélose XLD) | Pour l'isolement et la différenciation de Salmonelle sp. |


