VIA-PACT 400 Manual de Instruções
Manual de Operação do Amostrador de Partículas Microbianas Viáveis
Introdução
O conteúdo microbiano do ar tem sido uma área de crescente preocupação. Um relatório da EPA (Agência de Proteção Ambiental dos Estados Unidos) constatou que os problemas de Qualidade do Ar Interior (QAI) custam às empresas 1,4 trilhão de dólares anualmente e, como a maioria das pessoas passa a maior parte do tempo em ambientes fechados, aproximadamente 90,1 trilhão de dólares, isso é motivo de enorme preocupação.
Os problemas microbiológicos relacionados à qualidade do ar interior foram demonstrados em inúmeros casos de grande repercussão. Um dos primeiros casos de grande repercussão foi o surto fatal de Legionella em 1976, durante uma convenção da Legião Americana. A crescente conscientização, as preocupações com a saúde pública e as responsabilidades legais elevaram a qualidade do ar interior a uma das principais questões ambientais.
Aerossóis biológicos são definidos como partículas sólidas ou líquidas viáveis presentes no ar. Seu tamanho pode variar de vírus com 0,1 mícron de diâmetro a esporos de fungos com 100 mícrons ou mais de diâmetro. Esses organismos podem ocorrer individualmente ou em agregados múltiplos.
Existem duas limitações para a obtenção de resultados úteis em amostras de bioaerossóis. Primeiro, o organismo deve ser separado do ar para que a análise seja viável e, segundo, o organismo deve ser viável e capaz de se reproduzir para que os resultados sejam úteis.
Amostrador de partículas viáveis de estágio único
O Via-Pact 400 é um dispositivo de alumínio montado por três grampos de mola e vedado com duas juntas de anel de vedação. A unidade consiste em três estágios principais: um cone de entrada, um estágio de classificação de jatos e uma placa de base.
O cone de entrada é a parte superior do impactor. O ar passa primeiro por este estágio ao entrar no impactor. O estágio de classificação do jato contém 400 orifícios perfurados com precisão. Quando o ar é aspirado através do amostrador, ele passa por esses orifícios, direcionando quaisquer partículas em suspensão para a superfície de coleta do ágar. A base do impactor inclui uma conexão para mangueira para a bomba. Três dentes se projetam da base para suportar a placa de Petri de tamanho padrão.
Equipamento de amostragem recomendado:
- VP-400
- Bomba de vácuo de alto volume capaz de puxar
- 28,3 Lpm
- Rotâmetro
- Tubo flexível de PVC
- Meio de amostragem (placa de Petri de tamanho padrão 15 x 100 mm)
- Sacos plásticos seláveis (sacos tipo zip)
- Álcool isopropílico (70%)
- Álcool em gel ou luvas descartáveis de uso único
- Gaze ou toalha de papel
- Marcador ou caneta permanente
Método de amostragem
Ajuste da taxa de fluxo de ar
- Conecte o bocal da mangueira do VP-400 à entrada da bomba usando a mangueira flexível, certificando-se de que as conexões não apresentem vazamentos.
- Com a bomba VP-400 e a tubulação conectadas, ajuste o fluxo de ar da bomba de amostragem para 28,3 L/min com um medidor de fluxo calibrado com um padrão primário. Desligue a bomba.
- Não coloque uma placa de ágar no amostrador durante a calibração do medidor de vazão, pois a contrapressão do meio de amostragem não é significativa.
- Após ajustar a vazão, limpe todas as superfícies do VP-400 com álcool isopropílico usando uma gaze estéril.
Coleção de amostras
- Higienize as mãos com desinfetante para as mãos ou use luvas descartáveis de uso único e higienize-as ou troque-as sempre que houver possibilidade de contaminação cruzada.
- Desencaixe as molas da tampa do VP-400 e remova o cone de entrada e o estágio de classificação do jato, expondo a base.
