VIA-PACT 400 Manual de instrucciones
Manual de funcionamiento del muestreador de partículas microbianas viables
Introducción
El contenido microbiano del aire ha sido un tema de creciente preocupación. Un informe de la EPA reveló que los problemas de calidad del aire interior (CAI) cuestan a las empresas 1.040.600 millones de dólares anuales, y dado que la mayoría de las personas pasan la mayor parte del tiempo en interiores, aproximadamente 901.030 millones de dólares, esto es motivo de enorme preocupación.
Se han demostrado numerosos casos de gran repercusión mediática relacionados con los microorganismos que afectan a la calidad del aire interior. Uno de los primeros casos de gran repercusión fue el brote mortal de legionela ocurrido en 1976 durante una convención de la Legión Americana. La creciente concienciación, las preocupaciones sanitarias y las responsabilidades legales han convertido la calidad del aire interior en uno de los principales problemas medioambientales.
Los aerosoles biológicos se definen como partículas sólidas o líquidas viables presentes en el aire. Su tamaño puede variar desde virus de 0,1 micras de diámetro hasta esporas de hongos de 100 micras o más de diámetro. Estos organismos pueden presentarse como organismos individuales no adheridos o como agregados múltiples.
Los muestreadores de bioaerosoles presentan dos limitaciones para obtener resultados útiles. En primer lugar, el organismo debe estar separado del aire para realizar un ensayo viable y, en segundo lugar, el organismo debe ser viable y capaz de reproducirse para proporcionar resultados útiles.
Muestreador de partículas viables de una sola etapa
El Via-Pact 400 es un dispositivo de aluminio ensamblado mediante tres abrazaderas de resorte y sellado con dos juntas tóricas. La unidad consta de tres etapas principales: un cono de entrada, una etapa de clasificación de chorro y una placa base.
El cono de entrada es la parte superior del impactador. El aire pasa primero por esta etapa al entrar en el impactador. La etapa de clasificación por chorro contiene 400 orificios perforados con precisión. Cuando el aire es aspirado a través del muestreador, pasa por estos orificios, dirigiendo las partículas en suspensión hacia la superficie de recolección de agar. La base del impactador incluye una boquilla para conectar la bomba. Tres puntas sobresalen de la base para sujetar la placa de Petri de tamaño estándar.
Equipo de muestreo recomendado:
- VP-400
- Bomba de vacío de alto volumen capaz de extraer
- 28,3 litros por minuto
- rotámetro
- Tubos de PVC flexibles
- Medio de muestreo (placa de Petri de tamaño estándar de 15 x 100 mm)
- Bolsas de plástico sellables (bolsas con cierre tipo cremallera)
- Alcohol isopropílico (70%)
- Desinfectante de manos o guantes desechables de un solo uso
- Gasa o toalla de papel
- Rotulador o bolígrafo de tinta permanente
Método de muestreo
Ajuste del caudal de aire
- Conecte la boquilla de la manguera del VP-400 al lado de entrada de la bomba utilizando el tubo flexible, asegurándose de que las conexiones no tengan fugas.
- Con el VP-400 y la tubería conectados a la bomba, ajuste el flujo de aire de la bomba de muestreo a 28,3 l/min con un caudalímetro calibrado con un patrón primario. Apague la bomba.
- No coloque una placa de agar en el muestreador mientras calibra el caudalímetro, ya que la contrapresión del medio de muestreo no es significativa.
- Tras ajustar el caudal, limpie todas las superficies del VP-400 con alcohol isopropílico utilizando una gasa estéril.
Recolección de muestras
- Lávese las manos con un desinfectante para manos o utilice guantes desechables de un solo uso y desinfecte o cambie los guantes en cualquier punto donde sea posible la contaminación cruzada.
- Desenganche los resortes de la tapa del VP-400 y retire el cono de entrada y la etapa de clasificación del chorro, dejando al descubierto la base.
- Coloque una placa de agar sobre la base (con el medio de cultivo adecuado), apoyándola sobre las tres puntas de la base. Retire la tapa de la placa de agar y colóquela, con el lado estéril hacia abajo, sobre la superficie limpia.
- Vuelva a colocar inmediatamente la etapa de clasificación por chorro y el cono de entrada en la base, asegurándose de que las juntas tóricas sellen correctamente en cada conexión. Sujete el dispositivo con las tres abrazaderas de resorte y compruebe visualmente que el sellado sea correcto.
- Coloque el VP-400 sobre una superficie nivelada a una altura de 3 a 4 pies, o sobre un soporte de muestreo completamente extendido. Encienda la bomba de vacío durante el tiempo adecuado.
- Apague la bomba y suelte las tres abrazaderas. Vuelva a colocar rápidamente la tapa de la placa de agar y retire la placa. Examine la superficie del agar en busca de marcas de impacto. La ausencia de marcas de impacto en el agar puede indicar un sellado incorrecto de las juntas tóricas durante la toma de la muestra, lo que requiere repetir la toma de la muestra. (Sin embargo, en climas húmedos, es posible que no haya marcas de impacto debido al exceso de humedad en el aire).
- Coloque la placa de agar dentro de una bolsa de plástico con cierre hermético. Marque la bolsa con la información de identificación de la muestra correspondiente.
- Asegure las muestras y la cadena de custodia en un contenedor de envío refrigerado y entréguelas/envíelas al laboratorio para su análisis.
- Antes de tomar otra muestra, consulte el paso # 1.
Control de calidad
La bomba de vacío debe calibrarse con un patrón primario antes de su uso y recalibrarse cuando se presenten temperaturas o presiones no estándar. También se debe analizar una placa en blanco sin exponer con cada muestreo como control negativo. Asimismo, se deben recolectar muestras de exteriores para compararlas con las de interiores. Se debe tomar una muestra de control de interiores de áreas que no cumplan con los requisitos. Nunca utilice medios de muestreo caducados, con grietas visibles o contaminados.
Medios de muestra
Con este muestreador se puede utilizar cualquier medio de cultivo en una placa de Petri de tamaño estándar (15 x 100 mm). Los siguientes medios se utilizan habitualmente en la mayoría de las investigaciones de bioaerosoles. Se pueden emplear medios personalizados para aplicaciones específicas.
Bacterias: El agar tripticasa de soja (TSA) y el agar tripticasa de soja con sangre de oveja 5%, o agar sangre (BAP), son medios de cultivo de amplio espectro comúnmente aceptados para el aislamiento de bacterias.
Hongos: El agar de dextrosa de patata (PDA), el agar de extracto de malta (MEA) y el agar de diclorán glicerol 18 (DG-18) son medios de cultivo de amplio espectro comúnmente aceptados para el aislamiento de hongos.
Presentación de muestra
Es fundamental garantizar la integridad de la muestra desde su recolección inicial hasta la entrega del informe final. Esto incluye la posibilidad de rastrear la posesión de la muestra desde el punto de recolección hasta su recepción en el laboratorio. Todas las muestras enviadas a un laboratorio deben ir acompañadas de un formulario de Cadena de Custodia debidamente cumplimentado. Este formulario contiene campos para el informe, la identificación de la muestra, los análisis solicitados y otra información importante.
Todas las muestras deben estar debidamente etiquetadas con su identificación en la parte inferior de la placa de agar. Cada muestra debe sellarse en una bolsa con cierre hermético u otro recipiente adecuado para evitar la contaminación durante el transporte. Las muestras deben almacenarse y enviarse en un recipiente, como una nevera portátil con hielo seco, para preservar su integridad, y deben ser recibidas por el laboratorio en un plazo de 24 horas.
Análisis de laboratorio
Si se van a enviar muestras a un laboratorio comercial, se recomienda encarecidamente utilizar un laboratorio que haya sido acreditado por A2LA o por el programa EMLAP de la Asociación Estadounidense de Higiene Industrial (AIHA).
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