- Coloque uma placa de ágar na base (com o meio de cultura apropriado), permitindo que a parte inferior se apoie nos três pinos da base. Remova a tampa da placa de ágar e coloque-a, com o lado estéril voltado para baixo, sobre a superfície limpa.
- Recoloque imediatamente o estágio de classificação do jato e o cone de entrada na base, certificando-se de que os anéis de vedação estejam bem encaixados em cada conexão. Fixe o dispositivo com as três presilhas de mola e verifique visualmente se a vedação está correta.
- Coloque o VP-400 em uma superfície nivelada a uma altura de 90 a 120 cm, ou em um suporte de amostragem totalmente estendido. Ligue a bomba de vácuo pelo tempo apropriado.
- Desligue a bomba e solte as três presilhas. Recoloque rapidamente a tampa da placa de ágar e remova a placa. Examine a superfície do ágar em busca de sinais de impactação. A ausência de marcas de impactação no ágar pode indicar vedação inadequada dos anéis de vedação durante a coleta da amostra, exigindo uma nova coleta. (No entanto, em climas úmidos, as marcas de impactação podem não estar presentes devido ao excesso de umidade no ar.)
- Coloque a placa de ágar dentro de um saco plástico com fecho hermético. Identifique o saco com as informações de identificação da amostra.
- As amostras e a cadeia de custódia devem ser acondicionadas em um contêiner refrigerado e o transporte deve ser encaminhado ao laboratório para análise.
- Antes de coletar outra amostra, consulte novamente a etapa # 1.
Controle de qualidade
A bomba de vácuo deve ser calibrada com um padrão primário antes do uso e recalibrada quando forem encontradas temperaturas ou pressões fora do padrão. Uma placa em branco, não exposta, também deve ser analisada em cada coleta de amostras como controle negativo. Amostras externas também devem ser coletadas para comparação com as amostras internas. Uma amostra de controle interna deve ser coletada em áreas que não apresentem defeitos. Nunca utilize meios de amostragem vencidos, com rachaduras visíveis ou contaminados.
Mídia de amostra
Qualquer meio de cultura em uma placa de Petri de tamanho padrão (15x100mm) pode ser usado com este amostrador. Os seguintes meios de cultura são normalmente usados na maioria das investigações de bioaerossóis. Meios de cultura personalizados podem ser empregados para aplicações específicas.
Bactérias: O ágar triptona de soja (TSA) e o ágar triptona de soja com sangue de carneiro 5%, ou ágar sangue (BAP), são meios de cultura de amplo espectro comumente aceitos para o isolamento de bactérias.
Fungos: O ágar dextrose de batata (PDA), o ágar extrato de malte (MEA) e o ágar diclorano glicerol 18 (DG-18) são meios de cultura de amplo espectro comumente aceitos para o isolamento de fungos.
Envio de amostra
É essencial garantir a integridade da amostra desde a coleta inicial até a emissão do laudo final. Isso inclui a capacidade de rastrear a posse da amostra desde o ponto de coleta até o recebimento no laboratório. Todas as amostras enviadas a um laboratório devem ser acompanhadas de um formulário de Cadeia de Custódia preenchido. Este formulário contém campos para emissão do laudo, identificação da amostra, análises solicitadas e outras informações importantes.
Todas as amostras devem ser devidamente identificadas com um código de identificação na parte inferior da placa de ágar. Cada amostra deve ser selada em um saco plástico com fecho hermético ou outro recipiente adequado para evitar qualquer contaminação durante o transporte. As amostras devem ser armazenadas e transportadas em um recipiente, como uma caixa térmica com gelo, para preservar a integridade da amostra e devem ser recebidas pelo laboratório em até 24 horas.
Análises laboratoriais
Caso as amostras precisem ser enviadas para um laboratório comercial, recomenda-se fortemente que seja utilizado um laboratório credenciado pela A2LA ou pelo programa EMLAP da Associação Americana de Higiene Industrial (AIHA).
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